吉林省科技发展计划基金(20100118)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：吴江车丽赫王明宇孙欣王全颖更多>>
- 相关机构：吉林大学白求恩第一医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金吉林省科技发展计划基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抗Aβ42细胞内抗体TAT-6His-mAbA/B的构建
- 2011年
- 目的构建能够在细胞内特异性拮抗Aβ42的小分子细胞内抗体TAT-6His-mAbA/B,为细胞内抗体技术用于AD的诊断和治疗提供新依据。方法根据GenBank提供的Aβ42单克隆抗体的已知序列,选取重链和轻链可变区(CDR1和CDR3)进行偶联,应用DNASIS计算机软件设计引物,通过两次PCR获得目的片段mAbA/B。将目的片段与pGEM-Teasy载体相连,限制性内切酶酶切鉴定重组质粒,Sanger单链末端终止法测出克隆的核苷酸序列。结果限制性内切酶EcoR I酶切pGEM-TEasy/mAbA/B,可见132bp或141bp的目的片段,与理论值一致;DNASIS软件分析测序结果与GenBank所报道的结果完全一致。限制性内切酶PamHI和BamH I联合酶切pssHG-CMV/TAT-6His-mAbA/B,琼脂糖凝胶电泳鉴定重组质粒,得到大小约为400bp的融合基因TAT-6His-mAbA/B目的片段,与理论值一致。结论通过PCR方法成功克隆了Aβ42小分子细胞内抗体TAT-6His-mAbA/B片段。
- 车丽赫吴江杨弋李超王明宇王旭杨广笑王全颖孙欣杨宇
- 关键词：阿尔茨海默病细胞内抗体SCFVAΒ
