国家自然科学基金(81102084)
- 作品数：8 被引量：25H指数：3
- 相关作者：张亚楼钟近洁李甜孙小娜冯树梅更多>>
- 相关机构：新疆医科大学新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心新疆疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- NaF对RAW264.7细胞活力的影响
- 2014年
- 目的观察不同浓度NaF(0mg/L、2 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、40 mg/L、60 mg/L、80 mg/L)在不同时间(24 h、48 h、72 h),对RAW264.7细胞活力及破骨活性的影响。方法 RAW264.7细胞浓度为5×104个/ml接种24孔板,每孔加2 ml培养基;按NaF浓度和时间分组,作MTT,用酶标仪测吸光度值,判断细胞活力;免疫组织化学法测定破骨细胞内基质金属蛋白酶9(MMP-9)和组织蛋白酶K的表达。结果 NaF浓度变量和时间变量交互作用对细胞活力(吸光度值)造成显著的影响,细胞活力随NaF浓度升高依次呈梯度样显著降低;NaF浓度为20 mg/L时,RAW264.7细胞活力未见明显抑制;随着NaF作用时间延长,RAW264.7细胞活力依次呈显著升高趋势;MMP-9表达随氟剂量增高而增强,组织蛋白酶K表达各组未见差异。结论 NaF对RAW264.7细胞活力的抑制是暂时性的,随着时间的延长NaF对RAW264.7细胞活力的抑制作用减弱;氟通过提高破骨细胞内MMP-9的表达来增强破骨细胞骨吸收活性。
- 孙小娜张亚楼张东辉白生宾李建瑛是文辉董翔李佳佳许琴钟近洁
- 关键词：NAF细胞活力
- 核磁共振波谱法测定体外培养成骨细胞中氟含量的研究
- 2012年
- 目的了解染氟后体外培养成骨细胞中氟的实际含量，以及氟在成骨细胞的分布情况，为探讨氟对成骨细胞损伤的研究提供基础资料。方法体外培养成骨细胞分别染氟0、5、lO、20、40mg／L，在培养第3、10、30天时制备待测样品，每组6份。采用核磁共振波谱法，对染氟后体外培养小鼠成骨细胞的细胞质和细胞核中氟含量进行定量检测。结果①培养第3天，染氟0、5、10、20、40mg／L组细胞质中氟含量分别为（0．83±0．65）、（0．54±0．23）、（0．65±0．77）、（0．59±0．87）、（3．64±1．21）mg／L，其中染氟40mg／L组明显高于0、5mg／L组（P均〈0．05）。②培养第10天，染氟10、20、40mg／L组细胞质中氟含量[（4．03±1．23）、（3．66±0．98）、（6．26±2．10）mg／L]高于0、5mg／L组[（0．78±0．75）、（2．69±0．89）mg／L，P均〈0．05]，染氟20、40mg／L组细胞核中氟含量[（1．63±1．19）、（2．17±1．21）mg／L]高于0、5mg／L组[（0．65±0．46）、（1．57±0．33）m∥L，P均〈0．05]。③培养第30天，染氟10、20、40mg／L组细胞质中氟含量[（3．99±0．84）、（4．33±1．67）、（5．80±1．38）mg／L]高于0、5mg／L组[（0．88±0．44）、（2．84±0．43），P均〈0．05]，而染氟20、40mg／L组细胞核中氟含量[（3．33±1．46）、（3．53±1．22）mg／L]明显高于0、5mg／L组[（0．70±0．66）、（1．99±0．76）mg／L，P均〈0．05]。结论当成骨细胞处于氟环境时．氟离子很快进入细胞内，并很快在细胞核内积聚．表现出氟与骨组织的特殊亲和性。成骨细胞内氟离子量随着接触时间和接触剂量的增加而升高。
- 钟近洁钟近艺刘景全白生宾范淑玲张亚楼冯树梅秦纹陈龙李甜廖礼彬刘开泰
- 关键词：成骨细胞氟
- 过量氟对成骨细胞非折叠蛋白反应的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨钙连接蛋白(CNX)、钙网蛋白(CRT)和免疫球蛋白重链结合蛋白(BIP)在高氟处理人成骨细胞后引起非折叠蛋白反应中的作用。方法免疫印迹法测定不同浓度氟化钠处理人成骨细胞Saos-2 24 h后,细胞内CNX、CRT、生长停滞与DNA损害可诱导基因34(GADD34)和BIP蛋白表达水平。结果高氟能诱导成骨细胞内BIP表达量的增加,抑制CNX表达。对CRT蛋白表达影响较小,仅在氟化钠20 mg/L时表达增高。GADD34在所试细胞中不表达。绘制了4种蛋白相互作用的关系图。结论氟引起非折叠蛋白反应,分子伴侣CNX/CRT循环异常可能是氟骨症骨细胞受损的机制之一。
- 张亚楼李甜王洪波陈龙钟近洁
- 关键词：氟中毒成骨细胞
- 氟致成骨细胞内质网应激对骨转化基因表达的影响被引量：2
- 2014年
- 摄入过量氟能够引起成年人氟骨症.研究发现氟可以诱导成骨细胞内质网应激,同时会对成骨细胞的骨发生作用产生影响[1].将氟诱导的成骨细胞内质网应激与骨转化基因进行联合系统的研究未见报道.本研究用PCR芯片观察成骨细胞内质网应激情况下骨转化相关基因的变化,为探索氟中毒机制提供理论依据.
- 张亚楼孙小娜李甜冯树梅廖礼彬邓锋钟近洁
- 关键词：内质网应激成骨细胞骨转化基因表达细胞内质网转化基因
- 氟对人成骨细胞氧化应激和骨连接素表达的影响被引量：4
- 2012年
- 目的观察氟对体外培养人成骨肉瘤细胞内骨粘连蛋白/骨连接素(osteonectin,ON)基因表达及氧化应激状态的影响。方法采用McCOY’s 5A培养基培养人成骨肉瘤细胞Saos-2。按照染氟剂量将骨肉瘤细胞Saos-2分为0(对照组)、0.625、1.250、2.500、5.000、10.000、20.000、40.000、80.000mg/L组。培养24h后收集细胞,实时荧光定量PCR(real-time RT-PCR)测定成骨细胞成骨相关基因ON mRNA的表达,用双标准曲线法计算基因表达的相对比值。氧化应激状态用化学比色法分别测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)及丙二醛(malondialdehyde,MDA)的活性。结果 0.625、1.250、2.500、5.000mg/L组成骨肉瘤细胞ON mRNA表达分别为(0.014 3±0.032)、(0.057 3±0.02)、(0.042 8±0.017 7)、(0.076 2±0.005),低于对照组,差异有统计学意义(P均<0.01),但10.000、20.000mg/L组成骨肉瘤细胞ON mRNA表达分别为(11.6±1.01)、(12.7±1.18)、(1.65±0.00)、(1.97±0.46),明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),组间比较差异有统计学意义(F=305.842,P<0.01)。5.000～80.000 mg/L组SOD的活性分别为(94.14±3.16)、(63.36±3.63)、(53.00±4.26)、(55.50±5.89)、(53.46±6.40)×103 U/g,与对照组[(122.34±6.99)×103 U/g]比较明显降低,组间比较差异有统计学意义(F=21.734,P<0.01)。10.00mg/L组MDA的活性为(7.74±1.43)μmol/g,与对照组[(4.99±0.65)μmol/g]比较明显升高,组间比较差异有统计学意义(F=3.067,P<0.05)。成骨细胞内ON表达水平与SOD活力呈明显负相关。结论氟可能通过影响成骨细胞内骨连接素基因的表达和氧化应激状态而改变正常的成骨分化。
- 张亚楼孙小娜张丽邓锋王媛肖咏丽
- 关键词：氟中毒基因表达骨代谢
- 过量氟引起成骨细胞内质网应激信号通路的基因差异表达被引量：8
- 2014年
- 目的：观察人成骨细胞在过量氟作用下未折叠蛋白反应（UPR）信号通路的差异基因表达，探索在氟中毒条件下成骨细胞内质网应激的作用。方法体外培养人成骨细胞染氟模型，用不同浓度的氟干预24 h后M T S法检测细胞存活率和流式细胞仪检测细胞凋亡百分率，用UPR信号通路PCR Array芯片检测通路中相关基因表达的情况，并用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测蛋白表达。结果在氟化钠浓度为0、5、10、20、40、80 mg/L 时，细胞存活率分别为（100．6785±2．8303）％、（105．3934±2．5384）％、（106．1257±2．0483）％、（77．9773±2．5443）％（与对照组比较 P＜0．05）、（30．2377±0．6327）％（与对照组比较 P＜0．05）。流式细胞仪检测，凋亡率分别为5mg/L组4．8％，10mg/L组13．8％，20mg/L组37．0％，40mg/L组58．9％，80 mg/L组63．2％（P＜0．05）。PCR芯片检测发现1个基因表达下调，14个基因表达上调。Western blot结果显示， BIP、ATF4、CHOP、IRE1均呈现出不同程度的随氟剂量增加蛋白表达逐渐上调。XBP1在NaF 5～20 mg/L表达逐渐增强，在40与80 mg/L时表达减弱。结论氟化钠可以通过PERK和IRE1途径引起成骨细胞内质网应激，并且可以引起成骨细胞凋亡。
- 张亚楼孙小娜冯树梅李甜廖礼彬白生宾钟近洁
- 关键词：成骨细胞未折叠蛋白反应
- 衣霉素诱导人成骨细胞内质网应激与骨发生特征
- 2015年
- 内质网是细胞内重要的细胞器，其功能损伤可以引起内质网应激（endoplasmic reticulum stress，ERS）。ERS是细胞内一种适应性机制，可以影响成骨细胞的功能和分化，持续或过强的ERS如果不能恢复则会诱导细胞凋亡，从而导致各种骨细胞相关性疾病发生。
- 张亚楼廖礼彬冯树梅李甜郝子怡张之璐潘娟陈亚茹钟近洁
- 关键词：人成骨细胞内质网应激衣霉素诱导细胞凋亡疾病发生
- 染氟成骨细胞内质网应激分子及骨转化功能的变化被引量：10
- 2014年
- 目的了解氟致成骨细胞内质网应激状态时成骨细胞分化相关基因的表达情况。方法用原代培养的人成骨细胞建立染氟模型,流式细胞仪测定凋亡指数,并提取RNA后用PCR芯片分别检测未折叠蛋白反应和骨分化相关基因的表达情况。结果氟能够引起成骨细胞内质网应激,引起15个基因表达上调,1个基因表达下调,其中涉及内质网应激PERK、IRE1和ATF6三条信号途径。骨分化方面有32个基因表达上调,2个基因表达下调,涉及胶原、基质金属蛋白酶、整合素、骨形态发生蛋白、血管生长因子、肿瘤坏死因子等基因。结论氟引起成骨细胞内质网应激的同时,对骨转化基因的表达也产生影响。
- 张亚楼孙小娜李甜冯树梅廖礼彬陈龙邓锋王洪波秦纹钟近洁
- 关键词：氟成骨细胞内质网应激骨转化
