甘肃省自然科学基金(1308RJZA248)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：何祥一孙贵军曾飒王立鹤秦晓东更多>>
- 相关机构：兰州大学中国农业科学院兰州兽医研究所西北民族大学更多>>
- 发文基金：甘肃省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 慢病毒介导过表达端粒酶逆转录酶的人口腔黏膜上皮稳定细胞系的构建被引量：2
- 2016年
- 目的通过慢病毒法建立稳定表达外源性人端粒酶逆转录酶(h TERT)基因的口腔黏膜上皮细胞(OMECs),探索构建高效、稳定的永生化OMECs细胞系的方法。方法提取293T细胞总RNA,应用聚合酶链反应(PCR)法扩增h TERT基因全长,构建重组慢病毒载体p LVX-puro-h TERT。包装慢病毒颗粒后感染人正常OMECs,经嘌呤霉素抗性筛选获得阳性克隆,采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测h TERT基因m RNA和蛋白的表达水平。结果成功构建了p LVX-puro-h TERT过表达慢病毒载体并感染到OMECs中;感染细胞与正常OMECs形态相似,呈铺路石样生长;实时荧光定量PCR和Western blot结果均显示,h TERT在感染细胞中高表达,与正常细胞相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过慢病毒法成功建立了过表达h TERT的OMECs稳定细胞系,为构建高效、稳定增殖的人永生化OMECs细胞系奠定了实验基础。
- 曾飒秦晓东何祥一车春晓张潇解斯羽孙贵军王立鹤
- 关键词：口腔黏膜上皮细胞人端粒酶逆转录酶
- 节杆菌A3分裂蛋白FtsQ基因克隆及其功能预测
- 2014年
- 利用TAIL-PCR(Thermal Asymmetric Interlaced PCR)方法克隆节杆菌A3 ftsq基因序列,基于生物信息学软件分别进行ftsq序列同源性分析、蛋白质FtsQ跨膜域及三级结构预测,初步预测该基因所编码蛋白FtsQ的功能.结果表明:节杆菌A3 ftsq基因全序列1035 bp,编码氨基酸344个;节杆菌A3 ftsq基因与谷氨酸棒状杆菌、结核分枝杆菌和天蓝色链霉菌ftsq亲缘关系比较近,与大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、新月柄杆菌和肺炎链球菌亲缘关系比较远;节杆菌蛋白质FtsQ为一次跨膜蛋白,包括膜内域(1-114氨基酸残基)、跨膜域(115-139氨基酸残基)和膜外域(140-344氨基酸残基);空间结构预测节杆菌FtsQ膜内域和跨膜域空间结构缺失.因此,节杆菌A3 FtsQ蛋白与大肠杆菌、枯草芽孢杆菌FtsQ膜内域在长度和空间结构存在显著不同,其膜内域较长,较长的膜内域段可能取代了缺失的FtsA的功能,辅助Z环的锚定和下游蛋白的吸附.当节杆菌A3处于电离、辐射、寒冷等极端环境时,ftsq或许是节杆菌生存的必须基因;当节杆菌处于实验条件温度为20℃,营养充足,ftsq则可能是非必须基因.节杆菌A3 FtsQ在细菌细胞分裂时可能通过与上游蛋白、下游蛋白相互作用,确定细胞分裂位点和速度;同时FtsQ参与合成肽聚糖,一方面,促使细胞内陷皱缩,细胞一分为二;另一方面,FtsQ合成厚厚的细胞壁以适应极端环境的需要.
- 袁杰周建业吾斯曼江.艾尔肯李志强何祥一
- 关键词：基因克隆
- 不同采样方法对口腔变形链球菌检出率的影响被引量：1
- 2017年
- 目的:比较浓缩含漱法、非刺激性唾液法和棉拭子法对高龋和健康人群口腔唾液中变形链球菌检出率的影响。方法:对60例高龋患者和60例无龋者分别用棉拭子法、非刺激性唾液法和浓缩含漱法进行取样,采用轻唾选择培养基对变形链球菌进行培养,结合显微镜观察对3种方法收集到的变形链球菌进行鉴定,并用SPSS 22.0对数据进行统计学分析。结果:3种采样方法在高龋者中检出率分别为93.33%、96.67%、91.67%,无龋者中检出率分别为56.57%、58.33%、48.33%,无统计学显著性差异。结论:3种方法口腔唾液取样一致性较好。其中,棉拭子法采集到的唾液具有良好的代表性。
- 尹峥嵘孙贵军胡慧珍武涛何祥一
- 关键词：采样方法变形链球菌检出率
