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国家教育部博士点基金(20040558098)
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1
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转化生长因子β1诱导肾小管上皮细胞转分化的蛋白质组学研究
被引量:5
2008年
目的研究转化生长因子(TGF)β1诱导肾小管上皮细胞(NRK52E)转分化(EMT)过程中相关靶蛋白的表达变化。方法应用比较蛋白质组学方法。用双向凝胶电泳(2-DE)对TGF-β1刺激组和对照组NRK52E细胞总蛋白进行分离。两组间差异蛋白点用质谱和数据库搜索鉴定,并用RT-PCR和Western印迹在蛋白质和mRNA水平上进一步检测验证。结果鉴定出22个差异蛋白,包括与细胞骨架相关蛋白、参与物质转化和能量代谢的酶类、与蛋白翻译后修饰相关蛋白、细胞因子及其他蛋白等。应用RT-PCR验证了转胶蛋白(transgelin)、ATP合成酶α亚型、苹果酸脱氢酶、丝氨酸(半胱氨酸)蛋白酶抑制因子、泛素结合酶9(Ubc9)和表皮生长因子8在mRNA水平的表达差异,与2-DE结果一致。用Western印迹验证了transgelin、ATP合成酶α亚型两种蛋白的表达差异,亦与2-DE结果一致。结论TGF-β1刺激NRK52E细胞EMT发生过程中可诱导包括与细胞骨架相关蛋白、与翻译后修饰相关蛋白、代谢酶类及细胞因子等多种蛋白表达变化。本研究结果有助于深入理解EMT的具体分子机制及阐明肾脏疾病慢性进展的机制。
文琼
余学清
黄昭
李晓艳
骆宁
聂静
刘炜
黎明涛
关键词:
蛋白质组学
转化生长因子Β
上皮细胞
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