公共文化服务平台

共 5 条记录，以下是 1-5

全选清除导出

排序方式：

假单胞菌表达载体pYMB03的构建与性能分析被引量：4: 2008年; 恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)是具有强抗逆性能的环境优势菌,构建其质粒表达载体有着明显的应用潜力.将恶臭假单胞菌AB92019菌株中肽聚糖相关脂蛋白编码基因的启动子PoprL和质粒载体pTrcHis-B的多克隆位点片段插入到质粒载体pUCP18的EcoRI/HindIII位点,获得了重组载体pYMB03.用绿色荧光基因gfp作为标记进行外源蛋白表达的结果表明,该载体能分别在恶臭假单胞菌AB92019菌株和大肠杆菌DH5a菌株中,由启动子PoprL启动组成型表达GFP蛋白并使细胞产生可见荧光.经SDS-PAGE验证,所产生的GFP蛋白分别占细胞总蛋白的12.5%和5.0%.重组菌株YMB001中GFP表达量与菌体培养时间有关,在稳定期后期其相对荧光强度达到最大值(D600nm=1.0),但与培养温度未见相关性.对携带该载体的2株重组恶臭假单胞菌7次168h继代培养测定,载体pYMB03的稳定性均为100%.; 叶婷姚陈李茜茜张红星李林; 关键词：假单胞菌启动子

细胞表面展示有机磷水解酶的恶臭假单胞菌工程菌的构建及全细胞酶活性分析被引量：10: 2008年; 利用丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)冰核基因的N-末端(inpn)作为锚定单元(anchoring mo-tif),通过与来自黄杆菌属(Flavobacteriumsp.)的有机磷水解酶基因opd构建融合基因inpn-opd,并连接于假单胞菌表达载体pYMBP,然后导入恶臭假单胞菌(P.putida)野生型菌株AB92019,获得了能在其细胞表面展示有机磷水解酶并具有全细胞酶催化活性的重组工程菌MMBL-opd。SDS-PAGE结果表明,融合基因能表达产生80 ku的蛋白质。重组菌MMBL-opd在无抗性LB固体培养基上能稳定生长,所携带的外源质粒的稳定性达到100%;在添加100μmol/L Co2+培养基上28℃培养48 h,表面展示的有机磷水解酶具有最高全细胞酶活性,为0.036 U/mg。用蛋白酶K消化处理重组菌表面蛋白可使其全细胞酶活降低92%。重组菌在PBS缓冲液中于4℃条件下保存30 d,仍能保持93%的全细胞酶活。; 张红星李茜茜叶婷李维琳李林; 关键词：有机磷水解酶细胞表面展示生物降解

1株高冰核活性细菌的分离与鉴定被引量：2: 2008年; 从发生冻害的植物组织中分离到1株冰核细菌MB03,该菌株在-3℃时在2min内的冻结率达到96.5%,而产生1个冰核所需要的细胞数约为2.9×103个,其冰核活性明显高于冰核细菌标准菌株和其它分离菌株。进一步对MB03进行了鉴定,经个体形态与培养特征观测、部分生理生化反应、G+C摩尔分数测定、16SrDNA序列对比分析、菌落原位杂交探测特异性基因和PCR扩增冰核基因等鉴定,确定该菌为丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)。; 胡芸李茜茜蔡皓张红星李林; 关键词：丁香假单胞菌

细菌表面展示技术在有机磷农药降解中的应用被引量：4: 2008年; 通过微生物代谢作用来生物降解有机磷农药被认为是安全有效的途径,而近年来发展的细胞表面展示技术,由于是将农药降解酶定位在细胞表面,具有提高反应效率、可再生和减少对细胞的毒害等多种优点,从而为有机磷农药的生物降解与转化提供了一种新的技术对策,已显示出广阔的应用前景。; 张红星李茜茜叶婷李林; 关键词：有机磷农药生物降解

有机磷水解酶的大肠杆菌细胞表面展示与酶活特性被引量：7: 2008年; 利用丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)KCTC1832菌株的冰核蛋白(InaK)的N-末端作为锚定单元和来自黄杆菌(Flavobacterium sp.)ATCC27551菌株opd基因编码的有机磷水解酶作为功能蛋白,构建了一株具有全细胞催化效应的大肠杆菌(Escherichia coli)表面展示工程菌MMBL-405.对该工程菌全细胞有机磷水解酶活性的正交试验结果表明,在诱导物IPTG浓度为0.1 mmol/L、诱导温度为20℃、诱导时间为8 h和Co2+添加浓度为100μmol/L的优化培养条件下,其全细胞酶活性可达到0.62 U/mg细胞干重,是目前国外同类工作所报道酶活性的13.7倍以上.对工程菌所携带的外源质粒在无抗性条件下的稳定性进行了测定,结果表明工程菌经连续转接7次和继代培养168 h后,质粒携载率仍达到60%.; 张红星李茜茜叶婷郑世学李林; 关键词：有机磷水解酶生物降解

全选清除导出

共1页<1>

国家自然科学基金(30370026)