国家自然科学基金(39970330)
- 作品数：13 被引量：48H指数：4
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- 相关机构：第三军医大学大坪医院第三军医大学解放军第十五中心医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 反义肽的设计及其在疾病治疗中的应用
- 2003年
- 反义肽是由反义DNA链从 5’→ 3’或 3’→ 5’方向阅读、转录、翻译合成的蛋白多肽。研究发现 ,反义肽、正义肽及其抗体间存在专一性相互作用。近年来以这种相互作用为基础的研究较多 ,并被广泛应用于各个领域。反义肽作为一种新型的药物用于某些疾病的治疗 ,已显示出潜在的应用价值。
- 巫振洪吕凤林吴玉章
- 关键词：高血压自身免疫性疾病人类免疫缺陷病毒急性肺损伤分子设计
- 研究C5a反义肽的理论价值和实际意义被引量：6
- 2002年
- 存在于蛋白质中某些相邻片段的微小表面之间的疏水作用力可以稳定天然蛋白质的构象 ,它也是小肽与蛋白质特异性结合过程中的主要驱动力。在正义DNA链上编码亲水性氨基酸残基的密码子 ,其同一阅读框内所对应的反义DNA链上大多会编码疏水性氨基酸 ,反之亦然。Mekler Biro Blalock模型 (MBB)认为正义 反义肽的相互作用是根据Kyte&Doolittle的疏水 亲水复合指数的疏水性反互补机制 (hydrophobicanticomplementarity)而实现的。在离体和在体实验中 ,都存在有正义 反义多肽发生相互作用的现象 ,如 :一氧化氮合成酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)的钙调蛋白结构域的反义肽 ,0 .0 1～ 1 .0mmol L的浓度就能够抑制结构型和诱导型NOS ,其IC(50 )值分别为 98mmol L和 56mmol L ;内皮素受体 (endothelinreceptor ,ETR A)一个片段的反义肽ETR P1 f可抑制内皮素诱导的颈动脉和股动脉血管收缩 ,1 .0 μmol LETR P f反义肽将明显抑制ET 1的功能活性。 0 .2 5μmol L的人C5a反义肽可以保护小鼠免受rh C5a的攻击 ,单独使用rh C5a会使小鼠发生中毒反应 。
- 吕凤林
- 关键词：分子设计补体免疫学
- C5a反义肽对肺血管内皮细胞与中性粒细胞粘附的影响被引量：7
- 2003年
- 目的 :探讨补体C5a反义肽在C5a过敏毒素介导的肺血管内皮细胞与中性粒细胞粘附中的阻断作用。方法 :采用流式细胞术 ,检测C5a与其反义肽相互作用后再刺激人肺血管内皮细胞 (PVEC) ,对细胞表面粘附分子P选择素 (P Selec tin)表达的影响 ;同时通过测定粘附于血管内皮细胞表面的PMN中髓过氧化物酶 (MPO)活性 ,间接反映血管内皮细胞表面粘附的PMN数量的变化。结果 :发现反义肽R4可以剂量依赖关系抑制C5a介导的PVEC上粘附分子P Selectin的表达 ,当R4浓度为 5 0 0 0ng ml时 ,可使P Selectin的表达量下降 2 0 %左右 ,进一步增加R4的浓度 ,P Selectin表达量无显著性改变 ;另外 ,反义肽R4对PVEC与PMN的粘附也有明显抑制作用 ,表现为PVEC上粘附的PMN中MPO活性的降低 ,当R4的浓度增加到 5 0 0 0ng ml,MPO的活性可降低近 4 0 %左右。结论 :C5a反义肽对C5a过敏毒素的生物学活性具有一定的拮抗作用。
- 巫振洪吕凤林胡承香吴玉章
- 关键词：C5A粘附分子血管内皮细胞髓过氧化物酶
- 急性肺损伤患者血清C5a对肺血管内皮细胞依赖性粘附的影响被引量：3
- 2003年
- 目的 探讨急性肺损伤 (ALI)早期肺血管内皮细胞损伤的机制及介导血管内皮细胞依赖性粘附的分子基础。方法 夹心酶联免疫吸附 (ELISA)法测定和比较正常人及ALI后患者血清中C5a的含量 ;用流式细胞术 (FCM )检测ALI患者血清刺激人肺血管内皮细胞 ,观测其表面粘附分子 :P选择素和细胞间粘附分子 (ICAM ) 1的表达变化 ,同时通过检测粘附于血管内皮细胞表面的中性粒细胞 (PMN )中髓过氧化物酶 (MPO)活性 ,间接反映血管内皮细胞表面PMN的粘附和聚集。结果 ALI患者血清中C5a含量明显升高 ,同正常组比较差异有显著性 ;原代培养的肺血管内皮细胞 ,受ALI患者血清刺激后 ,其表面P 选择素的表达迅速增加 ,2 0min达到高峰 ,60min后开始降低 ,而ICAM 1的表达较慢 ,3h开始升高 ,12h达到最高值 ,2 4h内无明显下降 ,仍维持在较高水平 ;血管内皮细胞表面粘附的PMN中MPO的活性 ,3h明显升高 ,12h后达到最高值。结论ALI患者血清中C5a含量明显升高 ,促进了PMN在肺微血管内的扣押、聚集进而同血管内皮细胞相粘附 ;而血管内皮细胞依赖性粘附的增强 ,主要是源血管内皮细胞上P 选择素和ICAM 1的表达增加 ,它们在ALI的发生、发展中起到重要作用。
- 巫振洪吕凤林吴玉章胡承香吕博李元朝
- 关键词：急性肺损伤血清C5A肺血管内皮细胞粘附分子
- 烧伤患者血清对肺毛细血管内皮细胞与中性粒细胞粘附特性的研究被引量：2
- 2002年
- 目的 探讨烧伤继发急性肺损伤 (acutelunginjury ,ALI)患者肺毛细血管内皮细胞(PVEC)与中性粒细胞 (PMN)的粘附能力 ,观察C5a在PVEC PMN粘附行为中的作用程度及规律。 方法 采用微管吸吮技术 ,定量测定PVEC PMN之间粘附力值变化 ;测定髓过氧化酶 (MPO)活性 ,反映PVEC粘附PMN的数量。 结果 随着rh C5a浓度上升 ,PVEC粘附了更多的PMN ;粘附力值也逐渐增加 ,3 0 0 μg/Lrh C5a时差异有非常显著性意义 (P <0 .0 1) ;MPO也随之上升 ;工作浓度为 1∶10 4 的anti C5aRMcAb可缓解急性肺损伤 (ALI)血清所致的MPO增加 ,呈量效关系 , 结论 C5a、C5aR共同参与了PVEC PMN的粘附过程。而且急性肺损伤所致的粘附力值上升可被anti C5aRMcAb所抑制 ,提示C5a。
- 吕凤林朱锡华胡承香黄云辉
- 关键词：烧伤肺毛细血管中性粒细胞髓过氧化酶微管吸吮血管内皮细胞
- 利用光学生物传感技术筛选C5a拮抗多肽被引量：2
- 2004年
- 目的 :筛选人过敏毒素C5a的拮抗反义多肽 ,并进一步研究其分子间相互作用的动力学特性。方法 :借助于生物分子相互作用分析技术 (BIA) ,筛选可与C5a特异性结合的反义肽 ,并对其分子间的相互作用进行动力学分析。结果 :在设计合成的 4条反义肽中 ,筛选出一条反义多肽 (R4 ) ,其与C5a分子间相互作用的解离平衡常数值 (KD)o 6 6 2× 10 -6mol/L ;与其对应的功能活性区片段L2间的KD 值为 7 0 2× 10 -7。结论 :光学生物传感器是一种研究生物大分子间相互作用的理想工具 ,可用于弱亲和力分子间结合与解离的动力学分析及拮抗效应多肽的筛选。
- 巫振洪吕凤林李元朝吴玉章
- 关键词：C5A生物分子相互作用动力学分析生物传感器
- 人C5a B细胞表位的设计与其单克隆抗体的结合被引量：8
- 2003年
- 吕凤林巫振洪李元朝何萍胡承香
- 关键词：B细胞表位单克隆抗体抗原抗体滴度
- 光学生物传感器在研究正、反义肽间选择性相互作用中的应用被引量：4
- 2003年
- 目的 观察生物分子间相互作用动力学、亲和力及特异性 ,研究C5a与其反义肽的相互作用规律。方法 应用生物分子相互作用实时分析系统IAsysPlus,以反义肽R4为固定相 ,L2和rhC5a为流动相 ,采用FASTplot软件对选择结果优化的反应模式 ,计算各动力学参数值。结果 反义肽R4与配体rhC5a相互结合的KD=6 .6 2× 1 0 -6mol,直线在Y轴上的截距(解离常数 )Kdiss为 0 .0 2 2 5s-1 ;与L2的KD=4 .5 0 8× 1 0 -6mol。结论 生物传感器技术可以用于正义 反义肽之间相互作用的研究中 ,且反义肽R4可与其正义肽。
- 胡承香曾焕芬巫振洪吕凤林
- 补体靶向治疗研究进展被引量：3
- 2003年
- 越来越多的证据表明 ,炎性疾病的发生、发展同补体的活化有关。因此 ,如何干扰和抑制补体活化产生的有害作用 ,成为药理学研究的焦点之一。利用内源性可溶性补体抑制剂来阻断级联反应中的关键蛋白、或中和补体激活产生的过敏毒素C5a及干扰CR3介导的中性粒细胞同血管内皮细胞的粘附等 ,在各种动物模型中均获得了成功 ,并将一些有前途的研究成果应用于临床实验。此外 ,人膜结合补体调节蛋白(mCRP)转基因动物的应用 ,对异种移植超急性排斥反应的防治起到了极大的推动作用。同时 ,随着人们对肿瘤细胞逃避机体免疫防御机制研究的不断深入及各种药物干扰因素的应用 。
- 巫振洪
- 关键词：补体靶向治疗炎性疾病再灌注损伤肿瘤免疫
- Calpain裂解Atg5决定中性粒细胞发生自噬还是凋亡，以及C5a在其中的可能作用被引量：4
- 2008年
- 通过阐明C5a、calpain和Atg5相互作用,为开展新的研究寻找方向.中性粒细胞凋亡控制炎症反应及其强度,多种疾病和中性粒细胞凋亡失调有关,但其发生机制尚未阐明.C5a为补体片段,有多种功能,如诱导中性粒细胞趋化、呼吸爆发、增强吞噬、颗粒酶释放和延迟凋亡.已知calpain涉及中性粒细胞功能及凋亡调节并对该凋亡发生具有特异性.不同刺激因素可通过不同路径调节不同calpain亚型的活性.已有报道C5a可以通过调节calpain亚型活性而调节中性粒细胞的趋化反应.另外,自噬是真核细胞中广泛存在的生物过程,具有细胞保护作用,Atg5对于自噬体形成必不可少.Calpain可裂解Atg5为24kutAtg5,使其失去形成自噬体的功能并介导凋亡.Atg5参与了自噬和凋亡的转换.
- 张保全郭振辉房巍吕凤林
- 关键词：中性粒细胞凋亡自噬CALPAINC5A
