广西壮族自治区自然科学基金(0575087)
- 作品数：3 被引量：17H指数：2
- 相关作者：李力黎丹戎张玮阮和云冠潇更多>>
- 相关机构：广西医科大学附属肿瘤医院广西医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金广西壮族自治区自然科学基金广西地方性高发疾病防治研究重点实验室基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 卵巢上皮性癌淋巴道定向高转移细胞系的建立及其生物学特性的鉴定被引量：10
- 2007年
- 目的筛选卵巢上皮性癌(卵巢癌)淋巴道定向高转移恶性肿瘤细胞亚群,并对其生物学特性进行鉴定。方法将卵巢癌细胞株 SKOV3细胞接种于裸鼠爪垫皮下,待植入细胞在裸鼠体内成瘤并发生转移时,取其淋巴结转移灶中癌细胞再次接种于裸鼠爪垫皮下传代,每代均取出淋巴结转移灶中癌细胞进行培养,通过单细胞分离(克隆)培养或局部淋巴结转移灶筛选的方法建立连续传代细胞系,重复传3代后,通过裸鼠接种实验观察各代裸鼠的淋巴结转移率。利用细胞生长曲线、HE 染色、染色体分析、流式细胞分析、裸鼠接种、免疫组化等方法鉴定各代细胞的生物学特性。结果所建立的连续传代1～3代的细胞系,分别命名为 SKOV3-PM1、SKOV3-PM2和 SKOV3-PM3细胞,癌细胞在裸鼠体内传3代后,裸鼠的淋巴结转移率为100%(10/10),原代 SKOV3细胞的淋巴结转移率为10%(1/10),两者比较,差异有统计学意义(P<0.05);SKOV3-PM3细胞形成的淋巴结转移灶的数目(26/10)较 SKOV3细胞多(1/10,P<0.01);且转移灶多位于淋巴结。细胞染色体分析显示,SKOV3细胞染色体数目大多数分布在83～89条,SKOV3-PM3细胞染色体数目大多数分布在91～105条。SKOV3与 SKOV3-PM3细胞染色体数目比较,差异有统计学意义(P<0.05);转移灶中上皮膜抗原(EMA)表达呈阳性,证实转移细胞株保持着卵巢癌细胞的生物学特性;SKOV3-PM3细胞倍增时间为22.7 h,SKOV3细胞为49.6 h,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞分析显示,SKOV3-PM1、SKOV3-PM2、SKOV3-PM3细胞的淋巴结转移灶中癌细胞的 DNA 合成期和分裂期细胞的比例分别为24.2%、29.4%和36.7%,明显高于 SKOV3细胞的21.5%(P<0.05)。结论本研究成功建立了卵巢癌淋巴道定向高转移细胞系,为研究卵巢癌的淋巴结浸润转移的发病机制提供了良好的实验材料。
- 阮和云黎丹戎李力冠潇张玮
- 关键词：卵巢肿瘤淋巴转移细胞系肿瘤
- 卵巢癌淋巴结定向转移裸鼠动物模型的建立被引量：2
- 2007年
- 目的:在裸鼠体内建立人卵巢癌定向淋巴道转移动物模型。方法:将卵巢癌细胞株SKOV3移植于裸鼠爪垫下,待裸鼠卵巢癌发生转移时,取其淋巴结转移灶癌细胞再次移植裸鼠爪垫下传代,反复传3代。结果:SKOV3卵巢癌细胞在裸鼠体内传3代后,各代裸鼠的淋巴结转移率一直稳定,且转移途径较为单一;各代癌细胞的体内外增殖能力不断增强。结论:成功建立了人卵巢癌定向高淋巴道转移模型。
- 阮和云黎丹戎李力张玮
- 关键词：卵巢肿瘤肿瘤转移
- 应用功能分类基因芯片筛选卵巢癌淋巴结定向高转移细胞系中差异性表达基因被引量：7
- 2008年
- 目的:在裸鼠体内建立以人卵巢浆液性乳头状腺癌细胞系SKOV3具有淋巴结定向高转移亚克隆第二代SKOV3-pm2、第三代SKOV3-pm3细胞系,应用基因芯片技术比较这3种具有不同淋巴结定向转移能力的细胞亚系中基因表达谱的差异,寻找卵巢癌侵袭转移相关基因。方法:采用Trizol一步法抽提SKOV3、SKOV3-pm2、SKOV3-pm33种细胞总RNA;取等量RNA逆转录合成cDNA用Ampolabeling-LPR(linear polymerase re-action,线性聚合酶反应)法标记的cDNA链做探针,混合后与功能分类基因芯片[OligoTumor Metastasis Microarray Catalog No.OHS-028(人)]杂交,计算机分析后比较3种细胞中差异性表达基因,并应用RT-PCR技术对其中3个表达差异明显的基因进行验证。结果:共筛选出表达差异性基因60个,其中表达上调基因47个(ratio>3),有21个基因在SKOV3-pm2、SKOV3-pm3中共同表达上调;表达下调基因13个(ratio<0.5),有1个基因在SKOV3-pm2、SKOV3-pm3细胞中共同表达下调。结论:基因表达芯片检测与肿瘤淋巴体外转移模型相结合,为肿瘤转移研究提供了新方法、新思路。
- 冠潇李力黎丹戎阮和云尹永硕张玮
- 关键词：卵巢肿瘤差异表达基因
