国家自然科学基金(81071560)
- 作品数：11 被引量：56H指数：4
- 相关作者：姜笃银王文婷单菲李川王晓川更多>>
- 相关机构：山东大学第二医院中国医学科学院中国协和医科大学中国医学科学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脂肪干细胞在皮肤抗衰老方面的研究进展被引量：3
- 2019年
- 脂肪干细胞具有多向分化能力和丰富的旁分泌功能,且因为其来源广泛、取材方便及组织损伤小等优点已成为细胞治疗和组织工程应用的理想工具。而面部年轻化一直是整形美容领域的热点,其中皮肤抗衰老又是重中之重,脂肪干细胞在皮肤抗衰老方面的作用吸引广大学者研究探讨。本文从离体实验、在体实验及临床应用三个方面综述脂肪干细胞在皮肤抗衰老方面的研究进展,以确定下一步研究的方向,为临床治疗提供更多可靠的依据。
- 潘盛盛姜笃银
- 关键词：脂肪干细胞光老化自然老化
- 富含小鼠骨髓间充质干细胞的生物活性小鼠烧伤变性脱细胞真皮基质的制备被引量：2
- 2018年
- 目的探讨富含小鼠骨髓间充质干细胞的生物活性小鼠烧伤变性脱细胞真皮基质(DADM)的制备。方法取12只BALB/c小鼠,背部皮肤造成20%体表总面积深Ⅱ度烫伤(以下称烧伤)。取烧伤皮肤,去除表皮后,按随机数字表法分为聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)组和乙二胺四乙酸(EDTA)组,每组15个样本。Triton X-100组样本置于2.5g/L Triton X-100-2.5g/L胰蛋白酶混合溶液中持续振荡洗脱24h,EDTA组样本置于0.2g/L EDTA-2.5g/L胰蛋白酶混合溶液中持续振荡洗脱24h制备小鼠DADM。对DADM行大体观察,扫描电镜下观察DADM胶原纤维的结构及排列,荧光显微镜下观察DADM的组织结构。将小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)以每孔2×10^5个的浓度接种于2组小鼠DADM中,制备成具有生物活性的小鼠DADM。培养3d,苏木素-伊红染色观察具有生物活性的小鼠DADM的组织结构,免疫荧光法观察具有生物活性的小鼠DADM中BMSC的分布及数目;细胞计数试剂盒8检测培养2h、1d、3d、5d具有生物活性的小鼠DADM中BMSC的增殖情况。对数据行重复测量方差分析及t检验。结果(1)2组小鼠DADM外观均呈白色,具有一定的韧性及弹性。2组小鼠DADM呈良好的三维多孔网状结构,EDTA组小鼠DADM胶原纤维连续性良好,Triton X-100组小鼠DADM胶原纤维发生不同程度断裂。2组小鼠DADM均洗脱完全,胶原纤维疏松、排列紊乱,EDTA组小鼠DADM组织结构连续性较Triton X-100组佳。(2)培养3d,2组具有生物活性的小鼠DADM中BMSC均分布均匀,EDTA组具有生物活性的小鼠DADM中BMSc为(37±7)个,显著高于Triton X-100组的(25±8)个,t=0.128,P<0.05。培养2h、1d,Triton x-100组和EDTA组具有生物活性的小鼠DADM中BMSC增殖能力相近(t=1.292、0.656,P>0.05);培养3、5d,EDTA组具有生物活性的小鼠DADM中BMSC增殖能力显著高于Triton X-100组(t=2.309、14.128,P<0.05或P<0.01)。结论EDTA洗脱制备的小鼠DADM具有更佳的三维多孔网状结构,胶原纤维�
- 祁永军王晓焦亚宫红敏潘伊姜笃银
- 关键词：烧伤骨髓间充质干细胞乙二胺四乙酸聚乙二醇辛基苯基醚
- 烧伤变性脱细胞真皮基质可再生利用的实验研究被引量：12
- 2012年
- 目的探讨烧伤变性脱细胞真皮基质（DADM）作为真皮替代物用于创面修复的可行性。方法（1）取12只Wistar大鼠，其中9只背部造成深Ⅱ度烫伤（以下称烧伤）创面，分别于伤后1、2、3d（每时相点3只）取创面全厚皮肤，用2．5g／L胰蛋白酶-体积分数0．5％Triton X-100行脱细胞处理制成DADM，相应称为DADM-1d、DADM-2d、DADM-3d；余下3只大鼠不致伤，同法制备ADM作为对照。对ADM和各DADM行大体、组织学观察及微生物学和生物力学检测（极限抗拉强度、最大拉力、断裂伸长率、应力-应变关系）。（2）另取64只Wistar大鼠，按随机数字表法分为ADM组、DADM．1d组、DADM-2d组、DADM-3d组，每组16只。于各大鼠背部制作-2．0cm×1．8cm大小皮瓣，将前述ADM和DADM-1d、DADM-2d、DADM-3d切制成1．8cm×1．5cm大小后分别埋植于皮瓣下。术后1、3、5、9周，每组每时相点取4只大鼠，肉眼观察创面愈合情况及埋植物的变化，并对埋植物行组织学观察。对数据行单因素方差分析及t检验。结果（1）新鲜制备的各DADM呈乳白色，质地柔软有弹性，韧性较ADM弱。光学显微镜下见ADM和各DADM中均无上皮结构和细胞存在，DADM胶原纤维增粗程度不均匀，排列紊乱，嗜伊红性增强。各DADM微生物学检测结果均为阴性。DADM-1d、DADM-2d、DADM-3d之间极限抗拉强度、最大拉力、断裂伸长率和应力-应变关系比较，差异均无统计学意义（F值为0．088-3．591，P值均大于0．05）；其中DADM-3d此4项指标值最高，分别为（13．0±2．4）MPa、（61±4）N、（173±7）％、（45．7±2．0）％。ADM此4项指标各为（19．0±2．6）MPa、（95±4）N、（201±5）％、（62．5±2．2）％，与3种DADM两两比较均偏高（t值为6．42±17．125。P值均小于0．01）。（2）埋植术后1周，各组大鼠创面元渗出或红肿，埋植物未收缩或卷曲；创面有炎性细胞浸润并有Fb及�
- 王晓川李川单菲王文婷朱旭国姜笃银
- 关键词：烧伤细胞外基质变性真皮脱细胞真皮基质创面修复
- 角质细胞生长因子噬菌体活性肽的构建及其对表皮细胞增殖的作用被引量：1
- 2013年
- 目的构建展示角质细胞生长因子（KGF）噬菌体活性肽，检测其促表皮细胞增殖的作用。方法选择4个KGF序列，设计引物；用反转录．PCR法获得3个KGF序列（Pl、P2和P4），直接合成1个KGF序列（P3）；将KGF序列亚克隆至噬菌粒pComb3中；用噬菌体展示技术，将KGF基因片段展示于噬菌体表面；用四甲基偶氮唑盐（MTF）法检测KGF噬菌体活性肽促表皮细胞增殖的作用，测定其在570nm的吸光度（A）值，用免疫荧光法检测其细胞亲和力。结果获得4种KGF基因，构建在噬菌粒pComb3中；通过噬菌体展示技术将其表达于噬菌体的表面。MTr检测的吸光度（A）值结果显示阴性对照组（0．293±0．017）与KGF对照组（0．520±0．043）及4种KGF噬菌体活性肽组（P1～4）（0．469±0．057、0．441±0．048、0．438±0．035、0．446±0．037）间差异均有统计学意义（均P〈0．01），免疫荧光检测结果显示KGF和4种KGF噬菌体活性肽与表皮细胞具有较好的亲和力。结论构建展示的KGF噬菌体活性肽能够显著促进表皮细胞增殖。
- 宗宪磊姜笃银李国菊蔡景龙
- 关键词：细菌噬菌体肽库角质细胞生长因子表皮细胞
- 天然真皮基质应用于创面修复的全国专家共识(2020版)被引量：19
- 2020年
- 天然真皮基质在创面修复中具有良好的生物相容性和"生物模板"功能。根据材料的来源,天然真皮基质可分为脱细胞真皮基质(ADM)、变性真皮基质和瘢痕真皮基质。ADM是一种通过去除皮肤内的细胞成分,保留真皮细胞外基质制备的生物材料,富含天然生物信息,免疫原性低、再生力强,作为真皮替代物极大地推动了创面修复专科的发展。变性真皮基质是指深度烧伤创面通过浅削痂或磨痂保留的一层真皮组织,保留的变性真皮表面移植自体皮片后,能够逐渐复苏,且其结构、形态及生物力学均接近正常皮肤真皮。瘢痕真皮基质是以自体断层瘢痕组织为原材料制备的真皮支架,具有成活率高、质地良好、瘢痕反应轻等特点,在修复瘢痕挛缩畸形的同时,可有效减轻供皮区的二次损伤。本文在汇集国内外研究进展和国内相关专家意见的基础上,就不同类型的天然真皮基质在创面修复领域应用的适应证、使用方法、禁忌证及注意事项等方面作一归纳。
- 无黄跃生姜笃银邱道静黄晓元韩军涛韩春茂
- 关键词：创面修复适应证
- 小鼠烧伤坏死真皮基质的制备方法及生物学评价被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨小鼠烧伤坏死真皮基质(BNDM)制备方法,并对其生物学性能进行评价。方法:水浴烫伤法制备昆明小鼠Ⅲ度烫伤模型,3 d后取烫伤部位皮肤,以0.25%Trypsin-0.5%TritonX-100溶液洗脱处理,制成BNDM。以正常小鼠脱细胞真皮基质(ADM)作对照,HE染色及DAPI染色后观察洗脱效果及胶原排列情况。将ADM和BNDM分别埋植入小鼠皮下,于埋植后1、2、3、4周观察真皮基质的外观及其与周围组织的关系,以及ADM和BNDM中胶原排列、细胞浸润及血管生成情况。结果:BNDM质地较ADM柔软,有一定的柔韧性和延展性。HE染色观察BNDM的胶原纤维结构模糊,呈均质玻璃样改变,嗜伊红性增强,经DAPI染色证实基质内无染色质成分存留。皮下埋植试验显示BNDM和ADM均无明显排斥反应和毒副作用。显微镜下观察埋植术后第1周即可见到ADM及BNDM中有成纤维细胞长入并有炎性细胞浸润。埋植后第3周,细胞浸润更多并可见毛细血管长入,较其他时间点更明显,而ADM较BNDM更明显(P<0.05);至埋植后第4周,炎症反应减轻。结论:烧伤坏死皮肤经Trypsin-TritonX-100溶液处理后,可以保持胶原纤维的连续性,无明显的不良反应,成纤维细胞和炎性细胞可以很好地浸润生长,并有毛细血管长入,能满足异体或自体皮肤移植的基本要求。
- 于冠英李川朱绪国王晓川李耀南姜笃银
- 关键词：深度烧伤生物相容性
- 急诊皮肤伤口的分类与整形修复被引量：8
- 2017年
- 皮肤伤口一般指皮肤软组织在各种因素的作用下,组织结构破坏,连续性中断,造成的形态变化和功能障碍。对皮肤伤口进行合理分类,选择恰当的修复方法,运用整形外科的原则和技术,对促进伤口愈合、减轻瘢痕形成、改善局部外观至关重要。关于伤口分类国内未见相关文献资料。本文就急诊常见的皮肤伤口进行分类,并对其整复方法予以探讨。
- 姜笃银邱道静
- 关键词：急诊伤口
- 转化生长因子β1噬菌体模拟肽抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的实验研究被引量：6
- 2011年
- 目的从噬菌体随机12肽库中筛选获得转化生长因子（TGF）β1噬菌体模拟肽，评估其抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的作用。方法以人TGF—β1单克隆抗体为靶，生物淘选噬菌体模拟肽。噻唑蓝（MTT）比色法定量测定活细胞的数量。Annexin V—FITC／PI凋亡检测试剂盒和流式细胞仪检测对成纤维细胞的凋亡作用。免疫荧光测定检测模拟肽与成纤维细胞的亲和力。实时定量PCR分析方法检测成纤维细胞核因子κB（NF—κB），结缔组织生长因子（CTGF）的表达水平。结果共获得10种噬菌体模拟肽，具有与TGF—β1、TGF—β2、TGF—β受体Ⅱ（TβRⅡ）、TGF—β诱导因子、NF—κB或细胞分裂原素活化蛋白激酶（MAPK）相似的序列。MTT比色测定结果显示4种（第7～10组）噬菌体模拟肽组能够抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖（P〈0．05）。免疫荧光测定显示是噬菌体上的模拟肽，而不是噬菌体本身，能够与瘢痕疙瘩成纤维细胞相结合；凋亡实验显示这4种噬菌体模拟肽能够轻度促使瘢痕疙瘩成纤维细胞发生轻度的晚期凋亡；实时定量PCR的结果显示这4种噬菌体模拟肽NF—κB的表达降低，表达量分别是阴性对照组的0．28、0．26、0．46、0．30倍，4种噬菌体模拟肽CTGF的表达降低，表达量分别是阴性对照组的0．26、0．60、0．34、0．17倍。结论噬菌体模拟肽可能是通过调节NF—κB及CTGF的表达，调节瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖。
- 刘振中姜笃银蔡景龙宗宪磊张基勋单菲王文婷王魏
- 关键词：瘢痕疙瘩成纤维细胞肽库转化生长因子Β1细胞增殖
- 组织工程技术在创面修复中的应用被引量：4
- 2019年
- 烧创伤等原因引起的大面积皮肤缺损是修复重建外科的一大难题。传统皮肤移植术往往组织来源受限,且存在供皮区损伤等缺点。组织工程技术的进步和商品化皮肤的临床应用,为大面积烧伤和难治性创面修复提供了新的治疗手段。本文回顾组织工程技术在创面修复领域的研究进展,并分析其在研发和转化过程中的关键问题,以期为人类皮肤的功能化构建提供新思路。
- 姜笃银潘伊邱道静
- 关键词：皮肤干细胞创面修复
- 细胞外基质降解产物生物学活性研究进展被引量：3
- 2013年
- ECM是由支持细胞和组织架构的蛋白质、糖蛋白和多糖组成的复杂混合物。ECM成分有与特定细胞表面受体相互作用的结构域，可影响细胞黏附、迂移、增殖和分化。ECM蛋白在降解过程中释放细胞因子，影响细胞炎症免疫反应和血管生成。ECM降解后可产生多种调节细胞活性的肽类分子，这类分子被统称为细胞外基质活性素（matrikine）。多种细胞外基质活性素通过调节肿瘤细胞活性和血管生成参与肿瘤侵袭过程。本文集中论述ECM降解产物对创伤修复过程中炎性细胞浸润和血管再生的影响，以及细胞外基质活性素对肿瘤血管生成的调节作用等。
- 朱绪国姜笃银李川于冠英
- 关键词：细胞外基质炎症反应血管再生
