您的位置: 专家智库 > >

国家自然科学基金(30670885)

作品数:5 被引量:13H指数:3
相关作者:王立生王华杨月峰张静段卡丹更多>>
相关机构:军事医学科学院华中科技大学安徽医科大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 4篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 2篇生物学
  • 2篇生物学特性
  • 2篇细胞
  • 2篇内皮
  • 2篇内皮细胞
  • 1篇动脉
  • 1篇动脉粥样硬化
  • 1篇信号
  • 1篇信号途径
  • 1篇增殖
  • 1篇脐静脉内皮
  • 1篇脐静脉内皮细...
  • 1篇迁移
  • 1篇鞘氨醇
  • 1篇细胞生物
  • 1篇细胞生物学
  • 1篇细胞生物学特...
  • 1篇细胞增殖
  • 1篇腺病
  • 1篇腺病毒

机构

  • 3篇军事医学科学...
  • 1篇安徽医科大学
  • 1篇华中科技大学
  • 1篇中国疾病预防...
  • 1篇解放军第30...

作者

  • 3篇王华
  • 3篇王立生
  • 2篇杨月峰
  • 1篇杨伟
  • 1篇李大主
  • 1篇史晓婧
  • 1篇肖凤君
  • 1篇李裕舒
  • 1篇肖秀斌
  • 1篇严俊
  • 1篇严华
  • 1篇张伟京
  • 1篇鲁茁壮
  • 1篇李泽良
  • 1篇段卡丹
  • 1篇李庆芳
  • 1篇张静
  • 1篇徐尹

传媒

  • 3篇军事医学科学...
  • 1篇临床心血管病...
  • 1篇Scienc...

年份

  • 2篇2010
  • 2篇2009
  • 1篇2008
5 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
腺病毒-甲病毒杂合载体的构建
2010年
目的将腺病毒Ad5/F11p造血细胞靶向和甲病毒复制子载体目的基因高效转录的特点相结合,构建腺病毒-甲病毒杂合载体,以提高目的基因在造血细胞的表达水平。方法基本实验过程包括骨架质粒构建,穿梭质粒构建,同源重组产生杂合病毒基因组,杂合病毒在包装细胞的拯救和扩增,以及杂合病毒对造血细胞基因转移效率的初步评价。具体步骤如下:利用重叠延伸PCR技术将pFiber5/11p质粒上Ad5的E4区部分删除产生骨架质粒pAdEasy/F11pDE4orf3。在pShuttle质粒的多克隆位点处分别插入造血细胞特异性启动子(CD11a promoter,CD11Ap)、甲病毒载体元件(nsP)、目的基因(GFP)、PolyA加尾信号构建杂合穿梭质粒pSh-SFV-GFP。骨架质粒与穿梭质粒在大肠杆菌BJ5183菌株中同源重组产生杂合病毒质粒pAd5/F11p-SFV-GFP,经与辅助病毒质粒Ad5/f11p-HV共转染293细胞后拯救出杂合病毒Ad5/F11p-SFV-GFP,经CsCl密度梯度离心法纯化,得到的病毒滴度为3×1010pfu/ml。与对照病毒Ad5-GFP相同感染复数(100MOI)分别感染U937细胞,利用流式细胞术检测GFP+细胞比例。结果pAdEasy-1/F11p-E4orf3和pSh-SFV-GFP经相应酶切和测序鉴定,与预期设计一致;CsCl密度梯度离心纯化得到杂合病毒;100MOI Ad5/F11p-SFV-GFP感染U937细胞2 d后,GFP+细胞比例为55.79%,而对照病毒Ad5-GFP的感染效率为2.42%。结论成功构建了腺病毒-甲病毒杂合载体,为进一步评价其对造血细胞的基因转移效率奠定了基础。
李泽良王华杨月峰肖凤君鲁茁壮王立生
关键词:腺病毒科甲病毒属复制子基因转移技术
1-磷酸鞘氨醇对淋巴管内皮细胞生物学特性调节作用的研究
2009年
目的:研究1-磷酸鞘氨醇(S1P)对淋巴管内皮细胞(HDLEC)的生物学特性的调节作用及其调节机制。方法:应用RT-PCR方法检测HDLEC是否表达SPK及S1P受体,应用MTT法、细胞扩散盒技术检测S1P对HDLEC增殖、迁移特性的影响,并用Western印迹方法检测S1P对HDLEC的MAPK信号通路的调节。结果:HDLEC表达SPK及S1P受体,包括S1P1,S1P2,S1P3和S1P4。外源性S1P对HDLEC没有促增殖作用,但可促进其迁移,并可通过S1P1和S1P2诱导MAPK快速磷酸化。结论:初步研究结果提示,S1P可以影响淋巴管内皮细胞的生物学特性,有可能成为调控淋巴管生成及其功能的新靶点。
肖秀斌王华李庆芳严俊杨月峰徐尹张伟京王立生
关键词:1-磷酸鞘氨醇淋巴管内皮细胞细胞增殖迁移
骨保护素对脐静脉内皮细胞生长的影响被引量:3
2010年
目的:观察骨保护素对内皮细胞数量变化及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的影响,探讨其对内皮细胞的作用。方法:常规培养永生化的人内皮细胞,用不同浓度(0,0·5,2·0,4·0,6·0,8·0μg/L)的骨保护素作用细胞48h后,用细胞计数试剂盒(cellcount kit,CCK-8)来检测细胞的数量;免疫细胞化学检测eNOS蛋白的表达水平,实时定量PCR检测eNOS基因的定量表达。结果:与对照组(0·936±0·146)相比,在8·0μg/L组的内皮细胞增殖量明显增加(1·291±0·200;P<0·05);eNOS蛋白表达在2·0μg/L、4·0μg/L组(P<0·05)和6·0μg/L、8·0μg/L组(P<0·01)均显著增加;而4·0μg/L、6·0μg/L、8·0μg/L组的eNOS mRNA较对照组均呈显著增高(P<0·01)。结论:骨保护素在人体的浓度波动范围内具有促进内皮细胞增殖效应,在抗动脉粥样硬化过程中,可能具有促内皮细胞修复作用,且与浓度梯度有明显的正相关性。
杨伟李裕舒段卡丹史晓婧严华李大主
关键词:骨保护素动脉粥样硬化内皮细胞ENOS
KAI1/CD82 suppresses hepatocyte growth factorinduced migration of hepatoma cells via upregulationof Sprouty2被引量:7
2008年
We conducted a study concerning the suppressive mechanism of KAI1/CD82 on hepatoma cell metastasis.Hepatocyte growth factor(HGF)induces the migration of hepatoma cells through activation of cellular sphingosine kinase 1(SphK1).Adenovirus-mediated gene transfer of KAI1(Ad-KAI1)downregulates the SphK1 expression and suppresses the HGF-induced migration of SMMC-7721 human hepatocellcular carcinoma cells.Overexpression of KAI1/CD82 significantly elevates Sprouty2 at the protein level.Ablation of Sprouty2 with RNA interference can block the KAI1/CD82-induced suppression of hepatoma cell migration and downregulation of SphK1 expression.It is demonstrated that KAI1/CD82 suppresses HGF-induced migration of hepatoma cells via upregulation of Sprouty2.
MU ZhenBin1 ,3,WANG Hua 2,ZHANG Jing 2,LI QingFang 2,WANG LiSheng 2&GUO XiaoZhong 3 1State Key Laboratory of Cancer Biology and Institute of Digestive Diseases,Xijing Hospital,Fourth Military Medical University,Xi’an 710032,China
关键词:KAI1/CD82MIGRATIONHEPATOCYTEFACTOR
Spred的结构及生物学特性被引量:3
2009年
Spred家族是一组Sprouty相关的酪氨酸激酶结合蛋白,它对多种生长因子诱导的Ras-ERK信号途径有负调控作用。Spred家族各成员在染色体上定位和体内表达均不相同,但都具有保守的结构域:C端Sprouty相关结合域(SPR)、中央c-Kit结合域(KBD)和N端Enabled/VASP同源结构域(EVH-1)。Spred调节细胞发育、运动以及增殖等生命活动,参与肿瘤的转移、造血调控、过敏反应以及骨的形成等病理生理学过程。本文主要综述Spred家族的结构及功能特点以及对细胞增殖信号途径的调节作用。
张静王华王立生
关键词:MAPK信号途径RAS
共1页<1>
聚类工具0