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紧密连接蛋白claudin-6部分通过Bax和Bcl-2途径诱导乳腺癌细胞MCF-7凋亡: 目的探讨紧密连接蛋白claudin-6对乳腺癌细胞MCF-7细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达的影响。方法采用脂质体转染技术建立稳定过表达claudin-6的乳腺癌MCF-7细胞克隆,应用TUNEL法、DAPI...; 吴琼刘亚芳任玥许晓明于丽娜李玉林全成实; 关键词：乳腺癌; 文献传递

17β-雌二醇对紧密连接蛋白claudin-6表达及乳腺癌MCF-7细胞生物学行为的影响: 2010年; 目的研究雌激素调控紧密连接蛋白claudin-6表达和对乳腺癌细胞MCF-7细胞生物学行为的影响。方法用17β-雌二醇（17p—E2）作用MCF-7细胞后，采用RT—PCR和免疫细胞化学法分析claudin-6表达与17p—E2的浓度和时间效应关系；采用CellCountingKit-8（CCK-8）检测17B—E2对MCF-7细胞增殖的影响；采用细胞划痕法检测17B—E2对MCF-7细胞迁移能力的影响。结果RT—PCR结果显示，17β—E2能够诱导MCF-7细胞表达claudin-6，其诱导表达具有浓度和时间依赖性，其最佳浓度和时间分别为5nmol／L和24h；细胞免疫荧光法检测显示，17β—E2组claudin45主要表达于细胞膜；CCK-8结果显示，5mnol／L17β—E2作用24h可明显抑制MCF-7细胞的生长（P〈0．05）；细胞划痕实验显示，5nmol／L17β—E2作用24h具有抑制MCF-7细胞迁移的趋势，但差异无统计学意义。结论17β—E2可以调控claudin-6表达，并具有抑制MCF-7细胞的增殖和迁移的作用。推测17β—E2调控claudin-6表达可能在影响MCF-7细胞生物学行为的过程中发挥一定作用。; 刘亚芳吴琼许晓明任玥于立娜全成实李玉林; 关键词：连接蛋白类

稳定过表达紧密连接蛋白claudin-6对乳腺癌细胞MCF-7的生物学表型的影响: 2010年; 目的探讨紧密连接蛋白claudin-6过表达对乳腺癌细胞MCF-7生物学行为的影响。方法用脂质体法将含有claudin-6的真核表达载体转染乳腺癌细胞系MCF-7后，采用RT—PCR、Western印迹和细胞免疫荧光的方法进行稳定克隆的筛选和鉴定；采用MTT法和克隆形成实验检测细胞生长情况；采用划痕法和Boyden小室体外侵袭实验检测细胞迁移和侵袭性。结果建立了稳定表达claudin-6基因的4株单克隆（C1，C2，C3，C4）；细胞免疫荧光结果显示，claudin-6的表达主要定位于细胞膜；与对照组和空载体组相比，稳定表达claudin-6的MCF-7细胞生长缓慢，转染6h时吸光度A值C1为1．62，C2为1．25，C3为1．30，C4为1．58与对照组A值1．78及空载组1．82比较明显降低。其克隆形成率C1为0．25，C2为0．17，C3为0．26，C4为0．21明显低于对照组（0．53）和空载组（0．45）；细胞的迁移性、侵袭性被抑制。结论claudin-6的过表达能够抑制MCF-7细胞的生长和转移等恶性表型，说明紧密连接蛋白claudin-6作为乳腺癌表型抑制基因在乳腺癌发生及转移中起负性调控作用。; 吴琼刘亚芳任玥许晓明于丽娜李玉林全成实; 关键词：紧密连接部

人紧密连接蛋白claudin-6真核表达载体的构建被引量：1: 2009年; 目的构建人紧密连接蛋白claudin-6的cDNA真核表达载体。方法应用RT-PCR、T-A克隆、限制性内切酶切及亚克隆等技术将claudin-6基因全长克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)质粒中。结果酶切鉴定、PCR扩增以及序列分析表明已经将claudin-6基因全长序列克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)质粒中。结论获得了人claudin-6基因的全长cDNA片段,构建了claudin-6原核克隆载体和真核表达载体。实验中发现,中国人claudin-6基因的461位点碱基为A,而GeneBank中西班牙人claudin-6基因的461位点碱基为G,说明claudin-6基因461位点可能存在多态性。; 吴琼刘亚芳任玥许晓明于立娜张婷张明子全成实; 关键词：乳腺癌真核表达载体

紧密连接蛋白CLDN6在卵巢癌、肝癌以及脑膜瘤组织中的表达及意义被引量：2: 2010年; 目的:探讨紧密连接蛋白CLDN6在卵巢癌、肝癌以及脑膜瘤组织中的表达及意义,阐明CLDN6在肿瘤发生、发展中的作用。方法:用免疫组织化学SP法检测36例卵巢癌、30例肝癌以及29例侵袭性脑膜瘤组织中紧密连接蛋CLDN6的表达,同时分别以26例卵巢良性肿瘤,19例癌旁正常肝组织以及29例非侵袭性脑膜瘤组织作为对照,分析CLDN6在上述肿瘤中的表达与临床指标之间的关系。结果:卵巢癌组织中CLDN6表达阳性率为69.44%,卵巢良性瘤中CLDN6表达阳性率为34.62%,两者比较差异具有显著性(P<0.05)。肝癌组织中CLDN6表达阳性率为73.33%,癌旁正常肝组织中CLDN6表达阳性率为26.31%,两者比较差异具有显著性(P<0.05);侵袭性脑膜瘤组织中CLDN6表达阳性率为10.34%,非袭性脑膜瘤组织CLDN6表达阳性率为65.51%,两者比较差异具有显著性(P<0.05)。结论:CLDN6在卵巢癌和肝癌组织中表达上调,在侵袭性脑膜瘤组织中表达下调,推测CLDN6表达改变可能会破坏紧密连接组成成分的比例,进而在肿瘤的发生发展中起一定作用。; 刘亚芳李久霞张广超吴琼许晓明任玥于立娜全成实李玉林; 关键词：免疫组织化学

紧密连接蛋白claudin-6在人乳腺癌细胞和组织中的表达及其与乳腺癌淋巴结转移的关系被引量：8: 2008年; 目的:探讨紧密连接蛋白claudin-6在人乳腺癌细胞株、乳腺癌组织中的表达及与淋巴结转移的关系,为判定乳腺癌淋巴结转移及估计预后提供依据。方法:应用RT-PCR和免疫组织化学S-P法,对人乳腺上皮细胞株HBL-100、低侵袭性乳腺癌细胞株MCF-7、高侵袭性乳腺癌细胞株MDA-MB231和38例人乳腺癌组织claudin-6的表达进行检测,同时以30例乳腺良性肿瘤作为对照。结果:claudin-6在HBL-100细胞株中有表达,在乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB231中均无表达;乳腺癌组织中claudin-6表达明显低于对照组(P<0.05);claudin-6表达与乳腺癌组织的病理分级及淋巴结转移有关联(P<0.05),与患者年龄和临床分期无关(P>0.05)。结论:claudin-6可能在乳腺癌的发生和转移中起一定的负性调控作用,并可作为判断乳腺癌淋巴结转移和估计预后的参考指标。; 吴琼吴晓艳张海英刘亚芳任玥曲珊珊全成实李玉林; 关键词：逆转录聚合酶链反应

紧密连接蛋白claudin-6在卵巢癌、肝癌以及脑膜瘤中的表达及意义: 目的检测紧密连接蛋白claudin-6在不同肿瘤中的表达以及分析其与临床指标之间的关系。方法用免疫组织化学S-P法检测36例卵巢癌、30例肝癌以及29例脑侵袭性膜瘤中紧密连接蛋白claudin-6的表达,同时分别以26例...; 刘亚芳吴琼许晓明任玥于丽娜全成实李玉林; 文献传递

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国家自然科学基金(30670807)