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牲畜链霉菌一个调节基因的克隆及其顺式调控元件的研究被引量：1: 2000年; 依据原核生物中广泛存在的调节基因ｌｕｘＩ保守性区域的氨基酸序列设计引物，以牲畜链霉菌总ＤＮＡ为模板，ＰＣＲ扩增出约１８０ｂｐ片段．以此为探针，与总ＤＮＡ不同酶切产物进行杂交，最终获得外源基因克隆至ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ（－）ＥｃｏＲＩ－ＢａｍＨＩ位点的重组质粒ｐＳＮ１．序列分析发现一个１８００ｂｐ的完整ＯＲＦ，（Ｇ＋Ｃ）％为６９．３％，命名为ｓｃｔＩ．ＯＲＦ上游有２４９ｂｐ的ＡＴ富集区，下游有复杂的二级结构．凝胶滞留实验证明ＡＴ富集区有特异性的ＤＮＡ结合蛋白，且在低温聚丙烯酰胺凝胶电泳时可见“ＤＮＡ弯曲”现象，提示此ＡＴ富集区为一顺式调控元件。; 尚广东王以光; 关键词：调节基因克隆顺式调控元件抗生素

林肯链霉菌谷氨酰胺合成酶活力调节的研究被引量：3: 2001年; 对不同氮源生长条件下林肯链霉菌无细胞粗提液中谷氨酰胺合成酶 (GS)的研究结果表明 ,高浓度NH+4阻遏了GS的生物合成。从不同氮源生长条件下林肯链霉菌中分离纯化了GS ,其性质没有差别。以受腺苷化调节的产气克雷伯氏菌GS作对照 ,林肯链霉菌GS没有明显的氨休克作用 ,经蛇毒磷酸二酯酶处理后 ,其活力没有变化。这些结果都说明林肯链霉菌GS不存在腺苷化共价修饰这一调节方式。反馈抑制作用是林肯链霉菌GS的一种重要的调节方式 ,这种抑制作用是以累积的方式进行的 ,这表明各种抑制剂对GS作用位点不同 ,各种抑制剂对GS的抑制作用是相互独立的。由此推测 ,林肯链霉菌GS是一种变构酶。; 金詟焦瑞身毛裕民; 关键词：谷氨酰胺合成酶酶活性

地中海拟无枝菌酸菌U32中amrC/amkC基因的序列分析及在大肠杆菌中的表达被引量：1: 2000年; 从力复霉素SV产生菌———地中海拟无枝菌酸菌 (Amycolatopsismediterranei)U32的硝酸盐同化基因簇的上游克隆了一个 2 6kb的EcoRI—XhoIDNA片段并测定其序列。序列分析表明 ,该DNA片段编码两个完整的开放阅读框架 (ORF) ,ORF2的起始密码子GTG与ORF1的终止密码子TGA在TG处重叠。ORF1编码一个含2 2 4个氨基酸的多肽 ,它同放线菌中典型的应答调节蛋白包括AfsQ1和MtrA有很高的同源性 ;ORF2编码一个含472个氨基酸的蛋白 ,它同包括AfsQ2和MtrB在内的组氨酸激酶同源。ORF1和ORF2有可能构成典型的双组份信号传导系统 ,分别命名为amrC和amkC。在T7启动子的控制下 ,完整的amrC和去除子N端一个可能的跨膜区的amkC在大肠杆菌中分别得到了高效表达 ,表达蛋白的分子量分别为 30kD和 46kD ,与推测蛋白的分子量一致。; 高瑾王伟武姜卫红赵国屏焦瑞身; 关键词：地中海拟无枝菌酸菌

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国家自然科学基金(39630010)