内蒙古自治区自然科学基金(2012MS1147)
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 相关作者：高乃康呼格吉乐张军力王俊瑞托娅更多>>
- 相关机构：内蒙古医科大学附属医院内蒙古医学院附属医院解放军第二五三医院更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区自然科学基金内蒙古自治区高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人总MBP干扰RNA真核表达载体的构建及MBP功能初步研究
- 2015年
- 目的本研究构建4个携带髓鞘碱性蛋白(MBP)公共序列的干扰RNA真核表达载体,并转染人神经胶质细胞U251细胞,为研究MBP在新生儿脑损伤中的作用提供平台。方法 (1)构建4个携带新靶点的MBP干扰RNA真核表达载体,酶切后将酶切片段测序鉴定;(2)利用脂质体转染将构建的MBP干扰RNA真核表达载体转入U251细胞株内。结果 (1)成功构建了4个携带新靶点的MBP干扰RNA真核表达载体;(2)在U251细胞中有绿色荧光蛋白表达,经反转录-聚合酶链反应检测MBP干扰成功;(3)干扰U251细胞中MBP表达后,致使U251细胞生长变慢。结论成功构建携带新靶点的MBP干扰RNA真核表达载体,利用载体干扰MBP基因,结果表明MBP在U251细胞生长过程中起重要作用。
- 兰海霞呼格吉乐王艳艳高乃康
- 关键词：干扰RNA髓鞘碱性蛋白
- 新靶点CyclinE干扰RNA对人脑胶质瘤增殖的影响被引量：3
- 2014年
- 目的构建人CyclinE建新靶点的干扰RNA真核表达载体,转染人脑胶质细胞瘤U251细胞,观察CyclinE表达受抑制后的人脑胶质瘤细胞的增殖能力的变化,为进一步研究CyclinE表达受抑制后对人脑胶质瘤细胞质和细胞核蛋白组学的影响及人脑胶质瘤发生、发展、诊断与治疗提供有价值的资料。方法①构建4个新靶点Cyclin E干扰RNA的真核表达载体后,用双酶切和碱基序列测定的方法鉴定载体构建成功与否。②用Lipofectamine 2000转染4个成功构建的载体到胶质瘤U251细胞株,通过RT-PCR的结果检测转染后CyclinEmRNA表达量,选出干扰效果最好的1个。③用塞唑蓝(MTT)法检测CyclinE沉默后细胞增殖能力的变化。结果①成功构建了4个新靶点的CyclinE干扰RNA真核表达载体,即PCyclinE-1、PCyclinE-2、PCyclinE-3、PCyclinE-4。②CyclinE mRNA表达明显受到抑制,并获得效果最好的CyclinE干扰RNA真核表达载体。③PCyclinE-1-U251组细胞与两对照组相比增殖能力减弱。结论成功构建了新靶点CyclinE干扰RNA真核表达载体,与对照组比增殖能力削弱。
- 呼格吉乐高乃康韩艳秋
- 关键词：干扰RNA细胞周期蛋白E增殖
- CDK2干扰RNA新靶点的发现及对人脑胶质瘤生长的影响
- 2012年
- 目的:构建4个新靶点的人CDK2干扰RNA真核表达载体,转染人脑胶质细胞瘤SHG44细胞,经RT-PCR检测mRNA的表达MTT法检测细胞增殖,获得干扰效果最好的真核表达载体,为继续探讨CDK2在SHG44细胞中的作用提供有价值的资料及实验基础。方法:1.构建4个新靶点CDK2干扰RNA真核表达载体并用双酶切和测序鉴定。2.脂质体法瞬时转染上述4个载体到SHG44细胞株。3.通过RT-PCR比较转染后CDK2mRNA的表达量,MTT法检测细胞增殖。结果:1.成功构建了4个新靶点的CDK2干扰RNA真核表达载体PGPU6/GFP/Neo-CDK2-1、PGPU6/GFP/Neo-CDK2-2、PGPU6/GFP/Neo-CDK2-3、PGPU6/GFP/Neo-CDK2-4。2.CDK2 mRNA表达和细胞增殖明显受到抑制,并获得了效果最好的CDK2干扰RNA真核表达载体。结论:.成功构建并筛选出了效果最好的新靶点CDK2干扰RNA真核表达载体,使SHG44细胞的CDK2 mRNA的表达明显降低。
- 呼格吉乐张军力段美庆王俊瑞渠志臻高乃康
- 关键词：CDK2增殖
- 新靶点细胞周期素依赖性激酶2干扰RNA对人脑胶质瘤侵袭能力及细胞质蛋白质组的影响被引量：3
- 2012年
- 人脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的肿瘤，由于瘤细胞呈弥漫性、侵袭性生长，预后极差。细胞周期失控与肿瘤发生密切相关，细胞周期素依赖性激酶2（CDK2）在人脑胶质瘤中表达，是细胞周期中重要的调控因子，在驱动细胞周期进入S期和维持S期的过程中起决定性作用。本实验旨在比较CDK2表达抑制前后人胶质瘤细胞株SHG44细胞侵袭能力及细胞质蛋白质组学表达的变化。
- 呼格吉乐张军力托娅王俊瑞高乃康
- 关键词：细胞侵袭能力人脑胶质瘤细胞质干扰RNA新靶点
