国家科技支撑计划(2006BAD06A05-1)
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
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- 鸭肠炎病毒gB基因的分子特征被引量：3
- 2009年
- 鸭肠炎病毒是鸭病毒性肠炎的病原,被划分为疱疹病毒科成员。gB是疱疹病毒感染和复制所必需的糖蛋白,能刺激机体产生中和抗体和细胞免疫应答,在疱疹病毒家族中高度保守。通过PCR技术获得了DEV C-KCE株gB基因的核苷酸序列,首次对DEVgB基因及编码氨基酸进行了较为详尽的生物信息学分析。结果表明,DEVgB基因与α-疱疹病毒的马立克氏病毒属亲缘关系最近;DEV gB蛋白具有与其他疱疹病毒gB相同或相似的结构、N糖基化位点、半胱氨酸残基、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPGs)结合位点、弗林蛋白酶水解位点和胞浆区PACS-1识别位点。
- 马波刘峰源张扬乌伊罕刘晓玫王君伟
- 关键词：鸭肠炎病毒鸭瘟GB基因糖蛋白
- 鸭肠炎病毒us2基因转移载体的构建
- 2009年
- 以鸭肠炎病毒(DEV)C-KCE株基因组DNA为模板,PCR扩增得到us2全基因(包含s3、us3部分基因),将扩增产物克隆入pMD18-T载体,EcoRⅠ和HindⅢ双酶切连入pUC19载体,获得质粒pUC-us2。将完整的EGFP表达盒插入us2基因内BamHⅠ位点,得到转移载体质粒pUC-us2-EGFP。脂质体法将转移载体质粒pUC-us2-EGFP转染DEF细胞,观察到绿色荧光,说明EGFP基因获得表达。
- 刘晓玫赵妍乌伊罕张智慧马波王君伟
- 关键词：鸭肠炎病毒
- 鸭肠炎病毒gE基因胞外区的原核表达与抗原性分析
- 2010年
- 乌伊罕赵妍刘晓玫张智慧马波王君伟
- 关键词：鸭肠炎病毒抗原性分析原核表达GE基因胞外区病毒性肠炎
- 鸭肠炎病毒ul47基因的原核表达及其抗血清中和活性的鉴定被引量：1
- 2008年
- 提取鸭肠炎病毒(DEV)基因组DNA,采用PCR方法扩增获得了DEVul47基因,将该基因片段定向克隆到原核表达载体pET-30a,构建重组质粒pET-30a-ul47,并转化受体菌Rosetta(DE3)pLysS中,经IPTG诱导表达,表达产物用SDS-PAGE分析。结果显示,ul47基因在大肠杆菌Rosetta中获得与预期大小相符的表达蛋白。利用Ni-NTA纯化表达蛋白,制备了兔抗DEV UL47蛋白的多克隆抗体,经琼脂双扩散测定,该抗血清效价为1∶16。间接免疫荧光试验和蚀斑减数中和试验结果显示,DEV UL47蛋白主要定位于感染细胞的细胞质和细胞膜,制备的兔抗DEV UL47多克隆抗体对DEV有中和活性。
- 张杨刘峰源乌伊罕刘晓玫王君伟马波
- 关键词：鸭肠炎病毒原核表达间接免疫荧光试验
