山东省农业良种工程项目(2010)
- 作品数：37 被引量：153H指数：8
- 相关作者：宗晓娟刘庆忠魏海蓉王甲威臧德奎更多>>
- 相关机构：山东农业大学山东省果树研究所沈阳农业大学更多>>
- 发文基金：山东省农业良种工程项目公益性行业(农业)科研专项引进国际先进农业科技计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 携带抗秆锈病基因Sr25、Sr26小麦新种质的分子标记辅助选育被引量：4
- 2015年
- 源于长穗偃麦草的抗病基因Sr25、Sr26对秆锈病强毒力小种Ug99及其变种具有良好抗性,本实验室前期在长穗偃麦草与普通小麦杂交后代中选育出两个携带Sr25、Sr26基因的八倍体小偃麦。本研究选用济麦22、泰农18、山农637等小麦品种(系)分别与两个八倍体小偃麦杂交、回交,利用与Sr25、Sr26紧密连锁的分子标记进行辅助选择,定向培育出9个含有Sr25或(和)Sr26的小麦新种质。这些新种质综合农艺性状优良,可以作为抗病新种质用于小麦抗病育种,以应对Ug99威胁。
- 崔彩红房伟强李兴锋王洪刚鲍印广
- 关键词：小麦秆锈病分子标记辅助选择
- 樱桃病毒A外壳蛋白基因克隆及其原核表达被引量：5
- 2012年
- 为制备樱桃病毒A(Cherry virusA,CVA)抗血清,克隆CVA外壳蛋白基因(CP),构建原核表达载体,优化蛋白表达条件。根据CVA全基因组序列(NC_003689.1)设计特异引物,RT-PCR方法扩增CVA外壳蛋白基因,克隆、测序,构建原核表达载体pET30a-CVACP,转化大肠杆菌BL21(DE3)株系,采用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达。序列分析显示,该区段长为603bp,编码201个氨基酸,与法国分离物PF(HQ267856.1)的同源性为96.8%,与印度分离物JKSPMi-5(FN669548.1)同源性为86.3%。成功构建了原核表达载体pET30a-CVACP,SDS-PAGE电泳分析显示,转pET30a-CVACP载体的BL21(DE3)菌株表达分子量约24kDa的重组蛋白,该重组蛋白在37℃、1.5mmol/L IPTG、诱导4h条件下表达量最大。
- 陈立伟宗晓娟王文文王甲威魏海蓉徐丽严雪瑞刘庆忠
- 关键词：外壳蛋白基因克隆原核表达
- 梨属野生种质资源SRAP-PCR反应体系优化研究被引量：1
- 2014年
- 采用正交直观分析法和新复极差法对影响梨属野生种质资源SRAP-PCR反应的5种因素(Mg2+浓度、d NTPs浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶、模板DNA)4个水平进行优化筛选。结果表明,优化后的梨属SRAP-PCR反应体系为25μL,包括10×PCR buffer 2.5μL,2.0 mmol/L Mg2+,200μmol/L d NTPs,0.4μmol/L引物,1.5 U Taq酶,60 ng模板DNA。
- 梁婷婷马燕臧德奎
- 关键词：梨属SRAP-PCR
- 国槐组织培养生根的研究被引量：2
- 2012年
- 通过不同基本培养基、植物生长调节剂IAA、NAA、IBA和活性炭等对国槐试管苗不定根的诱导进行了系统研究。筛选出国槐最佳生根培养基是1/2MS+IAA0.5mg/L+蔗糖2%+琼脂0.65%,生根率达86%以上;并对不同苗龄试管苗不定根的发育过程进行了研究,结果表明,苗龄为20～25天的试管苗生根率最高可达90%,而且生根周期较短。
- 刘桂民燕丽萍尹国良李自成刘翠兰孙超夏阳
- 关键词：国槐不定根
- 李矮缩病毒外壳蛋白基因克隆及原核表达研究被引量：5
- 2012年
- 为制备李矮缩病毒（prunusdwarfvims，PDv）抗血清，克隆PDV外壳蛋O（ce）基因，构建原核表达载体，优化蛋白表达条件。以阳性感病甜樱桃叶片为试验材料，提取总RNA，根据PDVCP基因（L28145．1）设计特异引物，RT-PCR方法扩增，克隆、测序，构建原核表达载体pET30a-PDVCP，在大肠杆菌BL21（DE3）菌株表达。PDV凹基因（GenBank登录号：JF333587．1）全长657bp，编码217个氨基酸。与GenBank其他PDV分离物CP基因核苷酸序列的同源性为89．2％-93．9％，推导的氨基酸序列同源性为97％-99％。根据完整CP基因核苷酸序列构建系统进化树显示：12个PDV分离物可分为3组，泰安分离物与巴西、土耳其等分离物属于I组。成功构建原核表达载体pET30a．PDVCP，并在体外条件下诱导表达出融合蛋白。转pET30a．如Ⅵ≯载体的大肠杆菌BL21（DE3）菌株表达分子量约24kDa的重组蛋白。该重组蛋白在30℃，1．0mmol／LIPTG、诱导4h表达量最大。
- 陈立伟宗晓娟王文文王甲威魏海蓉徐丽严雪瑞刘庆忠
- 关键词：外壳蛋白基因克隆原核表达
- SYBR Green I实时荧光RT-PCR技术在甜樱桃病毒定量分析中的应用
- 为了说明SYBRGreenⅠ实时定量RT-PCR（Real-timequantitativereversetranscriptionpolymerasechainreaction）技术在甜樱桃病毒粒子定量分析中的应用前景...
- 宗晓娟王文文王甲威魏海蓉徐丽陈新严雪瑞刘庆忠
- 关键词：李属坏死环斑病毒实时定量RT-PCR
- 文献传递
- 4个引种栎类树种苗期抗寒性初步研究被引量：14
- 2016年
- 以娜塔栎、沼生栎、舒玛栎、双色栎4种栎树的休眠枝为试材,分别在0、-5、-10、-15、-20、-25、-30、-35℃下低温胁迫处理后,测定其枝皮的电导率、过氧化物酶(POD)、超氧物歧化酶(SOD)、可溶性蛋白、M DA含量,探讨其生理生化指标的变化及抗寒性。结果表明,随温度的降低,4栎树植物的电导率曲线呈现典型的S型,而生理指标均呈升高后降低的趋势。通过拟合Logistic方程得出4种植物的半致死温度(LT50)并确定了4种栎树的抗寒性强弱:沼生栎(-28.42℃)>娜塔栎(-25.11℃)>双色栎(-24.78℃)>舒玛栎(-22.42℃)。
- 杨振亚台秀国曹振玉李波曹帮华王树梅王旋
- 关键词：低温胁迫半致死温度抗寒性
- 仔猪外周血中内参基因的筛选及细胞因子和受体的表达水平被引量：8
- 2015年
- 【目的】中国地方猪种在抗病性和免疫力方面优于国外猪种,但是对中外猪种抗病力差异的遗传基础和免疫机理却了解甚少。有推测不同品种猪对疾病的抵抗力不同可能在细胞因子和受体的表达水平上有所反映。本研究以抗病力强的大蒲莲和抗病力相对较弱的长白猪的断奶仔猪为研究对象,对6个具有重要功能的细胞因子(促炎症细胞因子(IL8和TNFα),抗炎症细胞因子(IL10),干扰素调节因子(IRF3)和干扰素(IFNA和IFNG))和1个最具代表性的模式识别受体(TLR4)基因在大蒲莲和长白仔猪群体外周血液中的基因表达量进行检测,并对各基因进行品种和母猪效应分析,为了解中外不同猪种的免疫水平奠定基础。【方法】采集大蒲莲(104头)和长白(171头)35日龄仔猪的外周血,提取总RNA,逆转录为c DNA后,利用荧光定量PCR法,首先对6个常用的候选内参基因(ACTB、GAPDH、B2M、TBP、RPL4和PPIA)利用ge Norm软件进行稳定性评价分析,筛选仔猪外周血RNA基因定量分析中稳定表达的内参基因,然后利用该内参基因进行校正,对上述细胞因子和模式识别受体基因在大蒲莲和长白仔猪群体外周血中的表达量进行定量,并利用最小二乘法对细胞因子和受体在大蒲莲和长白仔猪群体中的表达量进行品种和母猪效应分析。【结果】研究结果归纳为4个方面:1.外周血样品中内参基因稳定性值M从大到小依次为:ACTB(0.595)>GAPDH(0.571)>PPIA(0.469)>RPL4(0.466)>TBP(0.461)>B2M(0.440),选择表达稳定性最高的基因B2M作为内参基因对细胞因子和受体基因的表达量进行校正。2.检测的6个细胞因子的基因表达量存在很大的差异,各细胞因子基因表达量ΔCt最大值和最小值之间差值分别为9.23—14.25和5.83—8.73;受体TLR4的ΔCt值的最大和最小值之间相差相对较小,大蒲莲和长白仔猪分别为5.03和3.82。3.大蒲莲和长白两品种间相比较,细胞因子在长白�
- 王继英王彦平郭建凤王怀中林松张印武英
- 关键词：细胞因子模式识别受体仔猪
- 核果类果树遗传转化及检测技术研究进展
- 2013年
- 综述了近年来国内外常见核果类果树遗传转化的研究进展,概述了目前果树遗传转化的主要方法,阐述了核果类果树遗传转化植株的主要鉴定方法,指出了当前研究中存在的一些问题,探讨了转基因研究未来的发展方向。
- 王文文孟艳玲宗晓娟王甲威魏海蓉崔海金刘庆忠
- 关键词：核果类果树
- 过表达GmST1基因提高了棉花的耐盐性
- GmST1基因是从大豆中克隆的NAC家族转录因子基因,采用农杆菌介导法将GmST1基因转入棉花获得了转基因棉花。以鲁棉研21为野生型对照组、转GmST1基因株系G15、G21及G31为材料,将四叶期幼苗在250 mmol...
- 陈希瑞宋玖玲程成张可炜
- 关键词：陆地棉耐盐基因表达量
- 文献传递
