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半定量检测狂犬病病毒含量的双抗体夹心直接ELISA方法的研究被引量：1: 2011年; 为了实现在狂犬病疫苗生产中抗原含量的快速测定,试验以狂犬病高免血清为包被抗原,捕获抗体为针对病毒核蛋白的酶标单克隆抗体,标准品为经细胞半数感染量(TCID50)准确定量的病毒液,建立一种能够定量检测狂犬病病毒的双抗体夹心直接ELISA方法。结果表明:试剂盒的最低检测限为1.0×106 TCID50/mL,线性检测范围为1.0×106～1.0×109 TCID50/mL,标准曲线的平均批内变异系数为4.9%,平均批间变异系数为6.1%。; 李金秋扈荣良任文陟刘颖; 关键词：狂犬病病毒抗原检测

旋毛虫P53ES抗原基因的克隆及真核表达被引量：4: 2009年; 应用RT-PCR方法扩增旋毛虫ES抗原P53基因,构建P53基因绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-N1-P53,利用脂质体法将其转染哺乳动物细胞COS-7。于转染24h后在荧光显微镜下观察到发绿色荧光的转染细胞;同时通过westen blot分析证实了P53基因表达产物的抗原性。结果表明,P53基因在COS-7细胞中表达获得了表达,而且其融合蛋白具有免疫原性。; 朱艳梅韩彩霞路义鑫宋铭忻; 关键词：旋毛虫 P53基因克隆真核表达

应用液相基因芯片技术检测食品中弓形虫和旋毛虫的研究: 为建立一种可以同时检测食品中弓形虫和旋毛虫的液相基因芯片方法,本研究以弓形虫B1基因和旋毛虫18S rDNA基因为研究对象,设计并合成特异性探针和引物,通过PCR方法扩增目的片段并测序,建立一种基于双重PCR的液相基因芯...; 杨朋欣张子群路义鑫韩彩霞李晓云宋铭忻; 关键词：弓形虫旋毛虫; 文献传递

食品中弓形虫和旋毛虫液相基因芯片检测方法的研究被引量：15: 2010年; 为建立一种可同时检测食品中弓形虫和旋毛虫的液相基因芯片方法,本研究以弓形虫B1基因和旋毛虫18S rDNA基因为靶序列,设计并合成特异性探针和引物,通过PCR方法扩增目的片段并测序,建立一种基于双重PCR的液相基因芯片检测方法。结果显示:在约180bp和90bp处分别扩增出目的条带;测序结果与GenBank登录的弓形虫和旋毛虫的相关基因一致性分别为99.47%和100%;液相基因芯片对单重PCR产物和双重PCR产物的检测结果一致,特异性和重复性良好。应用该方法检测弓形虫和旋毛虫变异系数(CV%)均在7%以内;灵敏度分别为65.6ng/mL和39.06ng/mL,比琼脂糖凝胶电泳灵敏高约8倍;模拟污染试验准确率达98%以上。本研究建立的液相基因芯片检测食品中弓形虫和旋毛虫的方法具有高效、灵敏和特异等优点,为食源性寄生虫的检测和监控提供了新方法。; 杨朋欣张子群路义鑫韩彩霞李晓云宋铭忻; 关键词：弓形虫旋毛虫

不同发育时期旋毛虫脂肪酸组成的研究: 2010年; 为探讨旋毛虫生长发育过程中脂肪酸组分的变化及外界环境对其影响,本研究采用贝尔曼氏装置分别收集旋毛虫肌幼虫和成虫,同时,将少量骨骼肌和肠黏膜进行酯化处理,通过气相色谱质谱联用技术进行分析。结果显示:肌幼虫和成虫的脂肪酸组分涵盖了C12～C22的22种,主要为16、18和20碳脂肪酸,但旋毛虫肌幼虫与成虫的各脂肪酸相对含量有明显差异(p<0.05)。分别对旋毛虫肌幼虫和成虫及其各自寄生部位骨骼肌和肠黏膜中的脂肪酸成份进行比较分析,结果显示:各脂肪酸组成相似,但在相对含量上却有显著差异(p<0.05)。表明不同发育时期旋毛虫的脂肪酸组成在种类和相对含量上均存在明显差异,这可能与其所处的不同宿主环境和不同发育时期虫体的特殊生理结构有关。; 赵风强路义鑫韩彩霞张晓波兰静宋铭忻; 关键词：旋毛虫脂肪酸气相色谱-质谱联用技术

不同发育时期旋毛虫脂肪酸组成的研究: 为探讨旋毛虫生长发育过程中脂肪酸组分的变化及外界环境对其影响,本研究采用贝尔曼氏装置分别收集旋毛虫肌幼虫和成虫,同时,将少量骨骼肌和肠黏膜进行酯化处理,通过气相色谱质谱联用技术(GC-MS)进行分析。结果显示:肌幼虫和成...; 赵风强路义鑫韩彩霞张晓波兰静宋铭忻; 关键词：旋毛虫脂肪酸 GC-MS; 文献传递

本地毛形线虫49 Ku ES重组蛋白单克隆抗体的制备与鉴定: 2007年; 采用纯化的本地毛形线虫49KuES重组蛋白免疫BALB／c小鼠，取其脾细胞与SP2／0细胞融合，筛选分泌高滴度McAb的杂交瘤细胞株制备腹水。获得两株稳定分泌抗重组蛋白McAb的杂交瘤细胞株D5和C1。试剂盒鉴定两株McAb均属IgM亚类，其轻链均为K链；间接ELISA检测细胞培养液上清和腹水效价，结果显示，两株细胞培养液上清均达到1：1．28X10^3，腹水效价均达到1：1．28X10^4；Western blot结果表明，获得的两株McAb均能特异性的识别约49Ku处的ES抗原；间接ELISA结果显示两株McAb与日本血吸虫成虫、猪囊尾蚴囊液、猪蛔虫、猪鞭虫抗原均无交叉反应，表明两株McAb特异性良好。; 姜曰晓路义鑫王君宋铭忻; 关键词：本地毛形线虫重组蛋白杂交瘤单克隆抗体

猪、犬源毛形线虫对兔的感染性研究: 2008年; 以旋毛虫国际标准种:旋毛形线虫和本地形线虫为对照,从兔感染性方面对黑龙江省猪、犬源毛形线虫进行了比较研究。研究结果表明,4个旋毛虫隔离种对兔的感染性存在着明显差异,猪源毛形线虫和旋毛形线虫对兔的感染性较强,其在兔体内的繁殖力指数分别为62.29和143.05;而犬源毛形线虫和本地毛形线虫对兔易感性差,其在兔体内的RCI分别是10.65和12.19。; 刘冬红; 关键词：犬旋毛虫感染性

旋毛虫ES抗原致鼠胸腺淋巴细胞凋亡的初步研究: 2008年; 本试验首次以体外培养的小鼠胸腺淋巴细胞为实验对象,加入旋毛虫(Trichinella spiralis)肌幼虫ES抗原做刺激物,通过(AO/EB)双荧光染色法和流式细胞术对鼠胸腺淋巴细胞的凋亡水平的检测,进而证明旋毛虫肌幼虫ES抗原能够诱导鼠淋巴细胞发生凋亡。; 花丽茹李殿胜李桂伟宋铭忻路义鑫; 关键词：寄生虫感染旋毛虫感染细胞凋亡

本地毛形线虫49kuES蛋白结构基因在昆虫细胞中的表达: 2008年; 根据BAC-TO-BAC杆状病毒表达系统的供体质粒,设计表达引物,从克隆质粒上扩增本地毛形线虫(Trichinella nativa)49kuES结构蛋白基因TNPG,酶切后与供体质粒连接,在大肠杆菌中克隆,将克隆有外源基因的供体质粒转化DH10Bac感受态菌,该菌含有杆状病毒穿梭载体,供体质粒中的外源基因在辅助质粒编码的转座酶作用下,通过转座而插入杆状病毒基因组中,筛选含有重组质粒的Bacmid DNA,用脂质体介导法转染昆虫细胞获得重组病毒。SDS-PAGE电泳显示表达蛋白为36ku的融合蛋白,Western blot检测表明表达的融合蛋白能够被小鼠旋毛虫的阳性血清识别。实验结果表明,本地毛形线虫的ES融合蛋白的制备将在诊断方法的建立和免疫研究方面具有很好的应用前景。; 李冬梅王秀荣路义鑫马广鹏花丽茹宋铭忻; 关键词：本地毛形线虫杆状病毒表达

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“十一五”国家科技支撑计划(2006BAD06A09)