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2种佐剂在传染性法氏囊病基因工程亚单位疫苗中的应用比较被引量：2: 2011年; 为提高疫苗佐剂在鸡传染性法氏囊病(IBD)基因工程亚单位疫苗制备中的有效性和安全性,采用2种佐剂IBDV VP2抗原效价的4种疫苗:AGP效价分别为1∶32和1∶16的白油佐剂IBD疫苗和AGP效价分别为1∶32和1∶16的603新型纳米佐剂IBD疫苗,以及2组不同佐剂的对照制剂,将疫苗以2种不同剂量分别注射接种SFP鸡,进行了免疫效果与安全性对比试验。免疫效果试验结果表明:白油佐剂组2种不同抗原剂量刺激产生的抗IBDV VP2抗体水平均高于对应的等剂量的纳米佐剂制剂。并且白油佐剂组抗体水平从14d到21d呈上升趋势,纳米佐剂组14d后抗体水平上升不明显或呈下降趋势。安全性对比试验结果表明:纳米佐剂IBD亚单位疫苗的安全性明显优于白油佐剂。该结果可为IBD亚单位疫苗生产工艺的改进提供参考。; 蔡联燊荣俊; 关键词：免疫 SPF鸡效价

血管瘤型禽白血病研究进展被引量：3: 2012年; 就血管瘤型禽白血病抗原特征、流行病学、临床及解剖症状、诊断方法和预防控制措施等几方面进行了综述。; 侯新华刘东王义左青山孙健李彬杜元钊; 关键词：禽白血病血管瘤

HLA-A胞外区成熟肽基因的克隆及其原核表达载体的构建: 2009年; 根据GenBank基因库中HLA-A胞外区成熟肽基因序列设计2对引物,用RT-PCR法从健康人血液中扩增HLA-A胞外区基因,扩增产物进行T-A克隆、测序.结果表明,获得的HLA-A胞外区基因大小为819bp,与模板序列的同源性为96%.利用基因重组技术,将HLA-A胞外区基因亚克隆入pET-21a(+)载体中.经PCR、酶切和测序鉴定,证实所获重组表达质粒pET–21/HLA-A中含有目的片段,且连接、构建正确,表明成功构建了重组表达质粒pET–21/HLA-A.; 张蕾李新生崔保安陈红英孙凯宋亚鹏; 关键词：成熟肽基因克隆原核表达

禽脑脊髓炎病毒感染雏鸡的病理组织学观察被引量：8: 2009年; 张淑霞杨增岐季芳王向鹏薛登民赵余放; 关键词：禽脑脊髓炎病毒组织学观察雏鸡接触性传染病晶状体混浊

鸭群中REV感染的流行病学调查被引量：7: 2008年; 【目的】了解网状内皮组织增生病病毒(REV)在鸭群中的感染状态。【方法】从山东省不同地区送检的病(死)鸭中,随机采集法氏囊、脾脏和肝脏等220份样品。细胞培养分离病毒,以提取的组织DNA为模板进行特异性斑点杂交、PCR和nest-PCR检测。从不同地区阳性样品中任选一个进行克隆测序、同源性比较和进化树分析。【结果】从35/39份法氏囊、54/84份脾脏和32/97份肝脏DNA样品中检出REV(121/220)。其中法氏囊的检出率最高,显著高于肝脏、脾脏(P<0.01),但用细胞培养分离病毒、常规PCR、组织DNA直接点杂交检测时,均未检出REV。YN-1和BZ-1株env基因片段与美国分离的鸭源SNV株同源性高达99.8%,LQ-1株env基因片段与美国鸡源分离株的同源性为100%,均高于近几年中国鸡源分离株。【结论】在检测REV感染时,应加强对法氏囊的检测,但由于REV在感染鸭的组织中含量很低,应采用更为敏感的nest-PCR。同源性和进化树分析表明,我国鸭源REV很可能是在引进未经对REV检疫的种鸭时引入的。; 倪楠崔治中; 关键词：网状内皮增生病病毒巢式PCR 病原分离

秦岭野鸟源新城疫病毒致病性与F、HN基因分子特征分析被引量：5: 2013年; 为研究新城疫病毒(NDV)在秦岭地区野生鸟群中的流行情况,在秦岭地区采集健康野鸟咽喉、泄殖腔拭子各252份,进行NDV的分离、鉴定,并对NDV分离株进行生物学特性研究和遗传进化分析。结果共分离获得5株野鸟源NDV,其致病指数MDT、ICPI和IVPI分别为60.0～76.8h、0.900～1.261、0.41～0.81;对F基因(47～420bp)进行遗传进化分析,5株分离株均属于基因VIb型,F蛋白裂解位点为112 RRQKRF117;HN基因氨基酸相似性为99.5%～99.8%,与鸽源基因VI型NDV相似性为91.4%～98.0%,与LaSota、F48E9相似性分别为87.1%～87.4%、89.0%～89.3%。上述结果表明,基因VIb型NDV在秦岭地区健康野生鸟类中流行,可能源于鸽源NDV,并具有强毒力的分子特征,但对鸡的表现为中等致病力,说明野鸟NDV具有独特的分子特征和致病性。; 张渭东王丹阳唐文雅王兴龙姜振国陈胜利幕国辉刘海金贺生芳付向晶郝华芳刘阳坤杜恩岐杨增岐; 关键词：F基因 HN基因遗传进化分析

1株猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因缺失毒株的基因组特征与演化分析被引量：6: 2012年; 为了解陕西猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的变异情况,对发病猪场进行PRRSV分离,采用RT-PCR方法对分离株NSP2基因和ORF5基因分别进行扩增,测序后进行序列分析。结果显示:得到1株PRRSV,命名为HZ1007株,属于美洲型;其NSP2 481位和533—561位存在30个氨基酸的不连续缺失,与高致病性PRRSV分子特征相似;GP5 85—95位氨基酸处出现了11个氨基酸的连续缺失;系统进化分析发现HZ1007与国内高致病性代表毒株HUN4、JXwn06、SY0608等亲缘关系较近,且与HUN4株相似性最高,为97.4%。本研究发现了GP5缺失型PRRSV,这在国内外尚属首例,且HZ1007株与高致病性PRRSV亲缘关系较近,在系统进化分析树上与高致病性毒株同属一个分支,其可能是高致病毒株新的变异型,其致病性和生物学特性需进一步研究分析。; 付向晶王丹阳王兴龙张渭东宋祥军刘阳坤唐文雅慕国辉刘海金贺生芳杜恩岐杨增岐; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 NSP2基因

腺病毒载体介导的GFP在鸡胚成纤维细胞中的表达及RNA干涉被引量：3: 2008年; 鸡胚成纤维细胞(CEF)是多种动物及人类病毒的易感细胞;也是研究鸡的基因组功能的理想材料.本试验的目的是研究非复制型腺病毒载体对CEF的转染效率及安全性;并建立在CEF细胞中进行RNAi的技术平台.采用GFP重组非复制型腺病毒载体(Ade-GFP)转染CEF细胞;结果证明0.1-2000 MOI Adv-GFP均可转染CEF细胞并表达GFP;转染后16h开始出现GFP阳性细胞;胞核与胞浆可见明亮的荧光;荧光细胞数量及荧光强度在24～36h达到高峰;以后逐渐衰减;约180h全部消失;转染效率最高为22.3%;形态学观察及流式细胞仪测定结果显示;Adv-GFP转染的CEF细胞未见细胞病变;多数转染组细胞活力不受影响;说明用Adv-GFP携带外源转染CEF细胞是安全可行的;用脂质体转染试剂转染化学合成的GFP-siRNA;成功地干涉了腺病毒载体介导的GFP基因在鸡胚成纤维细胞的表达;干涉效率为85%;证明了鸡胚成纤维细胞中存在RNAi机制;为进一步利用非复制型腺病毒载体递送siRNA在CEF细胞内进行RNAi的研究奠定了基础.; 傅安静汤承李定霏谢青岳华; 关键词：RNA干涉腺病毒载体鸡胚成纤维细胞

蛋鸡血管瘤型J亚群禽白血病病毒的分离与鉴定被引量：5: 2011年; 通过临床观察、剖检、接种DF-1细胞、间接免疫荧光试验和PCR等方法,从安徽父母代种鸡场、青岛平度和沙子口某商品蛋鸡场分离到3株血管瘤型J亚群禽白血病病毒(ALV-J),分别命名为AH-101、PD-101、SZK-101。采集病鸡的血液、肝脏和脾脏组织,接种DF-1细胞分离病毒,提取DNA,用PJ1/PJ2ALV-J引物进行PCR扩增结果为阳性,IFA检测为阳性。用J3/J4引物扩增gp85并测序,序列分析发现,3株毒株与国内外各ALV-J的相应核苷酸相似性为91.6%～96.9%,氨基酸序列的同源性为83.4%～96.9%。系统进化分析表明,AH-101和PD-101与原型株HPRS-103的亲缘关系最近,SZK-101与美国株AF247391的亲缘关系最近。; 侯新华申茂欣鹿欣伦楚电峰刘东孙健左青山杜元钊; 关键词：禽白血病病毒 J亚群血管瘤

东北虎源等孢球虫虫种的鉴定被引量：3: 2010年; 对采自黑龙江省某动物园的东北虎源球虫虫种进行鉴定。对东北虎源球虫进行形态学观察;应用孢子化卵囊对犬进行感染性试验;根据已发表的猫等孢球虫核糖体内转录间隔区Ⅰ（ITSⅠ）序列设计引物,提取虫体基因组DNA扩增目的片段,并与其他球虫的ITSⅠ序列进行同源性比较。结果表明,根据形态学观察发现该球虫符合等孢属球虫的特征;用孢子化卵囊感染犬,结果不能在其粪便中检出卵囊;利用聚合酶链式反应（PCR）扩增的目的片段,与其他19种球虫的ITSⅠ序列同源性为35.97%~98.71%之间。通过对东北虎源球虫形态学观察、犬的感染性试验与分子鉴定,确定东北虎源球虫为等孢属球虫,并且与猫等孢球虫亲缘最近。; 韩彩霞路义鑫张靖伟张子群李晓云宋铭忻; 关键词：形态学观察分子鉴定

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“十一五”国家科技支撑计划(2006BAD06A08)

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