上海市自然科学基金(12ZR1429900)
- 作品数：9 被引量：21H指数：2
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- 抗霉素A诱导血小板凋亡的分子机制研究被引量：1
- 2015年
- 目的探讨抗霉素A(AMA)诱导血小板凋亡及其分子机制。方法取健康志愿者单采血小板,离心洗涤得到洗涤血小板,将洗涤血小板与不同浓度的AMA孵育后,流式细胞术检测线粒体跨膜电位(ΔΨm)去极化、磷脂酰丝氨酸(PS)暴露、细胞内活性氧(ROS)、线粒体ROS、P-选择素表达和整合素αⅡbβ3活化;Western blot法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的活化。在抑制试验中,先将洗涤血小板与线粒体靶向的ROS拮抗剂Mito-TEMPO预孵育,然后再与AMA孵育,流式细胞术检测相关凋亡指标。结果AMA剂量依赖性诱导血小板ΔΨm去极化、PS暴露、细胞内ROS和线粒体ROS升高以及Caspase-3活化;但是AMA不能诱导血小板活化。线粒体靶向的ROS拮抗剂抑制AMA诱导的血小板ΔΨm去极化、PS暴露、Caspase-3活化以及线粒体ROS的生成。结论 AMA能够诱导血小板发生凋亡,线粒体ROS可能在AMA诱导的血小板凋亡过程中起重要作用。
- 胡萍朱永明谢如锋王志成
- 关键词：血小板凋亡线粒体活性氧
- 钙调蛋白抑制剂诱导血小板GPⅠbα酶切的分子机制研究被引量：2
- 2012年
- 目的探讨钙调蛋白抑制剂在GPⅠbα酶切中的作用和分子机制。方法取健康志愿者静脉血5份[(10 ml/(人)份],分离得到洗涤血小板3 ml/份,将洗涤血小板分别与Calpain抑制剂、活性氧(ROS)拮抗剂、NAD(P)H氧化酶抑制剂、线粒体ROS拮抗剂或溶剂对照(DMSO)等预孵育,再与钙调蛋白抑制剂W7孵育;流式细胞仪检测GPⅠbα表达、胞内Ca2+和ROS浓度;Western blot检测GPⅠbα酶切产物、Calpain底物talin的酶切。结果W7浓度依赖地引起血小板胞内Ca2+浓度升高,Ca2+平均荧光强度DMSO为52±9,而W7在25、50和100μmol/L时分别为121±17、225±23和308±25;W7浓度依赖地诱导血小板ROS产生,与DMSO比较,W7在25、50和100μmol/L时诱导的ROS相对浓度分别为150±11、209±20和297±18;ROS拮抗剂和Calpain抑制剂单独使用时都部分抑制W7诱导的GPⅠbα酶切,联合使用时则完全抑制W7诱导的GPⅠbα酶切。结论钙调蛋白抑制剂通过活化Calpain和产生ROS共同调控ADAM17介导的GPⅠbα酶切。
- 王志成谢如锋张晓峰
- 关键词：钙调蛋白钙离子
- 活性氧在血小板活化和凋亡中的作用机制研究进展被引量：1
- 2015年
- 血小板在血栓与出血性疾病的发生中起重要作用。当血管内皮细胞受到损伤或在病理性血流高剪切力作用下,血小板通过膜表面的各种受体启动信号转导途径,引起血小板活化。活化的血小板相互聚集成团,形成血小板血栓,因此,血小板活化在生理性止血和病理性血栓形成过程中起关键作用。近年来,血小板凋亡逐渐引起研究者的关注。目前,血小板活化和凋亡的分子机制还未完全阐明。很多研究已证实,各种能诱导血小板活化或凋亡的刺激物,能诱导血小板产生活性氧(ROS),ROS在血小板活化和凋亡中的作用正逐渐引起研究者的关注。文章将主要综述ROS在血小板活化和凋亡中作用的最新研究进展。
- 朱可馨王冰王志成
- 关键词：血小板活性氧凋亡活化
- 血小板储存损伤研究进展被引量：5
- 2018年
- 血小板储存损伤是从献血者抽出血液到给输血者输注血小板过程中血小板形态结构和功能发生损伤的总和。它会造成血小板形态变化功能下降以及治疗功效的下降。伴随着临床对血小板的需求日益增多,研究血小板储存损伤的重要意义逐渐凸显。因此,本文将对血小板储存损伤作用机制、评估与监测以及新技术开发等方面研究进行综述,试图解释血小板储存损伤的作用机制。
- 马相宜王志成
- 关键词：血小板
- 白藜芦醇固体脂质纳米粒的处方和制备工艺优化被引量：9
- 2015年
- 目的比较白藜芦醇固体脂质纳米粒(Res-SLN)不同制备方法,以单因素考察结合星点设计效应面法优化制备工艺。方法比较薄膜超声分散法、溶剂乳化挥发法等4种Res-SLN的制备方法,筛选得到粒径较低、载药量较高、稳定性好的制备方法;再以单因素考察结合星点设计效应面法优化处方与制备工艺。结果优选的薄膜超声分散法所制备的Res-SLN,粒径为142.7 nm,粒径PDI为0.307,载药量为21.35%。结论薄膜超声分散法所制备的ResSLN,具有粒径较小,载药量较高,制备工艺简单的特点。
- 朱可馨王志成王冰张彤
- 关键词：白藜芦醇固体脂质纳米粒
- 血小板黏附受体GPIb-IX-V介导的信号通路研究进展被引量：2
- 2014年
- 血小板在生理性止血和病理性血栓形成中起关键作用。血小板黏附受体GPIb-IX-V复合物能与血管性血友病因子(VWF)、P-选择素、凝血酶等结合,在血小板血栓形成的起始阶段和凝血过程中起重要作用。磷脂酶C(PLC)、磷脂酶A2(PLA2)、14-3-3ζ蛋白、细胞骨架等参与GPIb-IX-V介导的信号通路,现就GPIb-IX-V复合物介导的信号通路作一综述。
- 胡萍谢如锋王志成
- 关键词：血小板糖蛋白信号通路血栓
- HPLC法测定Res-SLN载药量与包封率的实验研究被引量：1
- 2015年
- 目的：建立HPLC法测定白藜芦醇固体脂质纳米粒（Res－SLN）的载药量与包封率测定方法。方法：采用TopsilC18色谱柱（4．6mm×150mm，5μm），流动相为乙腈－甲醇（25：75），检测波长为306nm，流速为1mL／min，柱温为25℃；采用超滤法分离游离药物与酱藜芦醇固体脂质纳米粒测定包封率与载药量。结果：白藜芦醇在1．01～32．32μg/mL质量浓度范围内与色谱峰面积呈良好线性关系，精密度与回收率均较好；白藜芦醇固体脂质纳米粒平均包封率为81．4％，平均载药量为21．4％。结论：所建方诸准确、可靠、方便，可用于白藜芦醇固体脂质纳米粒包封率与载药量的测定。
- 朱可馨王志成张彤王冰
- 关键词：白藜芦醇固体脂质纳米粒包封率载药量
- 解离素-金属蛋白酶17活性调控机制的研究进展
- 2014年
- 血小板在发生活化或凋亡的同时伴随有黏附受体糖蛋白(GP)Ⅰbα酶切,GPⅠbα酶切作为血小板发生活化或凋亡的一个重要生物标志物。目前,GPⅠbα酶切主要由解离素-金属蛋白酶17(ADAM17)所介导。ADAM17是锌离子依赖的金属蛋白酶,属于adamalysin蛋白家族,与其他金属酶密切相关。现就近年来ADAM17的结构、功能以及活性调节等方面的研究进行综述。
- 朱可馨王冰王志成
- 关键词：金属蛋白酶血小板酶切
- 佛波酯诱导血小板黏附受体GPⅠbα酶切的机制研究
- 2013年
- 目的佛波酯(PMA)能诱导血小板黏附受体GPⅠbα酶切,但分子机制未完全阐明。本研究主要探讨PMA诱导GPⅠbα酶切的分子机制。方法取健康志愿者静脉血,分离得到洗涤血小板。将洗涤血小板分别与蛋白激酶C(PKC)抑制剂、活性氧(ROS)抑制剂、NAD(P)H氧化酶抑制剂、线粒体ROS拮抗剂或二甲基亚矾(DMSO)对照等预孵育,再与PMA孵育。流式细胞仪检测ROS浓度;Western blot检测GPⅠbα酶切产物;用非同位素标记法检测PKC活性。结果 PKC抑制剂BIM和ROS抑制剂二硫苏糖醇(DTT)单独使用时,都能完全抑制PMA诱导的GPⅠbα酶切。PMA浓度依赖地诱导血小板ROS产生,PKC抑制剂和NAD(P)H氧化酶抑制剂都能抑制PMA诱导的ROS产生,而线粒体ROS拮抗剂没有抑制作用。BIM抑制PMA诱导的PKC活化,DTT则没有抑制作用。结论 PMA可能通过PMA-PKC-NAD(P)H氧化酶-ROS-ADAM17-GPⅠbα信号通路调节GPⅠbα酶切。
- 王志成罗梅宏谢如锋张晓峰
- 关键词：血小板佛波酯蛋白激酶C活性氧
