上海市科委重大科技攻关项目(12DJ1400200)
- 作品数：2 被引量：21H指数：2
- 相关作者：关雪晶沈玥钱盈盈严玉澄钱家麒更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属仁济医院上海市免疫学研究所更多>>
- 发文基金：上海市科委重大科技攻关项目国家自然科学基金上海市科委医学引导类科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- H2O2抑制小鼠肾小管上皮细胞Klotho的表达被引量：5
- 2015年
- 目的 研究过氧化氢（H2O2）引起的氧化应激损伤对小鼠肾小管上皮细胞（TCMK-1）Klotho蛋白表达的影响及可能的作用机制.方法 体外培养TCMK-1细胞,以不同浓度的H2O2刺激细胞,采用流式细胞术检测活性氧族（ROS）生成;CCK-8检测细胞生存率;流式细胞术和Hoechst 33258染色检测细胞凋亡;Western印迹法检测Klotho蛋白、细胞凋亡相关蛋白和抗氧化酶的表达.结果 与正常对照组比较,H2O2刺激后TCMK-1细胞内ROS水平升高（均P＜ 0.05）,抗氧化酶锰超氧化物歧化酶（manganese superoxide dismutase,SOD2）和过氧化氢酶（catalase,CAT）表达水平降低（均P＜0.05）;Klotho蛋白的表达水平降低（均P＜0.05）;TCMK-1细胞生存率显著降低（均P＜0.05）,且呈剂量依赖（0.3～0.9 mmol/L H2O2）;TCMK-1凋亡细胞比例呈剂量依赖性增加（均P＜ 0.05）;Bax/Bcl-2表达比升高,JNK、p38蛋白磷酸化水平均升高（均P＜ 0.05）.结论 H2O2刺激TCMK-1细胞诱导氧化应激损伤,抑制Klotho蛋白的表达,而Klotho表达下降伴随着细胞凋亡的增加和p38、JNK通路的活化.
- 沈玥严玉澄路丽明钱盈盈关雪晶倪兆慧钱家麒
- 关键词：氧化性应激细胞凋亡丝裂原激活蛋白激酶KLOTHO
- Klotho在急性缺血再灌注性肾损伤中的变化及其与凋亡的关系被引量：16
- 2014年
- 目的观察Klotho蛋白在缺血再灌注急性肾损伤中的表达变化,探讨其在肾小管上皮细胞凋亡中的作用。方法 10只BALB/c小鼠随机分为肾脏缺血再灌注组(I/R组,n=5)和假手术组(Sham组,n=5),采用双侧肾蒂夹闭术建立肾缺血再灌注模型,于造模后24 h留取小鼠的血清及肾组织。应用酶法分别测定血清尿素氮和肌酐,ELISA法检测血清Klotho蛋白水平,TUNEL染色法检测肾脏细胞凋亡水平,Real-Time PCR及Western blotting技术分别检测肾组织Klotho、Bax、Bcl-2和Caspase-3的基因及蛋白表达,应用Pearson直线相关法分析急性肾损伤时小鼠全身及局部的Klotho水平和肾脏凋亡的关系。结果与Sham组相比,I/R组小鼠术后24 h肾小管上皮细胞明显变性、坏死,肾脏凋亡细胞明显增加,肾组织cleaved Caspase-3蛋白水平、Bax/Bcl-2 mRNA及蛋白表达比值均显著升高。I/R组小鼠血清Klotho蛋白水平较Sham组小鼠显著降低[(669.89±136.51)pg/mL vs.(2 107.92±549.22)pg/mL,P<0.01],肾组织Klotho mRNA及蛋白表达分别较Sham组下调约9/10(P<0.001)及1/5(P<0.05)。相关性分析显示肾组织bax/bcl-2 mRNA比值与血清Klotho蛋白及肾组织klotho mRNA均呈显著负相关(r=-0.833,P<0.01;r=-0.916,P<0.001),肾组织Bax/Bcl-2蛋白比值和肾组织Klotho蛋白也呈显著负相关(r=-0.637,P<0.05)。结论缺血再灌注急性肾损伤后小鼠全身及肾组织局部Klotho表达均显著下调,Klotho水平的下降可能与凋亡诱导的肾损害密切相关。
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- 关键词：KLOTHOBAX凋亡
