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3种药物对老化卵母细胞4种母源mRNA水平的影响: 2010年; 利用Real-Time PCR技术定量分析了绵羊(Ovis aries)卵母细胞在生长-成熟-老化过程4种母源mRNA(Mater、Zar1、Dnmt1、GDF9)发生的动态变化,以及3种药物(咖啡因、DTT和矾酸盐)对老化卵母细胞母源mRNA水平的影响。结果显示,除Dnmt1在12 h开始下降外,卵母细胞中其他3个基因的表达量都是从生发泡期逐渐下降,且在体外培养至24 h降到最低,然后随着卵母细胞的老化又逐渐上升。其中GDF9和Mater 2个基因在30 h组的卵母细胞中的表达量显著高于24 h组卵母细胞(P<0.05)。30 h卵母细胞中Zar1和Dnmt1的转录水平与24 h卵母细胞差异不显著(P>0.05)。除Zar1外,咖啡因和DTT都显著降低了老化卵母细胞中其他3个基因的表达量(P<0.05),且所有基因表达量与24 h组卵母细胞差异不显著(P>0.05)。矾酸盐处理后的卵母细胞其4种母源mRNA水平都是最高,除Zar1外其他3个基因表达量都显著高于24 h组(P<0.05)。结论是,Mater、Zar1、Dnmt1、GDF9 4种母源mRNA水平与卵母细胞质量成反比,咖啡因和DTT能在一定程度上延缓卵母细胞的衰老,改善卵母细胞质量;而矾酸盐则加速了卵母细胞老化进程,降低了卵母细胞质量。; 叶小芳陈静波侯敏汪立芹赵云程林嘉鹏黄俊成; 关键词：咖啡因 DTT

抗氧化剂延缓卵母细胞老化被引量：1: 2009年; 哺乳动物由于其卵子老化发生卵子质量下降,从而导致老化卵母细胞受精后发育而来的胚胎非整倍体率增高,妊娠流产率增加,对后代产生了严重影响。研究表明一定剂量的抗氧化剂可以延缓卵母细胞的老化,提高卵母细胞的质量,抵抗卵子老化造成的负面影响。; 叶小芳陈静波黄俊成; 关键词：抗氧化剂卵母细胞发育

DTT延缓绵羊卵母细胞老化的研究被引量：1: 2011年; 探讨在培养基中添加二流苏糖醇(DTT)能否延缓卵母细胞的老化进程。采用孤雌激活、单精子注射、体细胞核移植、Real-time-PCR方法研究了DTT对绵羊老化卵母细胞后续发育效率以及母源基因表达水平的影响。结果表明:DTT处理后的老化卵母细胞其核移植重构胚的受精率显著升高(P<0.05),囊胚率差异不显著(P>0.05);DTT显著增加了老化卵母细胞其单精子注射胚的囊胚率(P<0.05);DTT处理后的老化卵母细胞除Zar1水平稍低于老化卵母细胞外(P<0.05),其他3个母源基因(Mater、Dnmt1和GDF9)表达水平显著降低(P<0.05)。结果显示,DTT能在一定程度上延缓卵母细胞老化进程,改善老化卵母细胞的质量。; 叶小芳黄俊成陈静波吕雪峰; 关键词：DTT 绵羊

精卵共孵育时间等因素对绵羊卵母细胞体外发育的影响被引量：1: 2011年; 本试验通过研究精卵作用时间、培养密度、气相环境对卵裂率和囊胚发育率的影响及早期发育快慢与胚胎发育能力的关系,得出:精卵共作用12 h和18 h,不影响囊胚率(P>0.05),但受精18 h的卵裂率明显高于受精12 h的卵裂率(P<0.05);对于四孔板而言,培养密度在50～80枚/孔之间,不影响胚胎后期发育率(P>0.05);早期用5%CO2,空气为平衡气,后期用5%CO2、5%O2,N2为平衡气的气相条件的卵裂率、囊胚率分别极显著高于单独使用这两种气相环境的囊胚率和卵裂率(P<0.01);早期发育较快的胚胎后期发育的能力更强(P<0.01)。; 汪立芹王静陈博林嘉鹏黄俊成; 关键词：绵羊体外受精卵裂率囊胚率

卵母细胞老化对绵羊胚胎早期发育及胞质谷胱甘肽含量的影响被引量：2: 2010年; 卵母细胞随着培养时间的延长逐渐发生老化,老化严重影响卵母细胞的质量及发育潜能,进而影响体外胚胎生产、克隆等生物技术的效率。本文系统地讨论了老化对绵羊孤雌胚、核移植胚和单精注射后的胚胎发育潜能以及胞质内GSH含量的影响。实验结果表明绵羊卵母细胞在成熟培养到30 h就已经发生老化,并且老化降低了卵母细胞质量和后续胚胎发育能力,但是不影响胞质内GSH含量。由此提示在实际操作中可以通过控制卵母细胞成熟的时间和适时的体外操作来改善卵母细胞的质量和促进胚胎发育。这些结果还可以指导操作,降低核移植、单精注射等技术应用于基础研究时引起的操作误差,提高辅助生殖技术的成功率。; 叶小芳陈静波吕雪峰陈世斌黄俊成; 关键词：绵羊卵母细胞 GSH

PDE3与亮甲酚蓝在绵羊卵母细胞体外培养中的应用研究被引量：3: 2011年; [目的]探讨磷酸二酯酶3(PDE3)特异性抑制剂Milrinone与亮甲酚蓝染色液(BCB)相结合在绵羊卵母细胞体外培养中的应用。[方法]比较了BCB对绵羊卵母细胞的筛选与传统的形态分级之间的差异,以及对胚胎后期发育的影响;研究了Milrinone对绵羊卵母细胞的最佳抑制时间,并用于BCB-卵母细胞体外培养。[结果]A、B级卵母细胞中BCB+卵母细胞的比例为64.42%,极显著高于C级卵母细胞的17.00%;BCB+卵母细胞的成熟率(86.16%)、卵裂率(85.29%)、囊胚率(34.40%)分别极显著高于BCB-卵母细胞(50.94%、36.19%和6.73%);6 h是Milrinone对绵羊卵母细胞的最佳抑制时间,该试验组体外培养效率显著高于其他组;Milrinone对BCB-卵母细胞抑制培养6 h,极显著提高了体外胚胎发育率。[结论]为提高绵羊卵母细胞体外培养效率提供了依据。; 汪立芹王静王静金贤华陈博; 关键词：MILRINONE 绵羊卵母细胞

不同处理方法对萨福克肉羊超排回收效果的影响被引量：11: 2011年; 对119只萨福克肉羊进行超排处理,其中48只为首次超排处理,71只为第二次超排处理。结果表明,首次超排胚胎回收率显著高于二次超排胚胎回收率(P<0.05);首次超排和二次超排间供体羊平均黄体数、胚胎可用率均差异不显著(P>0.05);供体羊经第二情期或埋栓同期发情处理后均能达到预期的效果,但首次超排和二次超排供体羊胚胎回收率均差异显著(P<0.05)。; 陈童林嘉鹏黄俊成; 关键词：萨福克肉羊超排胚胎移植

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新疆维吾尔自治区科技攻关项目(200841122)