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3,4-二氨基苯基苯甲酮在基质辅助激光解析离子化质谱分析磷脂中的应用被引量：3: 2011年; 考察了3,4-二氨基苯基苯甲酮(DABP)作为基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)新型基质分析磷脂的能力。与传统基质2,4,6-三羟基苯乙酮(THAP)、2,5-二羟基苯甲酸(DHB)、α-氰基-4-羟基肉桂酸(CHCA)相比,用优化后的DABP基质溶液体系MeOH-H2O-HCl(80∶20∶3,V/V)分析不同种类的磷脂,可以有效抑制碱金属离子加成现象,得到单一的质子加成峰。样品信号强,所需激光能量低,卵磷脂(PC)的检出限可达到500 fmol。在实际样品鸡蛋和大豆提取物分析过程中,DABP基质对磷脂分子具有良好的分辨率,碎片峰少,谱图背景干净,样品制备方法简单省时。; 苗楠张宇张建业邹汉法; 关键词：基质磷脂

毛细管反相液相色谱-串联质谱用于肽的鉴定和相对定量分析被引量：5: 2008年; 建立了一种基于毛细管反相液相色谱-串联质谱联用技术和质谱峰强度数据处理的肽段鉴定和相对定量分析方法。该方法无需对样品中的肽进行化学标记,在对样品进行反相色谱分离和串联质谱分析后,将二级质谱扫描数据进行蛋白质数据库搜索,获得所鉴定肽段的序列、保留时间、质荷比、带电荷数等定性信息;再以此为定位依据,在全扫描质谱数据中提取该肽段对应的离子峰并以该离子峰的峰强度作为定量信息,从而实现对不同样品中的共有肽段进行差异比较分析。以标准蛋白酶解混合肽段为实验对象,以肽段相对强度的相对标准偏差为指标,考察了该方法用于肽段相对定量分析的重现性、检测动态范围以及浓度标准曲线等,为将该方法用于生物样品中内源性肽的差异分析奠定了基础。; 厉欣江新宁邹汉法; 关键词：液相色谱-质谱联用蛋白质组学

基于保留时间和质荷比匹配的液相色谱-质谱联用技术用于非标记肽段的差异分析被引量：5: 2008年; 建立了一种无需化学标记的,基于纳升级毛细管液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用技术和质谱数据处理的肽段差异分析方法。本方法采用定量差异分析与肽序列鉴定分析分别进行的策略,首先对样品进行质谱全扫描的液质全谱式分析,在全扫描质谱数据中提取肽特征点信息,通过保留时间和质荷比参数匹配不同样品中的共有肽特征点,比较其相对峰强度有无差异。最后对样品中存在丰度差异的肽特征点进行选择性二级质谱分析和序列鉴定,从而实现复杂样品中肽段的差异比较分析。以血浆蛋白酶解混合物为实验对象,考察了本方法用于肽段相对定量分析的重现性以及浓度信号响应曲线等。结果表明:提取的肽特征点峰强度相对标准偏差的中值<22%,肽段离子强度动态范围达3个数量级,在5～1000fmol范围内对肽段定量具有良好线性关系。本方法可用于不同条件样品中具有倍数差异的内源性肽的比较分析。; 厉欣徐松云张宇邹汉法; 关键词：无标记液相色谱-质谱联用定量蛋白质组学

基于蛋白顺序提取法分析斯达氏油脂酵母的蛋白质组(英文)被引量：1: 2011年; 斯达氏油脂酵母能在细胞内合成大量的油脂,其细胞内的脂类物质影响着蛋白质提取和后续的蛋白质组学分析。常见的一步蛋白质提取法很难从含有大量油脂的斯达氏酵母细胞中提取蛋白质,因此其蛋白质组学分析的结果较差。本文发展了顺序提取法提取斯达氏酵母中的蛋白质,并采用在线多维微柱反相液相色谱-串联质谱联用技术分析其蛋白质组;共鉴定到227个高可信度的蛋白质,其数目是一步提取法的两倍;此外,所鉴定到的参与基础代谢的蛋白质数目比一步提取法也显著增加。此方法可以有效提取含大量油脂的物种中的蛋白质,为油脂积累的分子机制研究提供重要的信息。; 刘宏伟赵鑫程凯赵宗宝叶明亮; 关键词：样品前处理蛋白质组分析

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国家自然科学基金(20675081)