重庆市教委科研基金(KJ08032)
- 作品数：3 被引量：15H指数：2
- 相关作者：何林叶秀峰毕娟娟余音郭倩更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学更多>>
- 发文基金：重庆市教委科研基金重庆市科技攻关计划重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 自噬在熊果酸抑制人脐静脉内皮细胞增殖中的作用被引量：1
- 2012年
- 目的研究自噬在熊果酸(Ursolic acid,UA)抑制人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖中的作用,探讨UA抑制血管生长的机制。方法体外培养HUVECs,分别采用不同浓度的UA和自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)+UA联合处理,采用MTT法检测UA对HUVECs增殖的抑制作用及其联合3-MA对HUVECs存活率的影响;透射电镜观察细胞的超微结构;微管相关蛋白1轻链3(Microtubule-associated protein 1 light chain 3,MAP1-LC3)免疫荧光和流式细胞术检测UA对HUVECs自噬表达水平的影响;RT-PCR检测自噬相关基因Beclin1和MAP1-LC3B转录水平的变化。结果 UA可抑制HUVECs增殖,且呈剂量依赖性;HUVECs经UA处理后,自噬泡数量明显增加;经UA处理后,可上调HUVECs中MAP1-LC3蛋白的表达水平,MAP1-LC3阳性细胞的荧光强度较对照组明显增强;UA处理HUVECs不同时间可上调MAP1-LC3B及Beclin1 mRNA的转录水平;而UA联合3-MA处理后,HUVECs的增殖抑制作用明显增强。结论UA抑制HUVECs增殖,并诱导其发生自噬,自噬在此过程中起保护性作用,抑制自噬可明显增强UA诱导的HUVECs死亡。
- 毕娟娟何林余音郭倩叶秀峰
- 关键词：熊果酸内皮细胞自噬细胞增殖
- 自噬在熊果酸诱导的人脐静脉内皮细胞损伤中的作用被引量：6
- 2012年
- 目的:研究自噬在熊果酸诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HU-VECs)损伤中的作用。方法:体外培养HUVECs,运用不同浓度的熊果酸处理36 h,采用MTT法检测HUVECs增殖率的变化;透射电镜观察细胞超微结构的改变;单丹磺酰尸胺(MDC)荧光染色观察熊果酸对HUVECs自噬表达水平的影响;Western blotting检测微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)及自噬相关蛋白Beclin-1的变化;RT-PCR检测LC3及Beclin-1 mRNA的变化;流式细胞术检测自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)抑制自噬前后经熊果酸处理的HUVECs凋亡率的变化。结果:熊果酸抑制HUVECs增殖并呈剂量依赖性;熊果酸可诱导HUVECs产生自噬:透射电镜和MDC染色均显示HUVECs经熊果酸处理后自噬囊泡明显增加且自噬在基因及蛋白水平的表达均增加;3-MA与熊果酸联合作用于HUVECs时抑制了熊果酸诱导的HUVECs自噬空泡的积聚并且可明显促进HUVECs凋亡。结论:熊果酸抑制HUVECs增殖,并诱导其发生自噬,自噬在此过程中对HUVECs起保护作用。自噬抑制剂3-MA能够增强熊果酸诱导的HUVECs的增殖抑制作用并且促进HUVECs发生凋亡。
- 毕娟娟何林余音郭倩叶秀峰
- 关键词：熊果酸内皮细胞自吞噬作用细胞凋亡
- 熊果酸对血管内皮细胞增殖的影响及其机制被引量：9
- 2011年
- 目的研究熊果酸(Ursolic acid,UA)对人脐静脉血管内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖及ERK1、c-Jun、c-Myc、Cyclin D1基因mRNA和蛋白表达的影响,探讨熊果酸抑制血管生长的机制。方法体外培养HU-VECs,用不同浓度熊果酸(31.5、62.5、125、250、500μg/ml)处理不同时间(12、24、48 h),MTT法检测细胞增殖抑制率。用125μg/ml熊果酸和100μmol/L PD98059(ERK抑制剂)处理HUVECs 48 h;不同浓度熊果酸处理24 h;125μg/ml熊果酸处理不同时间,RT-PCR和Western blot分别检测HUVECs中ERK1、c-Jun、c-Myc、Cyclin D1基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平。结果不同浓度的熊果酸对HUVECs的增殖均有明显的抑制作用,且呈剂量和时间依赖性;经熊果酸和PD98059处理的HUVECs中ERK1、c-Jun、c-Myc、Cyclin D1基因mRNA和蛋白的表达水平均明显降低,且呈剂量和时间依赖性。结论熊果酸可通过抑制ERK信号转导通路而抑制血管内皮细胞增殖。
- 李伟刘琼何林毕娟娟叶秀峰
- 关键词：熊果酸内皮细胞细胞增殖
