国家自然科学基金(3030016230873412)
- 作品数:1 被引量:1H指数:1
- 相关作者:李春霖陈凤玲胡仁明刘瑜王宣春更多>>
- 相关机构:复旦大学中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金:解放军总医院科技创新苗圃基金国家自然科学基金更多>>
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- BTBD10基因的真核表达载体构建和亚细胞定位被引量:1
- 2009年
- 目的构建BTBD10重组真核表达载体,观察BTBD10在HEK293细胞中的定位。方法利用PCR方法扩增BTBD10全长,经HindⅢ和BamHI酶切后连接入pGFP-C3真核表达载体,构建pGFP-C3-BTBD10重组表达质粒,转染HEK293细胞,利用激光共聚焦显微镜观察BTBD10在细胞中的定位。结果经双酶切和核酸序列分析证实重组质粒包含有正确编码的BTBD10读码框。激光共聚焦显微镜观察到空质粒pGFP-C3转染后,整个细胞内弥散绿色荧光,而转染pGFP-C3-BTBD10重组载体后,可见绿色荧光分布于HEK293细胞膜一侧的细胞浆中,提示BTBD10定位于细胞浆中。结论成功构建人BTBD10真核表达载体,BTBD10定位于哺乳细胞的细胞浆中,可能发挥蛋白之间的相互作用。
- 刘瑜王宣春陈凤玲李春霖胡仁明
- 关键词:真核表达转染