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山东省医药卫生科技发展计划项目(2007QZ019)
作品数:
5
被引量:9
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曹莉莉
时昌文
孙京杰
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作者
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孙京杰
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应用丙戊酸钠调节组蛋白乙酰化对肿瘤细胞周期相关蛋白的调控作用
被引量:2
2008年
目的探讨应用组蛋白脱乙酰酶抑制剂丙戊酸钠(VPA)调节染色体组蛋白低乙酰化修饰水平对肿瘤细胞增殖周期相关蛋白CyclinA、CyclinD1、CyclinE和P21^Waf/cip1。的调控作用。方法应用0.75—4.00mmol/LVPA干预肝癌细胞HepG2、胃癌细胞BGC-823、乳腺癌细胞MCF-748h后,PI标记流式细胞术检测细胞周期;间接免疫荧光法分析CyclinA、CyclinD1、CyclinE、P21^Waf/cip1。蛋白表达;RT—PCR检测分析CyclinA、CyclinD1、CyclinE、P21^Waf/cip1 mRNA表达。结果HepG2、BGC-823、MCF-7这3种细胞系培养48h后,流式细胞术分析可见0.75~4.00mmol/LVPA实验组随药物浓度的增加而出现逐渐递增的细胞增殖周期G1期阻滞趋势。HepG2、BGC-823细胞CyclinA蛋白及mRNA表达被明显下调;MCF-7细胞CyclinA蛋白及mRNA表达在两个浓度组均未见明显变化;CyclinD1蛋白及mRNA表达在3个细胞系均被明显下调;P21^Waf/cip1蛋白及mRNA表达在3个细胞均被明显上调;CyclinE蛋白及mRNA表达则未见明显变化。结论应用VPA干预组蛋白乙酰化修饰可对HepG2、BGC-823、MCF-7细胞Cyc—linD1、P21^Waf/cip1表达起明显的调控作用;对CyclinA的调控作用则随肿瘤细胞来源及表型的不同而有所差异,而对CyelinE则无明显的调控作用。在VPA诱导肿瘤细胞增殖周期G,期阻滞过程中,下调CyclinD1和上调P21^Waf/cip1蛋白及mRNA表达可能是其共同作用途径。
时昌文
赵霞
曹莉莉
孙京杰
李杰
关键词:
组蛋白
丙戊酸钠
细胞周期蛋白
应用VPA调节组蛋白乙酰化修饰抑制乳腺癌细胞增殖的实验研究
被引量:1
2008年
目的观察应用组蛋白脱乙酰酶抑制剂丙戊酸钠(VPA)调节染色体组蛋白低乙酰化水平对乳腺癌细胞增殖的作用,并进一步检测CyclinA、Cyclin D1、Cyclin E、P21^Walf/cipl蛋白及mRNA表达变化来探讨其分子作用机制。方法乳腺癌细胞系MCF-7细胞经0.75-4.0mmol/L VPA作用后,MTT法检测细胞生长抑制、PI标记流式细胞术检测细胞周期、间接免疫荧光法分析Cyclin A、Cyclin D1、Cyclin E、P21^Walf/cipl蛋白表达、RT-PCR检测分析Cyclin A、Cyclin D1、Cyclin E、P21^Walf/cipl mRNA表达。结果经0.75-4.0mmol/L VPA作用24、48、72、96h,试验组细胞生长抑制率逐渐升高,且呈时间、剂量依赖趋势;对照组细胞增殖周期G1、S、M期所占比例未见明显改变,而实验组则随药物浓度、作用时间的不同而出现不同程度的细胞增殖周期G1期阻滞,G1期比例由56.7%.78.9%不等,与对照组比较其升高差异有统计学意义(P〈0.01)。试验组P21^Walf/cipl蛋白、mRNA表达被明显上调、Cyclin D1蛋白及mRNA表达被明显下调,与对照组比较差异有统计学意义(P〈0.01);而Cyclin A、Cyclin E蛋白和mRNA表达则未见明显变化(P〉0.05)。结论通过应用组蛋白特异性脱乙酰酶抑制剂调节组蛋白乙酰化修饰可明显抑制乳腺癌细胞生长、诱导细胞增殖周期阻滞;丙戊酸钠作为组蛋白脱乙酰酶抑制剂可明显抑制乳腺癌细胞增殖,其作用机制是通过上调P21^Walf/cipl mRNA、蛋白表达,下调Cyclin D1 mRNA和蛋白表达分剐和/或协同实现。
时昌文
赵霞
孙京杰
曹莉莉
于振海
顾禾
关键词:
丙戊酸
组蛋白脱乙酰基酶类
乳腺肿瘤
细胞增殖
应用丙戊酸钠调节组蛋白乙酰化修饰抑制肝癌细胞增殖的作用及机制
被引量:4
2008年
目的观察应用组蛋白脱乙酰酶抑制剂丙戊酸钠调节染色体组蛋白低乙酰化水平对肝癌细胞增殖的作用,并进一步检测Cyctin A、Cyclin D1、Cyclin E、P21^Waf/cip1蛋白及mRNA表达变化,探讨其分子作用机制。方法应用0.75~4.0mmol/L丙戊酸钠作用于肝癌细胞系HepG2细胞后,MTT法检测细胞生长抑制、细胞克隆形成试验观察克隆形成率、碘化丙啶标记流式细胞术检测细胞周期、间接免疫荧光法分析Cyclin A、Cyclin D1、Cyclin E、P21^Waf/cip1蛋白表达,RT—PCR检测分析Cyclin A、Cyclin D1、Cyclin E、P21^Waf/cip1 mRNA表达。结果0.75~4.0mmol/L丙戊酸钠作用24、48、72、96h,观察组出现了时间-剂量依赖趋势的生长抑制,同时细胞克隆形成率显著降低,对照组细胞增殖周期G1、S、M期所占比例未见明显改变,而观察组则随药物浓度、作用时间的不同而出现不同程度的细胞增殖周期G1期阻滞,G1期比例由55.4%~82.8%不等,差异有统计学意义(P〈0.01)。观察组Cyclin A、Cyclin D1蛋白及mRNA表达均被明显下调而P21^Waf/cip1蛋白、mRNA表达则被明显上调,与对照组比较差异均有统计学意义(均P〈0.01);而Cyclin E蛋白和mRNA表达变化则未见明显差异(P〉0.05)。结论通过应用特异性组蛋白脱乙酰酶抑制剂调节组蛋白乙酰化修饰可明显抑制肝癌细胞生长、抑制细胞克隆形成、阻滞细胞增殖周期于G1期;丙戊酸钠作为组蛋白脱乙酰酶抑制剂可明显抑制肝癌细胞增殖,其作用机制是通过上调P21^Waf/cip1 mRNA蛋白表达,下调Cyclin D1、Cyclin A mRNA蛋白表达分别和/或协同实现。
时昌文
赵霞
李杰
于振海
孙京杰
曹莉莉
关键词:
肝肿瘤
丙戊酸钠
丙戊酸钠调节组蛋白乙酰化对肝癌细胞浸润转移影响的研究
被引量:2
2009年
目的:探讨应用组蛋白脱乙酰酶(histone deacetyiase,HDAC)抑制剂丙戊酸钠(valproateacid sodium,VPA)调节组蛋白乙酰化水平对肝细胞性肝癌细胞侵袭、迁移能力的影响及其可能作用机制。方法:采用肿瘤细胞体外迁移实验和Transwell小室体外侵袭模型评价HDAC抑制剂VPA对HepG2细胞浸润转移能力的影响。进一步应用间接免疫荧光技术检测HepG2细胞MMP-2、MMP-9蛋白表达来探讨其作用机制。结果:细胞培养24h后,对照组迁移细胞数目较多,为(142±16.5)个,而(0.75~4.0)mmol/L。VPA试验组细胞迁移数目随药物浓度升高而逐渐由(125±12.4)个减少(42±6.1)个,差异有统计学意义,P〈0.001;对照组穿过聚碳酯膜细胞数目(85±7.8)个,明显高于药物实验组(69±6.9~18±3.6)个,差异有统计学意义,P〈0.001;与对照组比较,试验组MMP2、MMP-9蛋白表达被明显下调,并且与肿瘤细胞迁移、侵袭的变化密切相关。结论:应用HDAc抑制剂逆转染色体组蛋白低乙酰化水平可显著抑制肝癌细胞侵袭转移,下调MMP-2和MMP-9表达可能是其发挥作用的主要机制之一。
赵霞
时昌文
汪运山
孙京杰
曹莉莉
李杰
于振海
关键词:
肝肿瘤
肝癌细胞系
丙戊酸钠
金属基质蛋白酶
调节组蛋白乙酰化修饰对肝癌细胞浸润转移的影响
2008年
目的 探讨应用组蛋白脱乙酰酶抑制剂VIA调节组蛋白乙酰化水平对肝细胞性肝癌细胞侵袭、迁移能力的影响及其可能作用机制.方法 采用肿瘤细胞体外迁移实验和Tanswell小室体外侵袭模型评价组蛋白脱乙酰酶抑制剂丙戊酸钠对HepG2细胞浸润转移能力的影响.进一步应用间接免疫荧光技术检测HepG2细胞中MMP-2、MMP-9的表达来探讨其作用机制.结果 细胞培养24小时后,对照组迁移细胞数目较多,而0.75-4.0mmol/L丙戊酸钠试验组细胞迁移数目随药物浓度升高而逐渐减少(P<0.001);对照组穿过聚碳酯膜细胞数目明显高于药物实验组,差异具有显著意义(P<0.001);与对照组比较,试验组MMP-2、MMP-9蛋白表达被明显下调,并且与肿瘤细胞迁移、侵袭的变化密切相关.结论 应用组蛋白脱乙酰酶抑制剂逆转染色体组蛋白低乙酰化水平可显著抑制肝癌细胞侵袭转移,下调金属基质蛋白酶(MMP-2、MMP-9)表达可能是其发挥作用的主要机制之一.
时昌文
汪运山
曹莉莉
孙京杰
关键词:
肝肿瘤
肝癌细胞系
丙戊酸
金属基质蛋白酶
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