国家自然科学基金(81060083)
- 作品数：13 被引量：15H指数：3
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- 快速老化小鼠听功能及耳蜗组织神经生长因子受体p75的增龄性变化
- 2014年
- 目的探讨快速老化小鼠的听功能及耳蜗组织神经生长因子受体p75(nerve growth factor receptor p75,NGFR p75)表达的增龄性变化特点。方法对3、5、7月龄的快速老化小鼠亚系8(SAMP8小鼠)行8kHz短纯音听性脑干反应(ABR)检测,并用免疫组化染色方法检测耳蜗组织NGFR p75的表达,观察随月龄的增长其ABR反应阈和NGFR p75的表达变化。结果 SAMP8小鼠ABR反应阈值随着月龄增加而显著增高(P<0.05);NGFR p75在不同月龄SAMP8小鼠耳蜗螺旋神经节和毛细胞中均有表达,其光密度值随着月龄增加而显著增高(P<0.05)。结论快速老化小鼠NGFR p75的表达水平随着听觉功能的年龄相关性减退而增高,说明NGFR p75可能与耳蜗功能增龄性退化有关。
- 王杰刘强和王翔张红佳
- 关键词：快速老化小鼠耳蜗听性脑干反应
- 神经生长因子与老年性耳聋基因治疗研究进展
- 2011年
- 据流行病学调查，老年性耳聋在55～64岁人群中发病率为10．1％，在65～74岁人群中增加至26．2％，严重影响老年人的身心健康，造成其生活质量下降。虽然临床上老年性耳聋的治疗方法很多，如应用扩张血管药物改善微循环、大剂量补充维生素、应用激素等，但这些方法都不能取得令人满意的疗效。佩戴助听器及电子耳蜗移植也可治疗老年性耳聋，但其疗效直接取决于存活的螺旋神经节细胞数量。目前，基因治疗已被应用于耳聋的治疗，其可能为老年性耳聋的治疗带来新希望。
- 王永宝刘强和
- 关键词：老年耳聋神经生长因子基因治疗
- 人β-NGF重组质粒转染GFP转基因小鼠BMSC的实验研究被引量：2
- 2014年
- 目的观察携带有人β神经生长因子(β-NGF)重组质粒的骨髓基质干细胞(BMSC)的生物学特性。方法培养小鼠BMSC,采用脂质体LipofectamineTM2000(Lip2000)转染方法将含有人β-NGF基因的重组质粒转染至含有绿色荧光蛋白(GFP)基因的小鼠BMSC中,利用酶联免疫吸附测定(ELISA)的方法检测其β-NGF蛋白的表达水平。结果采用脂质体Lip2000转染方法能成功地将β-NGF重组质粒转染至BMSC,转染后细胞出现β-NGF基因的表达,并且其表达的β-NGF蛋白能有效地保护转染过程中对细胞的损害。结论经转染后携带β-NGF基因质粒的小鼠BMSC仍有增殖、分化能力,并且具有了β-NGF蛋白的表达能力。
- 刘强和王亮亮王翔王永宝黄鑫邓铭刘芳贤
- 关键词：神经生长因子绿色荧光蛋白质类LIPOFECTAMINE转染骨髓基质干细胞
- p-ERK5在快速衰老小鼠耳蜗血管纹中的增龄性变化
- 2017年
- 目的探讨快速衰老小鼠耳蜗血管纹中磷酸化的细胞外信号调节激酶5(phosphorylated extracellular signal-regulated kinase 5,p-ERK5)表达的增龄性变化。方法选用3、5、7月龄的快速衰老小鼠亚系8(senescence accelerated mouse,SAMP8)各6只,分别进行8k Hz短纯音听性脑干反应(ABR)检测,并用免疫组化染色方法分别检测各月龄组小鼠耳蜗血管纹细胞中p-ERK5的表达,分析其增龄性变化。结果 3、5、7月龄小鼠耳蜗血管纹细胞中p-ERK5平均光密度值分别为0.3838±0.0020、0.3646±0.0010、0.3423±0.0036;p-ERK5在不同月龄快速衰老小鼠耳蜗组织中的表达光密度值随着月龄增加而显著降低(P<0.05)。结论随着年龄相关性功能减退,快速衰老小鼠耳蜗血管纹中p-ERK5的表达水平逐渐降低,推测p-ERK5可能与维持正常的耳蜗功能及听觉有关。
- 祝涵刘强和张红佳
- 关键词：耳蜗血管纹
- 骨髓基质干细胞转染后神经生长因子及其受体p75的表达
- 2014年
- 目的为应用神经生长因子(NGF)修饰的骨髓基质干细胞(BMSC)进行耳蜗移植治疗老年性耳聋的实验研究提供支持。方法采用脂质体LipofectamineTM2000方法进行骨髓基质干细胞转染,共分为4组:A组:脂质体包裹的重组质粒转染组;B组:脂质体转染组;C组:脂质体包裹的空质粒转染组;D组:用含10%胎牛血清的DMEM F12培养液培养。免疫组化检测各组转染后神经生长因子和神经生长因子受体p75的表达。结果各转染组细胞均有NGF、受体p75表达,且均以胞浆表达为主;图像分析显示,重组质粒组NGF表达的平均光密度值明显高于其余3组,重组质粒组受体p75表达的平均光密度值明显低于其余3组。结论采用脂质体LipofectamineTM2000转染方法能成功将含有NGF的重组质粒转染至BMSC,为我们进一步应用NGF修饰的BMSC进行耳蜗移植治疗老年性耳聋的实验研究提供理论基础。
- 王杰刘强和王翔
- 关键词：神经生长因子神经生长因子受体P75骨髓基质干细胞转染
- 骨髓基质干细胞及其在内耳移植中的应用
- 2014年
- 骨髓包括造血系统和基质系统，骨髓基质干细胞（bonemarrowstromalstemcells，BMSC）是来源于基质系统并且具有多向分化能力的一类细胞。Friendenstein于1968年首先利用贴壁培养法分离获得BMSC，并对其分化能力进行了研究[1]。
- 王杰刘强和
- 关键词：骨髓基质干细胞内耳造血系统分化能力BMSC培养法
- 快速老化小鼠耳蜗组织神经生长因子的增龄性变化被引量：6
- 2011年
- 目的探讨快速老化小鼠听觉功能、以及耳蜗组织中神经生长因子(NGF)的增龄性变化。方法该研究选3、5、7、9月龄的快速老化小鼠亚系8(SAMP 8)作为观察对象。应用听觉诱发反应仪检测其8 kHz短纯音听觉脑干反应阈值;应用RT-PCR和Western印迹杂交对耳蜗组织中NGF mRNA和蛋白的表达水平进行半定量分析。结果 SAMP 8脑干反应阈值随着月龄增加而显著增高(P<0.05);NGF mRNA和蛋白在不同月龄快速老化小鼠耳蜗组织中均有表达,SAMP 8耳蜗组织中的NGF mRNA和蛋白随着月龄增加而显著降低(P<0.05)。结论 NGF mRNA和蛋白的表达水平随着快速老化小鼠听觉功能增龄性减退而降低,说明NGF可能与维持耳蜗的功能状态有关。
- 刘强和黄鑫王永宝王亮亮刘仕刘芳贤邓铭
- 关键词：快速老化小鼠耳蜗神经生长因子
- 骨髓基质干细胞移植与老年性耳聋的相关性研究被引量：3
- 2013年
- 老年性耳聋是伴随年龄老化（一般发生在60岁以上）而发生的听觉系统退行性变导致的耳聋,主要为感音神经性聋,它的发生与耳部微血管退化、耳蜗病变、听觉神经元、听觉中枢、听觉传入传出神经通路及全身机能退化密切相关,但是,
- 王亮亮刘强和
- 关键词：老年耳聋骨髓基质干细胞
- 快速老化小鼠听功能及耳蜗组织神经生长因子受体酪氨酸激酶受体A的增龄性变化被引量：2
- 2014年
- 目的:探讨快速老化小鼠听觉功能以及耳蜗组织中神经生长因子受体酪氨酸激酶受体A(nerve growth factor receptor TrkA,NGFR TrkA)表达的增龄性变化。方法 :选用3、5、7月龄的快速老化小鼠亚系8(SAMP8)作为观察对象。应用听觉诱发反应仪检测其8 kHz短纯音听觉脑干反应阈值;应用NGFR TrkA免疫组化染色检测其耳蜗组织染色光密度进行分析。结果:SAMP8听性脑干反应阈值随着月龄增加而显著增高(P<0.05);NGFR TrkA蛋白在不同月龄快速老化小鼠耳蜗组织中均有表达,SAMP8耳蜗组织中的NGFR TrkA蛋白染色光密度随着月龄增加而显著降低(P<0.05)。结论:NGFR TrkA蛋白的表达水平随着快速老化小鼠听觉功能增龄性减退而降低,说明NGFR TrkA可能与维持耳蜗的功能状态有关。
- 王翔刘强和王杰
- 关键词：快速老化小鼠耳蜗TRKA
- 神经生长因子在小鼠耳蜗中的表达分布及年龄相关性变化被引量：6
- 2012年
- 目的探讨神经生长因子(NGF)在小鼠耳蜗中的表达分布与年龄的相关性变化。方法选取5、7月龄的快速老化小鼠亚系8(SAMP8)作为实验组,而同龄抗快速老化小鼠亚系1(SAMR1)作为对照组。分别观察其耳蜗中NGF免疫组化染色及增龄性变化情况。结果在小鼠耳蜗中,NGF在螺旋神经节细胞、内外毛细胞、听神经纤维及血管纹中均有表达,且螺旋神经节细胞及内外毛细胞为主要表达部位。耳蜗螺旋神经节细胞及内外毛细胞NGF免疫组化染色平均光密度值:NGF蛋白在不同月龄快速老化小鼠耳蜗组织中螺旋神经节细胞及毛细胞均有表达,第5、7月龄SAMP8小鼠耳蜗螺旋神经节细胞及毛细胞中的NGF蛋白表达较同龄SAMR1小鼠明显降低(P<0.05)。结论 NGF蛋白在小鼠耳蜗中有表达并且表达水平随着小鼠年龄增长而降低,说明NGF蛋白可能与维持耳蜗的功能状态有关。
- 刘强和王永宝王亮亮黄鑫刘芳贤邓铭
- 关键词：神经生长因子耳蜗螺旋神经节细胞毛细胞快速老化小鼠
