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国家自然科学基金(30672510)

作品数:3 被引量:12H指数:2
相关作者:杜军蔡绍晖陈宏远方瑞衣艳梅更多>>
相关机构:中山大学暨南大学广东药学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
相关领域:生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 2篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 2篇蛋白
  • 2篇细胞
  • 2篇细胞激活
  • 2篇纤维细胞
  • 2篇激活蛋白
  • 2篇成纤维细胞
  • 2篇成纤维细胞激...
  • 1篇原核
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
  • 1篇生物活性
  • 1篇生物活性检测
  • 1篇鼠成纤维细胞
  • 1篇突变体
  • 1篇缺失突变体
  • 1篇肿瘤
  • 1篇肿瘤相关
  • 1篇肿瘤相关成纤...
  • 1篇肽链内切酶
  • 1篇肽酶

机构

  • 3篇中山大学
  • 2篇暨南大学
  • 1篇广东药学院

作者

  • 3篇杜军
  • 2篇蔡绍晖
  • 1篇方瑞
  • 1篇傅刘鹏
  • 1篇李小青
  • 1篇江冠民
  • 1篇邱胜红
  • 1篇黄思超
  • 1篇刘鹏
  • 1篇王震
  • 1篇衣艳梅
  • 1篇陈宏远
  • 1篇徐俊
  • 1篇马锦珊

传媒

  • 1篇生物技术通报
  • 1篇中国生物工程...
  • 1篇中华肿瘤防治...

年份

  • 2篇2009
  • 1篇2008
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
成纤维细胞激活蛋白α与肿瘤的靶向治疗被引量:8
2008年
成纤维细胞激活蛋白α(FAPα)是肿瘤相关成纤维细胞特异性表达的一种表面抗原,具有二肽基肽酶和胶原酶活性,在肿瘤的生长、浸润、转移中发挥重要作用。故以FAPα作为肿瘤基质标志物的病理诊断、肿瘤基因治疗或免疫治疗将成为可能。就近年来对FAPα结构特点、活性作用及在肿瘤诊治中的研究进展进行综述。
方瑞杜军陈宏远蔡绍晖
关键词:肿瘤相关成纤维细胞肽链内切酶靶向治疗
小鼠成纤维细胞激活蛋白α二肽基肽酶核心序列原核表达与纯化及复性被引量:4
2009年
目的:构建小鼠成纤维细胞激活蛋白α(FAPα)二肽基肽酶催化核心序列(FAPαc)的高效原核表达载体,进行该序列的原核表达、纯化和复性,为下一步高效抗体制作和以FAPα为靶标的抗肿瘤疫苗研发提供实验基础。方法:用PCR技术,从质粒pSecTag2/Hy-groB-FAPα中扩增出编码FAPα二肽基肽酶催化核心区域的基因片段,与原核表达载体pET28α(+)连接,在BL21(DE3)工程菌中实现重组蛋白His6-FAPαc的表达,并进行纯化和复性。结果:成功构建了小鼠来源的FAPα二肽基肽酶催化核心区域的原核表达质粒,通过对转化该质粒后的感受态细菌进行菌液PCR鉴定以及对该质粒进行BamHI和XhoI双酶切鉴定,鉴定结果与预期结果完全一致;实现了对该质粒编码的融合蛋白His6-FAPαc的表达,表达后的融合蛋白主要以包涵体的形式存在,表达产量占菌体总蛋白>70%;纯化了该融合蛋白,纯化后的蛋白纯度通过灰度分析>99%;对该融合蛋白进行了复性,复性后该融合蛋白由不溶的包涵体状态变为可溶的水溶状态。结论:成功表达、纯化和复性了FAPα二肽酶催化核心区域FAPαc,为深入开展FAPα的研究奠定基础。
江冠民刘鹏李小青王震衣艳梅杜军
关键词:复性
IκBα缺失突变体真核表达载体的构建、表达及其生物活性检测
2009年
旨在构建缺失N端前36个氨基酸的IκBα突变体真核表达载体,并对其表达及生物学活性进行检测。从人源子宫颈癌细胞HeLa中提取总RNA,利用RT-PCR的方法获得IκBα缺失突变体的cDNA,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1/myc-HisA中,构建重组载体pcDNA3.1-IκBαΔN。通过PCR方法、NcoⅠ酶切以及核酸测序分析对其进行鉴定;采用WesternBlot检测IκBα缺失突变体蛋白在HeLa细胞中的表达。将pcDNA3.1-IκBαΔN和pNF-κB-Luc共转染HeLa细胞,经TNF-α诱导后,利用萤光素酶报告系统来检测重组载体对NF-αB的抑制活性。结果表明,经PCR方法、NcoⅠ酶切鉴定及核酸测序分析后,证实成功构建了重组载体pcDNA3.1-IκBαΔN;IκBα缺失突变体蛋白在HeLa细胞中高效表达,并对NF-κB有显著的抑制活性(P<0.01)。因此,真核表达载体pcDNA3.1-IκBαΔN构建成功,为一步研究NF-κB信号传导通路及其相关疾病提供有效的分子工具。
黄思超杜军邱胜红徐俊傅刘鹏马锦珊蔡绍晖
关键词:IΚBΑ缺失突变体NF-ΚB
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