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HBV S基因反义锁核酸抑制病毒体外复制被引量：12: 2010年; 目的探讨乙型肝炎病毒S基因反义锁核酸(LNA)片段在HepG22.2.15细胞内的抗病毒效果及有效LNA片段筛选。方法设计合成互补于HBVS基因mRNA翻译起始区同一位点的4条不同序列长度LNA片段,以阳离子脂质体介导,作用于HepG22.2.15细胞株,采用ELISA法和实时荧光定量聚合酶链技术(FQ-PCR)分别监测24、48和72 h细胞培养上清液中HBsAg和HBV DNA的含量;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法监测细胞代谢。结果4条不同序列长度反义LNA均显著抑制HBsAg表达和HBVDNA复制,72 h后最高抑制率分别达72.43%和34.73%。HBsAg分泌量和HBV DNA的拷贝数均明显低于对照组(P<0.01)。LNA对细胞代谢无明显影响。结论针对HBVS基因mRNA翻译起始区的反义LNA片段体外能显著抑制HBV表达,且抑制作用最强序列长度在15～25个碱基之间。; 邓益斌张梁王燕菲; 关键词：锁核酸 HEPG2 2.2.15细胞阳离子脂质体

阳离子脂质体介导pEGFP-N1转染HepG2.2.15细胞效率初探被引量：2: 2012年; 目的探讨阳离子脂质体介导绿色荧光蛋白质粒转染HepG2.2.15细胞的转染效率。方法以阳离子脂质体包裹绿色荧光蛋白质粒转染HepG2.2.15细胞,观察不同配比的脂质体与绿色荧光蛋白的转染率。结果对照组未见绿色荧光蛋白表达,各实验组HepG2.2.15细胞均可见绿色荧光蛋白表达,表达量随脂质体浓度增加而增加(P<0.05),最高转染率为23.22%。结论阳离子脂质体能有效地介导绿色荧光蛋白质粒转染HepG2.2.15细胞。; 朱晓莹王燕菲; 关键词：阳离子脂质体 HEPG2.2.15细胞转染效率

乙型肝炎病毒S／C基因位点反义锁核酸在小鼠体内抗病毒疗效研究被引量：7: 2009年; 目的探讨针对HBV S／C双基因位点反义锁核酸对乙型肝炎转基因小鼠HBV复制和表达的影响。方法将30只HBV转基因小鼠随机分为5组，每组6只。分别为5％葡萄糖液对照组、空脂质体对照组、单靶区S组、单靶区C组、双靶区SC组。反义锁核酸片段经尾静脉注入小鼠体内，采用时间分辨免疫荧光技术定量检测血清HBsAg；实时荧光聚合酶链反应定量检测血清HBV DNA含量；逆转录聚合酶链反应检测肝组织HBV C-mRNA的表达；免疫组织化学法检测肝细胞HBsAg、HBcAg的表达；自动生物化学分析仪检测血清白蛋白、ALT、尿素氮、肌酐；小鼠肝、肾脏做常规病理切片，观察反义锁核酸对小鼠脏器的影响。应用SPSS12．0统计学软件分析。各组间比较采用重复测量方差分析的SNK检验和Kruskat Wallis H检验。结果注射锁核酸后，对HBsAg的表达均显示有较强的抑制作用，单靶区S组、单靶区C组和双靶区SC组的平均抑制率分别为36．6％、31．5％和54．9％；对HBV DNA的复制也有抑制作用，平均抑制率分别为24．0％、21．1％和35．8％。注射后l、3、5d，HBsAg的平均抑制率分别为14．4％、25．6％和31．3％；HBV DNA的平均抑制率分别为11．0％、19．2％和24．1％；血清中自蛋白、ALT、尿素氮、肌酐等指标，各组结果与对照组比较，差异均无统计学意义；小鼠肝细胞的HBsAg，HBcAg阳性细胞数均较对照组明显减少。小鼠肝、肾脏组织学表现未见异常。结论HBV S／C基因位点反义锁核酸对乙型肝炎病毒转基因鼠HBV复制和表达有显著抑制作用，且双基因靶位优于单基因靶位。; 邓益斌农乐根黄炜潘国刚王燕菲; 关键词：脂质体

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广州市科技攻关项目(2002Z3-E4081)

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