国家自然科学基金(39970836) 作品数:13 被引量:42 H指数:3 相关作者: 刘柏林 屈艺 刘菽秋 李熙鸿 王晓阳 更多>> 相关机构: 四川大学 华西第二医院 四川大学华西医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 四川省卫生厅科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
急性白血病患儿hTERT基因的表达 被引量:2 2003年 目的 探讨人类端粒酶逆转录酶 ( h TERT)基因表达与儿童急性白血病 ( AL)的关系和临床意义。方法 采用逆转录 -聚合酶链反应 ( RT- PCR)方法检测 K5 62白血病细胞株、40例急性白血病患儿和 10例正常对照的 h TERT基因表达。结果 K5 62白血病细胞株、3 0例急性淋巴细胞白血病 ( AL L)患者中 2 3例、10例急性髓系细胞白血病 ( AML)患者中 7例有 h TERT基因表达。h TERT基因表达见于 AL 所有亚型 ,其相对表达水平与 AL 的完全缓解 ( CR)率有相关性 ,相对表达水平≥ 1.0的患儿 CR率低及生存期短。结论 h TERT基因表达与儿童急性白血病发生有关 ,h TERT基因高表达的患者 CR率低、无病生存期短 ,h 李熙鸿 王晓阳 李馨筱 刘柏林 张燕 廖清奎关键词:急性白血病 患儿 HTERT基因 RT-PCR CD_(34)^+儿童急性淋巴细胞白血病人类端粒酶逆转录酶基因表达的研究 被引量:10 2005年 目的探讨人类端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetranscriptase,hTERT)基因表达与CD34+儿童急性淋巴细胞白血病的关系和临床意义。方法采集42例ALL患儿骨髓标本,分别进行细胞形态学及细胞化学染色,确定其FAB类型,运用一组相关的单克隆抗体,采用流式细胞术及直接免疫荧光标记技术进行免疫分型,采用吉姆萨G显带技术进行核型分析;同时,采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测其外周血hTERT表达水平。结果儿童急性淋巴细胞白血病CD34+表达阳性率52.38%(22/42),CD34+髓系抗原表达阳性率高CD34-;CD34+的ALLhTERT-mRNA表达水平高于CD34-的ALL,而正常对照组无或低表达。结论CD34+儿童急性淋巴细胞白血病hTERT-mRNA表达上调;hTERT基因表达参与了儿童急性淋巴细胞白血病的发生发展。 李熙鸿 王晓阳 熊珍玉 汪凤兰 刘柏林 张燕关键词:淋巴细胞 端粒酶 人类端粒酶逆转录酶 免疫分型 儿童 端粒酶催化亚单位表达与急性淋巴细胞白血病预后的关系 被引量:2 2002年 李熙鸿 汪凤兰 张艳 刘柏林 廖清奎 贾苍松 王晓阳关键词:端粒酶 催化 亚单位表达 急性淋巴细胞白血病 预后 急性白血病端粒酶逆转录酶基因表达的初步分析 被引量:2 2003年 目的 初步探讨白血病端粒酶逆转录酶 (human telomerase reverse transcriptase,h TERT)基因表达与白血病临床特征的关系。方法应用逆转录 - PCR扩增法 ,检测白血病患者和正常人外周血样中h TERT m RNA的表达 ,并进行半定量分析。结果 4 2例初治白血病血样中 ,h TERT m RNA表达阳性率73.81% ,表达水平 0 .6 4± 0 .2 1。 2 1例完全缓解组中 ,h TERT m RNA表达阳性率 19.0 5 % ,表达水平 0 .31± 0 .16。 4例复发病例均呈 h TERT m RNA阳性表达 ,表达水平 0 .84± 0 .0 9。 5名正常人血样中 ,有 1人呈现 h TERT m RNA低水平表达 ,表达水平 0 .10。结论 h TERT表达异常与白血病的发生发展密切相关 ,可作为白血病细胞的标志物用于白血病临床分析、病情监测。 张艳 刘菽秋 屈艺 李熙鸿 汪凤兰 董薇 刘柏林关键词:急性白血病 端粒酶逆转录酶 基因表达 人端粒酶逆转录酶核酶抑制端粒酶活性的实验研究 被引量:2 2002年 为有效切割端粒酶逆转录酶mRNA以抑制端粒酶活性,设计合成了针对端粒酶逆转录酶mRNA的核酶基因hterl RZ及htert-5'RZ,构建了核酶基因的体外转录和真核表达质粒。将核酶转染至肿瘤细胞中,均能抑制端粒酶活性。核酶htert RZ稳定转染细胞后,使细胞倍增时间延长,但无明显细胞凋亡。因而,二种核酶可望成为有效的端粒酶抑制剂,用于抑制肿瘤生长。 屈艺 刘菽秋 彭文珍 刘柏林关键词:核酶 端粒酶 人端粒酶逆转录酶 肿瘤 酶活性 端粒酶逆转录酶核酶hTERT-5′RZ抑制HeLa细胞端粒酶活性的实验研究 被引量:9 2002年 目的 有效抑制肿瘤细胞端粒酶活性 ,为肿瘤的基因治疗提供依据。方法 设计合成了针对端粒酶逆转录酶 m RNA5′端区的锤头状核酶 (5′- end of human telomerase reverse trascriptase m RNA,h TERT- 5′RZ)基因 ,并将该基因重组入 pc DNA3.1(+) ,经体外转录得到小片段 h TERT- 5′RZ。用脂质体介导法 ,将 h TERT- 5′RZ导入 He L a细胞以检测其对 He L a细胞端粒酶活性的抑制效力。同时比较了同法合成的针对端粒酶 RNA模板的核酶 (telomerase m RNA,telo RZ)和两种核酶混合物对 He L a细胞端粒酶活性的抑制效力。结果 小片段 h TERT- 5′RZ能有效抑制 He L a细胞端粒酶活性 ,且其抑制效力较单纯telo RZ为高 ,两种核酶混合物的端粒酶抑制效力与 h TERT- 5′RZ相当 ,也高于单纯 telo RZ。结论 小片段核酶 h TERT- 5′RZ可望成为优于 telo RZ的端粒酶抑制剂 ,在肿瘤基因治疗中发挥作用。 屈艺 刘菽秋 刘柏林关键词:端粒酶 端粒酶逆转录酶 HELA细胞 核酶 人端粒酶逆转录酶核酶抑制端粒酶活性的实验研究 被引量:1 2002年 目的 为有效地切割端粒酶逆转录酶mRNA以降低端粒酶活性 ,从而使肿瘤细胞生长变慢 ,凋亡增加 .方法 设计并合成了 2个针对端粒酶逆转录酶mRNA的锤头状核酶基因htertRZ及htert 5’RZ ,构建了核酶基因的体外转录和真核表达质粒 ;并将核酶转染致肿瘤细胞中 ,检测其对肿瘤细胞端粒酶活性和生物学性状的影响 .结果 2种核酶在细胞内均能明显地抑制端粒酶活性 ;核酶htertRZ稳定转染细胞后 ,使细胞生长变慢 ,倍增时间延长 ,但无明显促细胞凋亡作用 .结论 2种核酶可望成为有效的端粒酶抑制剂 ,在抑制肿瘤生长中发挥作用 . 屈艺 刘菽秋 彭文珍 刘柏林关键词:核酶 端粒酶 人端粒酶逆转录酶 肿瘤 K562、HL-60细胞端粒酶催化亚单位的表达 被引量:1 2001年 目的 探讨RT PCR法分析肿瘤细胞人端粒酶逆转录酶 (hTERT) mRNA表达水平的临床应用价值。方法 以 β actin为内对照 ,采用RT PCR法测定K5 6 2、HL 6 0细胞及正常人外周血的hTERT mRNA表达水平。结果 K5 6 2、HL 6 0细胞hTERT表现出高的表达水平 ,相反 ,正常人外周血无或低表达。结论 RT PCR分析hTERT mRNA表达的方法具有特异性、敏感性高 ,易定量 ,操作简单 ,快速等特点 。 李熙鸿 王晓阳 汪凤兰 张燕 刘柏林 贾苍松 廖清奎关键词:端粒酶 人端粒酶逆转录酶 逆转录-聚合酶链反应 K562 HL-60 hTERT基因表达上调与儿童急性淋巴细胞白血病髓系抗原表达的关系 被引量:1 2006年 目的探讨人类端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达上调与儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)髓系抗原表达的关系。方法采集42例ALL患儿的骨髓标本,分别进行细胞形态学及细胞化学染色,确定其FAB类型,运用一组相关的单克隆抗体,采用流式细胞仪及直接免疫荧光标记技术进行免疫分型,采用吉姆萨G显带技术进行核型分析;同时,采用半定量RT-PCR方法检测其外周血hTERT的表达水平。结果儿童ALL髓系抗原表达阳性率26.19%,髓系抗原表达的ALLhTERT-mRNA表达水平高于无髓系抗原表达的ALL,而正常对照组无或低表达hTERT-mRNA。结论伴髓系抗原表达的儿童急性淋巴细胞白血病hTERT-mRNA表达上调。 李熙鸿 王晓阳 熊珍玉 刘柏林 张燕关键词:HTERT 免疫分型 儿童 急性淋巴细胞白血病 急性淋巴细胞白血病端粒酶催化亚单位表达的检测及其应用 被引量:1 2002年 李熙鸿 汪凤兰 王晓阳 刘柏林 贾苍松 廖清奎 符仁义关键词:急性淋巴细胞白血病 端粒酶催化亚单位 RT-PCR