江苏省普通高校研究生科研创新计划项目(CXLX110999)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
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- 甲型H1N1流感病毒HA基因与沙门菌fljB基因的融合表达与鉴定被引量：2
- 2012年
- 目的研发基于鞭毛蛋白的新型甲型H1N1流感疫苗。方法分别以鼠伤寒沙门菌SL7202基因组和含有甲型H1N1流感病毒HA基因的重组质粒pET-HA为模板,通过PCR扩增Ⅱ相鞭毛蛋白fljB和HA1-2基因,再通过overlapPCR将这两基因片段拼接成HA1-2-fljB,将其插入原核表达质粒pET30a(+),构建重组质粒pET-HA1-2-fljB,并转化表达宿主菌E.coli BL21(DE3)中,以IPTG诱导表达。SDS-PAGE和Western blotting鉴定融合蛋白HA1-2-fljB的表达。结果正确构建出重组质粒pET-HA1-2-fljB,SDS-PAGE和Western blotting结果显示,融合蛋白分子量约84kD,并具有良好的免疫反应性,能强烈诱导HEK293-mTLR5细胞分泌IL-8。结论成功表达具有TLR5生物学活性的融合蛋白HA1-2-fljB,为研究甲型H1N1流感疫苗奠定了基础。
- 杨芸潘志明马全刚张磊康喜龙耿士忠焦新安
- 关键词：鞭毛蛋白血凝素原核表达
