国家自然科学基金(301707087)
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- 猪蛔虫重组融合蛋白As37的免疫原性分析及应用
- 2009年
- 研究表明,猪蛔虫三期幼虫、分泌排泄物等天然抗原对宿主能提供有效的免疫保护,一些猪蛔虫融合大肠杆菌重组表达蛋白也可作为防控猪蛔虫病的候选疫苗。作者已克隆了猪蛔虫rAs37基因并进行了原核表达,并通过对重组融合蛋白As37进行免疫原性分析,显示其具有良好的免疫学活性。在此基础上进行了动物免疫保护性试验,并利用大肠杆菌高效表达的重组蛋白,建立ELISA方法对血清抗体水平进行了检测,为开发蛔虫疫苗,进一步有效防治猪蛔虫及研究猪蛔虫的免疫学诊断方法打下了基础。
- 冯汉利周艳琴姚宝安赵俊龙陈建军曾宪东王振华赵晖
- 关键词：猪蛔虫免疫原性酶联免疫吸附试验
- 猪蛔虫rAs37基因的克隆及原核表达
- 2009年
- 根据编码rAs37的已知基因序列设计并合成1对引物,应用PCR技术从猪蛔虫感染性虫卵的cDNA中扩增编码rAs37的部分基因,克隆入pGEX-KG表达载体,转化入E.coliDH5α感受态细胞,经含氨苄青霉素琼脂平板筛选,小量抽提质粒进行酶切、PCR及DNA测序鉴定。然后阳性重组质粒转化入E.coliBL21-CodonPlus,IPTG诱导,表达产物经SDS-PAGE和Western-blot分析鉴定。结果显示,扩增的rAs37基因与GenBank中相应基因序列(AB078971)的同源性达100%,表达的rAs37融合蛋白表观相对分子质量约为60 000,且可被兔抗猪蛔虫免疫血清识别。说明所获得的表达蛋白质具有一定的反应原性,为下一步利用重组蛋白建立猪蛔虫早期诊断方法和研制猪蛔虫的亚单位疫苗奠定了基础。
- 周艳琴冯汉利聂浩姚宝安赵俊龙孙明喻子牛
- 关键词：猪蛔虫基因克隆
