国际科技合作与交流专项项目(2009DFA31950)
- 作品数：7 被引量：73H指数：5
- 相关作者：安榆林杨晓军常虹钱路郝德君更多>>
- 相关机构：江苏出入境检验检疫局南京林业大学江阴出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家质检总局科技计划项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 栎枯萎病菌与栎树疫霉猝死病菌的多重PCR检测方法
- 2010年
- 根据实验室设计的栎枯萎病菌的特异性引物CF01/CF02和2004年Hayden等设计的栎树疫霉猝死病菌特异性引物Phyto1/Phyto4,组合并优化出了可以同时检测2种病原菌的多重PCR检测体系,经PCR扩增可以分别得到687bp和280bp两条特异性条带,利用菌丝DNA检测,灵敏度为10pg基因组DNA。
- 吴翠萍陈贯源李彬粟寒安榆林
- 关键词：分子检测多重PCR
- 基于线粒体COⅠ基因的齿小蠹属昆虫DNA条形码研究被引量：31
- 2012年
- 齿小蠹属(鞘翅目:小蠹科)昆虫是植物检疫中经常截获的类群,为探讨线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因的特定区段作为DNA条形码快速准确鉴定齿小蠹种类的可行性,以齿小蠹属昆虫为研究对象,测定分析了线粒体COⅠ基因462bp碱基序列。序列分析结果显示:变异位点为259个,保守位点203个,简约信息位点181个,自裔位点78个。所有位点中,A,G,C和T碱基平均含量分别为30.7%,16.5%,17.0%和35.8%。A+T含量较高,为66.5%,明显高于G+C含量,表现明显的A+T碱基偏嗜,且A与T含量相当,符合昆虫线粒体基因碱基组成的基本特征。转换与颠换结果显示:该段序列未达到饱和,可以得到准确的进化分析。利用Kimura2-parameter模型分析遗传距离得到,同物种间的遗传距离介于0.002～0.007之间,不同种间的遗传距离介于0.056～0.431间,平均遗传距离为0.199,说明该段序列能够区分不同物种。基于COⅠ基因序列构建的邻接法系统发育树(NJ树)显示,同一物种聚为同一小支,且分支自展值均为100%;近缘种能聚集在一起,且置信度很高(≥97%)。结果表明应用基于COⅠ基因片段的DNA条形码进行齿小蠹属昆虫分类鉴定具有可行性。
- 常虹郝德君肖荣堂刘勇钱路安榆林杨晓军
- 关键词：齿小蠹属DNA条形码系统发育树
- 基于线粒体COⅠ基因齿小蠹属Ips昆虫DNA条形码研究
- 齿小蠹属(鞘翅目：小蠹科)昆虫是植物检疫中经常截获的类群,为探讨线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(CoⅠ)基因的特定区段作为DNA 条形码快速准确鉴定齿小蠹的可行性,以齿小蠹属昆虫为研究对象,采用磁珠法测定分析了线粒体CoⅠ...
- 常虹郝德君肖荣堂刘勇钱路安榆林杨晓军
- 关键词：齿小蠹属DNA条形码系统树
- 一种新型复合型外来林木害虫诱捕器被引量：3
- 2010年
- 当前广泛使用的诱捕器主要有2种,一种是具有诱芯的诱捕器,该种诱捕器利用特定的诱剂挥发物来吸引害虫实行诱捕,此种诱捕器的缺陷是诱捕剂挥发范围有限,只能在其有效挥发范围内诱集害虫;另一种诱捕器是灯光诱捕器,采用某些害虫的趋光性,来达到诱捕的效果,此种方法只能诱捕趋光的害虫。本文主要介绍一种新型多功能复合型林木害虫诱捕器。经室外监测试验,结果表明该种诱捕器诱捕范围广,诱捕种类多,取得了良好的效果,是一种具有广阔推广应用前景的新型诱捕器。
- 殷玉生安榆林杨晓军黄鹏峰朱明道
- 关键词：林木害虫诱捕器
- 植物DNA条形码技术在出入境检验检疫领域的应用被引量：22
- 2012年
- DNA条形码技术是一种通过标准的DNA片段鉴定物种的新技术,已成为近年来生物学研究热点之一。由于DNA条形码技术具有快速、准确、自动等优点,可以满足目前出入境检验检疫工作中提出的"检得出、检得快、检得准"的要求。本文对植物DNA条形码的研究进展进行了概述,分析了该技术在检验检疫应用领域中存在的不足,并针对如何更好地将该技术应用于检验检疫工作中提出了建议。
- 伏建国杨晓军钱路安榆林
- 关键词：DNA条形码植物检验检疫
- 多年保存天牛科标本的DNA微量提取方法被引量：10
- 2012年
- 本文首次采用磁珠DNA提取法对多年保存的昆虫标本DNA进行微量提取。通过对实验结果和所测基因片段进行分析,发现磁珠DNA提取法对于多年保存,DNA微量且已出现断裂的标本具有良好的提取效果,完全满足后续实验需要。
- 郑斯竹安榆林徐梅杨晓军常虹嵇保中
- 关键词：磁珠昆虫标本DNA提取
- 小蠹科昆虫基因组DNA提取方法的比较研究被引量：7
- 2013年
- 为探讨小蠹科昆虫基因组DNA的提取方法,分别以单头削尾材小蠹、削尾材小蠹足部肌肉组织以及多年75%酒精浸渍标本为研究对象,采用经典的酚仿抽提法、改良的CTAB法、SDS法及动物组织/细胞基因组DNA提取试剂盒(即磁珠法)4种方法提取小蠹基因组DNA,对提取的基因组DNA进行分光光度值的测定以及COⅠ基因扩增。结果表明:4种方法均可从单头标本中提取总DNA;对于75%酒精浸渍2年的标本,4种方法均适用,大于2年的浸渍标本,仅磁珠法适用,且磁珠法适合微量组织总DNA的提取。
- 常虹郝德君杨晓军肖荣堂刘勇钱路安榆林
- 关键词：小蠹科基因组DNA分子鉴定
- 天牛幼虫保存与DNA提取方法比较研究被引量：8
- 2012年
- 为了开展天牛科昆虫分子系统学研究,采用酚-氯仿提取法、TakaraDNA快速提取试剂盒及GenMagBio动物细胞组织/细胞基因组DNA磁珠提取试剂盒3种方法分别对75%乙醇常温保存、无水乙醇-20℃冷藏保存和活体4℃保存3种保存方式且保存时间1年以上的松墨天牛幼虫进行DNA提取,并对不同提取方法所获取的DNA纯度与质量进行分析比较,确定了长时间保存天牛幼虫以无水乙醇浸渍-20℃冷藏保存效果最佳,而用GenMagBio磁珠法提取试剂盒提取DNA出现降解的标本提取效果最好。应用GenMagBio磁珠提取试剂盒对实验室保存多年的天牛幼虫标本进行DNA提取,并对提取DNA是否适合后续的PCR扩增及DNA序列测定进行了实验验证,结果符合预期。
- 郑斯竹安榆林徐梅杨晓军常虹嵇保中
- 关键词：松墨天牛天牛幼虫DNA提取磁珠法
