军队医药卫生科研基金(01Z014)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：方美玉任瑞文林立辉白志军田小东更多>>
- 相关机构：广州军区军事医学研究所广州军区疾病预防控制中心广州市疾病预防控制中心更多>>
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- TaqMan荧光定量PCR检测1型登革热病毒及临床应用被引量：1
- 2010年
- 目的建立登革热1型病毒(DV1)TaqMan荧光定量PCR快速检测方法及应用于临床诊断。方法根据DV15′端非编码区基因保守序列,设计一套特异性引物和TaqMan探针。用4个血清型DV标准毒株为对照,收集40份DV1临床血清为检测标本。通过对DV1标准毒株RT-PCR后,采用体外转录方式获得RNA模板作为阳性对照,检测所建立TaqMan荧光定量PCR方法的特异性。取DV-IgM/IgG用ELISA检测患者血清,将TaqMan荧光定量PCR和DV-IgM/Ig GELISA进行敏感性比较。结果所建立方法的最低检测限约为每反应10个基因拷贝。发病后不同时间采集的登革热患者血清标本检测结果为:发病1～3d的患者RT-PCR阳性检出率最高(81.25%);4～6dELISA-IgM检出率最高(85.00%);7d后ELISA-IgG检出率最高(75.00%)。结论在登革热的早期诊断中建立的RT-PCR具有较高的敏感性、特异性和重复性,可作为DV1的快速诊断方法。
- 白志军刘建伟洪文艳任瑞文陈万山卢业成张复春方美玉林立辉
- 关键词：荧光定量RT-PCRTAQMAN探针
- 海南岛不明发热病人血虫媒病毒分离鉴定及抗体检测被引量：4
- 2006年
- 目的从海南岛不明发热病人血中分离和鉴定虫媒病毒,并在当地人群进行抗体检测,以了解南方地区虫媒病毒的感染情况。方法采用微量法细胞培养对205份发热原因不明患者血标本进行病毒分离,应用生物学性状检测、间接免疫荧光试验(IFA)和血凝抑制试验(HI)等技术对分离病毒进行鉴定。采用IFA检测从当地人群血清中分离出的病毒的抗体水平。结果从发热早期患者血标本中分离出2株病毒,鉴定为甲病毒,命名为HF 7和HC 6。这2株病毒与8种甲病毒免疫腹水中的SIN的免疫腹水呈现最高的血凝抑制滴度(分别为1∶160和1∶320),与SIN免疫腹水的交叉荧光效价最高(分别为1∶320和1∶640),但HF 7和HC 6病毒的免疫腹水与8种甲病毒的血凝抑制试验和交叉免疫荧光试验无反应,表明HF 7和HC 6病毒虽与SIN病毒的免疫腹水血抑效价及荧光效价高,但HF 7和HC 6的免疫腹水与SIN病毒无抑制效价和免疫荧光效价。当地人群对这两株病毒感染的抗体阳性率分别为3.3%(15/451)和8.4%(38/451)。结论HF7和HC6为甲病毒的一个新种。海南岛人群存在甲病毒感染。
- 方美玉刘建伟洪文燕任瑞文程刚锋白志军田小东林立辉
- 关键词：甲病毒间接免疫荧光试验血凝抑制试验
