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人胎盘绒毛膜滋养层细胞的培养(英文)被引量：8: 2002年; 目的　建立纯度较高的适于试验研究的人绒毛膜滋养层细胞 .方法　胰蛋白酶 - DNase联合消化法培养人绒毛膜滋养层细胞 ,间接免疫染色进行细胞鉴定 ,透射电镜观察细胞内部结构 .结果　倒置显微镜下 ,可见细胞呈不规则多角形 ,核大卵圆形 ,胞质透明 ,呈片状铺展生长 .角蛋白染色阳性率超过 95 % ,未检测到波型蛋白阳性细胞 ,表明不含污染细胞 .透射电镜观察示所获细胞有典型滋养层细胞结构 .结论　该法简便易行。; 王雪萍徐德忠李远贵闫永平张景霞黄坚; 关键词：滋养层细胞细胞培养透射电镜

人早孕胎盘绒毛膜滋养层细胞的培养被引量：3: 2004年; 目的 :培养纯度较高的人绒毛膜滋养层细胞 ,为胎盘绒毛在妊娠期间的作用及其机制研究提供细胞学基础 .方法 :胰蛋白酶 DNase消化法培养人绒毛膜滋养层细胞 ,间接免疫染色进行细胞纯度检测 ,透射电镜观察细胞内部结构 .结果 :倒置显微镜下 ,可见细胞为上皮样细胞形态 ,呈片状铺展生长 .细胞角蛋白染色阳性 ,波型蛋白染色阴性 ,表明不含污染细胞 .透射电镜观察示所获细胞有典型滋养层细胞结构 .结论 :该法简便易行 ,可获得合乎试验要求的人绒毛膜滋养层细胞 .; 李富军王雪萍刘斌李焰李洁; 关键词：细胞培养

TNF-α对HBV体外感染人胎盘绒毛膜滋养层细胞的促进作用被引量：1: 2008年; 目的:研究TNF-α对HBV体外感染人胎盘绒毛膜滋养层细胞的促进作用,建立HBV与人胎盘绒毛滋养层细胞相互作用的稳定体外感染模型.方法:绒毛膜癌细胞系JEGⅢ细胞作为滋养层细胞模型,分别在促感染因子TNF-α存在和不存在情况下,与HBV阳性血清(2×1012HBV DNA/L)共同孵育.感染后24h,PBS充分洗涤感染体系,直至最后一遍洗液HBsAg阴性.加新鲜培养液继续培养,每隔12h,收集培养标本,分别用Western blott,透射电镜,ELISA,和PCR检测培养物中HBV标志物.结果:在TNF-α不存在的感染环境下,细胞标本中HBV标志物呈阴性或弱阳性.而在TNF-α存在的感染环境下,细胞标本中HBV标志物呈阳性或强阳性,感染效率大大增强(P<0.01).但各时间点之间的感染效率差异不显著.结论:在TNF-α存在的环境下,HBV体外可以成功感染滋养层细胞.该体外细胞感染模型是深入研究HBV宫内传播机制的关键.; 李富军文珍林王雪萍; 关键词：宫内传播绒毛膜癌肿瘤坏死因子-Α

HBsAg进入体外培养的人绒毛膜滋养层细胞的初步研究被引量：14: 2003年; 目的检测HBsAg进入体外培养的人绒毛膜滋养层细胞的情况,为HBV宫内传播机制研究提供理论依据。方法用胰蛋白酶(0.25%)-DNase Ⅰ(0.15 U/ml)联合消化法,获取纯度较高的人绒毛膜滋养层细胞。将状态良好的对数生长期人绒毛膜滋养层细胞分为6组,HBsAg-anti-HBs 复合物组(Ⅰ),热灭活的HBsAg、HBeAg、anti-HBc均阳性血清和高滴度anti-HBs阳性血清共同孵育物组(Ⅱ), 热灭活的HBsAg、HBeAg、anti-HBc均阳性血清组(Ⅲ),HBsAg组(Ⅳ),热灭活的正常人血清组(Ⅴ),及正常细胞培养液组(Ⅵ,空白对照组)。分别收集各组细胞铺片,免疫组化检测细胞的感染状况。结果所获人绒毛膜滋养层细胞纯度较高,符合后续实验要求。用鼠抗人anti-HBs免疫组化检测收集的细胞铺片,发现Ⅰ、Ⅱ组均有大量HBsAg阳性信号,Ⅲ组细胞亦有少量HBsAg阳性信号出现,其他各组细胞均未发现HBsAg阳性信号。结论体外培养的人胎盘滋养层细胞能将HBsAg-抗HBs复合物中的HBsAg,但不能将单独的HBsAg“摄入”胞内。; 王雪萍徐德忠李远贵闫永平门可张景霞; 关键词：免疫组织化学乙型肝炎病毒宫内传播

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国家自然科学基金(30000181)