山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(01BS12)
- 作品数：5 被引量：87H指数：3
- 相关作者：张洪海孔健杨官品刘长青马俊孝更多>>
- 相关机构：中国海洋大学曲阜师范大学山东大学更多>>
- 发文基金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 寿光鸡ADSL基因5′调控区的克隆、序列分析以及单核苷酸多态性的研究被引量：1
- 2005年
- 腺苷酸琥珀酸裂解酶(ADSL)是双功能酶,催化嘌呤核苷酸的起始合成与嘌呤核苷酸的循环。通过对寿光鸡ADSL5′调控区1035bp的序列进行克隆和测序分析,发现其具有典型的管家基因特征:没有真核基因明显的TATA盒和CAAT盒出现,并且位于起始密码子(ATG)前234个碱基具有非常高的GC含量达72.65%。在邻近起始密码子“ATG”处,5′调控区含有两个核呼吸因子-2(NRF-2),在相同位置上人类ADSL基因也具有与此类似的两个核呼吸因子-2结合位点,被认为在嘌呤核苷酸合成途径起到重要作用。值得一提的是位于寿光鸡5′侧翼调控区-27号碱基发生C→T突变,存在于所有研究的寿光鸡个体中,频率为1。该突变使得本来不是NRF-2(核呼吸因子2)结合位点的CTCC突变为NRF-2结合位点CTTC。而人类却恰恰与此相反第一个NRF-2结合位点发生了突变(CTTC→CTCC),并导致出现ADSL缺陷症状。
- 刘长青张洪海杨官品廖梅杰刘永健
- 关键词：寿光鸡调控区单核苷酸多态性
- 微生物青贮剂在玉米秸秆黄贮中的作用被引量：47
- 2004年
- 玉米秸秆黄贮过程中接种乳酸菌可以迅速降低原料的pH值 ,有效抑制腐败菌生长 ;添加纤维素酶 ,可以使秸秆的纤维含量由原来的 35 .3%降低到 2 5 .3% ,并增加可溶性碳水化合物含量 ;同时使用酵母菌 ,可使粗蛋白含量提高 10 % .所以 ,微生物青贮剂的使用 ,能有效改善黄贮秸秆的品质和营养价值 .
- 王富生马俊孝任红卫孔健
- 关键词：微生物青贮剂乳酸菌纤维素酶玉米秸秆青贮
- 寿光鸡ADSL基因的克隆及基因结构与功能分析（英文）
- 利用RT—PCR方法对编码寿光鸡ADSL基因的cDNA序列进行了克隆和测序分析。寿光鸡ADSL基因开放阅读框长度为1 455个碱基,编码485个氨基酸,预测分子量为54.5 kD。该序列已提交GenBank,登录号为AY...
- 刘长青张洪海杨官品
- 关键词：寿光鸡基因克隆基因结构
- 文献传递
- 中国地方鸡种种质资源的开发利用及保护对策被引量：7
- 2005年
- 我国是世界上家禽遗传资源最丰富的国家,近年来由于外来鸡种的大量引进,与外来鸡种的杂交正在导致地方鸡种遗传资源的异化甚至丧失;针对当前地方鸡种遗传资源的保护和利用方面存在的问题,提出了几点建议并制定相应的保护对策。
- 刘长青张洪海杨官品
- 关键词：地方鸡种种质资源
- 寿光鸡腺苷酸琥珀酸裂解酶ADSL基因的表达与克隆化细胞株的筛选被引量：3
- 2009年
- 利用RT-PCR与RACE方法检测寿光鸡心、肝、脾、肺、肾、脑、腿肌与胸肌8种组织腺苷酸琥珀酸裂解酶（ADSL）基因mRNA的差异表达水平，构建ADSL基因融合表达载体pGEX-ADSL，转化大肠杆菌BL21（DE3），筛选阳性克隆，IPTG诱导表达，通过构建真核表达载体pEGFP-ADSL，利用脂质体介导法转染寿光鸡成纤维细胞，并进行阳性细胞的克隆化筛选与检测。结果表明：ADSL基因开放阅读框序列长为1455 bp，编码485个氨基酸;5′端非转录调控区具有典型管家基因的特征，在邻近起始密码子-28 bp处发生C→T突变，该突变使该位点变为核呼吸因子2（NRF-2）结合位点;经SDS-PAGE电泳显示，pGEX-ADSL重组融合蛋白在分子量约为80.5 ku处有特异的蛋白条带出现，与预期分子量大小一致，等电点为6.79，纯化后用Western-blot检测为寿光鸡ADSL蛋白。pEGFP-ADSL转染寿光鸡成纤维靶细胞后24、48和72 h，转染率在26.4%~41.2%之间，绿色荧光均匀分布于细胞质与细胞核中，随表达量的增加，绿色荧光在细胞核中聚集成团块状或颗粒状，经药物筛选和克隆化培养，获得表达pEGFP-ADSL融合蛋白的阳性克隆细胞株，经RT-PCR扩增与Western-blot检测确认ADSL融合蛋白基因已经整合到寿光鸡成纤维细胞的基因组中，获得正常表达。研究结果为揭示我国优良地方鸡种的风味基因结构，研究其生物学功能奠定基础。
- 刘长青张洪海文杰马月辉关伟军唐学玺
- 关键词：寿光鸡基因结构基因定位
- 乳酸乳球菌电转化条件的研究被引量：30
- 2005年
- 以质粒pTRKH2为材料,对乳酸乳球菌MG1614进行电转化条件的研究.实验结果表明,在电转化过程中,电场强度、电阻大小、细胞生长状态和电击后菌株复苏时间均对转化效率有明显影响,得到了乳酸乳球菌的最适电转化条件为:对数生长中期的细胞,经1%甘氨酸处理,在10kVcm电场强度、400Ω电阻下电转化,转化后细胞在SGM17培养液中培养2h后涂布选择性培养基,转化率(转化子个数与DNA质量之比)可达1.2×103个μg,比优化前的转化效率提高近100倍.
- 孙磊孔文涛孔健
- 关键词：乳酸乳球菌电转化
