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ID4、ZO—1基因甲基化定量检测在急性白血病诊断中的意义被引量：1: 2012年; 目的探讨ID4、ZO-1基因甲基化定量检测作为基因标志在急性白血病（acute leukemia，AL）中的意义。方法采用硫化测序PCR（bisulfite sequencing PCR，BSP）法及甲基化特异性PCR（methylightion specific PCR，MSP）法检测AL中NB4细胞和健康供者骨髓（normal bone marrow，NBM）细胞的ID4、ZO-1基因的甲基化状况并进行分析。结果BSP法检测ID4基因在ALNB4细胞中甲基化阳性率为86．0％，显著高于NBM细胞甲基化阳性率（4．8％），差异有统计学意义（P〈0．05）；ZO-1基因在ALNB4细胞系中甲基化阳性率为88．4％，显著高于NBM细胞甲基化阳性率（1．9％），差异有统计学意义（PP〈0．05）。采用MsP法检测9种AL细胞系，ID4、ZO-1基因甲基化水平在淋系来源的细胞系高于髓系来源的细胞系。结论ID4、ZO-1基因甲基化水平检测可作为新的AL基因标志物。; 康慧媛王新荣高丽李绵洋王成彬于力; 关键词：甲基化急性白血病 ID4 ZO-1 甲基化特异性PCR

CD4^+ T淋巴细胞功能研究新进展被引量：34: 2010年; 细胞免疫是人体免疫系统的重要组成部分,在清除癌变组织和病原菌入侵中发挥重大作用。T细胞在细胞免疫中居中心地位。长期以来,T细胞免疫的研究重点主要集中于CD8+细胞毒T细胞,而关于CD4+T细胞功能的研究多限于CD8+细胞毒T细胞的"辅助"功能,或作为调节细胞抑制免疫反应的研究上,而其杀伤和清除肿瘤细胞的作用似乎被忽视。新近的研究表明,特异性CD8+细胞毒T细胞效应在动物实验或临床研究上均未见理想的效果,CD4+T细胞不是功能单一的一类细胞,而是功能复杂的细胞群。CD4+T细胞的功能不仅限于辅助细胞毒T细胞,而且可以协助NK细胞清除和杀灭肿瘤,甚至还具有不依赖于CD8+CTL的肿瘤杀伤作用。CD4+T细胞在机体抗肿瘤免疫中具有重大意义。本文就CD4+T细胞的分类,分化;CD4+T细胞的功能和分泌的细胞因子;CD4+T细胞与肿瘤免疫;CD4+T细胞的肿瘤免疫调节作用及CD4+T细胞的临床研究进行了综述。; 孙君重肖文华于力; 关键词：细胞免疫 CD4+T淋巴细胞免疫功能

恶性血液病患者侵袭性曲霉菌感染的临床特征及治疗分析被引量：3: 2011年; 本研究旨在分析恶性血液病化疗或造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)患者合并侵袭性曲霉菌感染(invasive aspergillosis,IA)的临床特征及不同抗霉菌治疗的效果和安全性。通过回顾性分析恶性血液病化疗或HSCT病例,根据IA的诊断标准进行评估,分析其临床特征、诊断依据,并按接受的不同治疗分组评价抗霉菌治疗效果及安全性,并分析影响疗效的因素。结果表明,回顾性诊断IA 30例,其中确诊2例,临床诊断19例,拟诊9例。HSCT后IA 19例,主要发生在晚期(>40天)。伏立康唑单药治疗8例,卡泊芬净单药治疗6例,两药联合7例,有效率及开始治疗到有效的时间(time interval from treatment to successful response,TTR)分别为87.5%、50%、85.7%和38、20、36天。联合用药有效率好于单药(p<0.05),TTR差异无显著性(p>0.05)。影响疗效的因素有年龄、HSCT、GVHD和CMV及既往侵袭性真菌感染(invasive fungal infection,IFI)病史等(p<0.05)。各药物均引起不同程度的肝肾损伤,但不同药物之间、联合用药与单药之间对肝肾的损伤程度无显著性差异(p>0.05)。结论:IA仍然是恶性血液病化疗或HSCT患者严重的并发症,抗霉菌治疗联合用药疗效可能好于单药,且不增加肝肾副作用,安全性好;年龄、HSCT、既往IFI病史等可影响疗效。; 李艳高丽王莉莉王全顺李红华于力; 关键词：侵袭性曲霉菌感染恶性血液病伏立康唑卡泊芬净

多重PCR快速检测弥漫性大B细胞淋巴瘤患者骨髓BCL2/IGH与BCL6/IGH融合基因的临床意义被引量：2: 2012年; 弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)是最常见的侵袭性非霍奇金淋巴瘤,其临床表现、分子生物学特点都有显著的异质性。本研究旨在探讨多重PCR技术在DLBCL患者骨髓BCL2/IGH及BCL6/IGH等融合基因检测中的临床意义。利用多重巢式PCR技术对80例初治DLBCL患者的骨髓标本进行BCL2/IGH及BCL6/IGH融合基因检测。结果表明,80例患者骨髓标本中携带目的融合基因共12例,阳性率为15%;其中BCL2-IGH阳性患者为6例,BCL6-IGH阳性患者为6例。DLBCL患者携带不同的融合基因具有不同的临床特点。结论:运用多重PCR方法对DLBCL患者进行分子生物学检测具有快速、准确的优点。但需进一步深入研究改善方法,使之对融合基因能做定量或半定量分析,这对于DLBCL患者的诊断、协助分期、预后评估、微小残留病变的估测,指导临床治疗DLBCL有重要意义。; 郭玥潞董丽丽高丽徐媛媛丁一王莉莉靖彧薄剑周敏航曹婷婷于力; 关键词：弥漫性大B细胞淋巴瘤多重PCR BCL2 BCL6

Notch信号传导在淋巴细胞发育中的作用被引量：1: 2010年; Notch信号旁路在调节造血系统的发育选择、分化和功能方面起着关键性的作用,尤其在胚胎发育时期,其调节造血干细胞的产生并影响造血祖细胞的发育。本文就Notch信号对于T细胞系的定性和早期胸腺细胞的发育的作用作一综述。; 杜宏于力; 关键词：信号传导 T淋巴细胞

单倍体相合外周血造血干细胞移植治疗恶性血液病被引量：4: 2009年; 为了探讨单倍体相合外周血造血干细胞移植(hi-PBSCT)治疗恶性血液病的疗效和相关并发症,对15例高危患者进行体外不去除T细胞的hi-PBSCT。预处理采用改良的Bu/Cy或TBI/Cy方案,用抗胸腺细胞球蛋白(ATG)、环孢素A(CsA)、霉酚酸酯(MMF)和短程甲氨蝶呤(MTX)预防移植物抗宿主病(GVHD),4例加用抗CD25单克隆抗体。回输G-CSF动员的外周血干细胞,输注MNC中位数为8.16(3.92-10.86)×108/kg,CD34+细胞中位数为4.51(1.27-5.95)×106/kg。结果显示:所有患者均植入成功,ANC≥0.5×109/L的中位时间为14(11-19)天,Plt≥20×109/L的中位时间为22(11-52)天。Ⅰ-Ⅱ度急性GVHD6例,慢性GVHD2例。移植后100天内均出现感染,病原学确诊为细菌感染8例,CMV感染6例。5例患者出现复发。中位随访213(42-589)天,死亡8例,存活7例。结论:hi-PBSCT治疗无HLA相合供者的恶性血液病患者是可行而且有效的,进一步降低移植相关并发症是主要问题。; 肖娟高春记李红华赵瑜薄剑靖彧王书红朱海燕金香淑于力; 关键词：单倍体相合造血干细胞移植移植物抗宿主病恶性血液病

miR-196a靶向调控HOXA9基因的实验研究被引量：2: 2011年; 目的:研究HOXA9基因的表观遗传学调控机制,筛选靶向调控HOXA9基因的microRNA。方法:利用Tar-getscan在线分析软件预测特异性靶向HOXA9基因3'端非编码区域(3’UTR)的microRNA,采用PCR方法从1例健康供者DNA中扩增HOXA9基因3’UTR序列,插入经XbaI和PstI双酶切的荧光素酶报告载体pGL3-M,采用脂质体SuperFect包裹荧光素酶重组质粒及microRNA表达质粒转染293T细胞,应用双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性。构建miR-196a结合位点突变的HOXA9基因3’端非编码区域突变型荧光素酶报告载体,采用脂质体SuperFect包裹荧光素酶突变型重组质粒及miR-196a表达质粒转染293T细胞,应用双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性。miR-196amimics以脂质体Hiperfect转染至MV4-11细胞,实时定量PCR及Westernblot检测HOXA9mRNA及蛋白的表达。结果:成功构建了含有1628bp的HOXA9基因3’UTR序列的荧光素酶报告重组质粒pGL3-HOXA9-3’UTR,并通过酶切及基因测序方法的鉴定;荧光素酶报告实验提示miR-196a组荧光素酶活性明显低于对照组。成功构建了miR-196a的2个结合位点突变的HOXA9基因3’UTR序列的突变型荧光素酶报告重组质粒pGL3-HOXA9-mut3’UTR,并通过基因测序方法的鉴定。miR-196a可以下调野生型质粒的荧光素酶活性,不影响突变型质粒的荧光素酶活性。MV4-11细胞中过表达miR-196a,可以明显下调HOXA9mRNA及蛋白表达。结论:miR-196a通过靶向结合HOXA9基因3’UTR的结合位点特异调控HOXA9基因。; 窦立萍李永辉王莉莉于力; 关键词：MICRORNA 白血病

8p11骨髓增殖综合征的临床病理学特征被引量：3: 2010年; 本研究旨在提高对罕见的8p11骨髓增殖综合征(eight p11myeloproliferative syndrome,EMS)的临床病理特征、诊断与治疗的认识。应用骨髓细胞涂片、骨髓活检观察细胞形态学改变,流式细胞术检测骨髓细胞的免疫表型,细胞遗传学方法分析骨髓细胞核型,分子生物学检测bcr/abl融合基因。结果表明:EMS是一组具有独特临床和生物学特点的疾病,以bcr/abl阴性的骨髓增殖性肿瘤合并淋巴母细胞淋巴瘤(lymphoblastic lymphoma,LBL)为主要特征。骨髓细胞形态学提示粒系细胞高度增生、嗜酸粒细胞增多;免疫表型分析显示髓系抗原表达增高;细胞遗传学分析表明存在8p11易位;RT-PCR检测bcr/abl融合基因呈阴性。在分子学水平,患者染色体异常均累及8p11上的成纤维细胞生长因子受体-1(FGFR1),目前共发现11种与FGFR1重排相关的伙伴基因,其中最常见的是位于13q11-12上的ZNF-198。EMS预后不良,患者常在短期内进展为急性髓系白血病,常规化疗效果差,除异基因造血干细胞移植外无有效的治疗方法。结论:EMS是伴有FGFR1重排的骨髓和淋巴肿瘤,易误诊为T-LBL、不典型慢性粒细胞白血病(aCML)及慢性粒-单核细胞白血病(CMML),对该病应及时进行细胞遗传学及分子生物学检测,以避免误诊、误治。; 闫真杨波王全顺王莉莉韩晓苹任芳于力; 关键词：淋巴瘤 FGFR1 临床病理学

异基因造血干细胞移植后供者淋巴细胞输注的优化策略: 2009年; 异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）是可治愈多种血液系统恶性疾病的有效手段，而移植后疾病的复发一直是限制移植治疗效果的重要原因。供者淋巴细胞输注（DLI）作为一种过继性细胞免疫治疗，可以通过移植物抗白血病（GVL）或移植物抗肿瘤（GVT）效应预防和治疗恶性疾病的复发，近年来得到了快速的发展和广泛的应用。而传统的DLI后GVHD的发生率高达50％～60％，严重影响了DLI的临床应用。我们就增进DLI的GVL效应及减轻GVHD的优化策略进行综述。; 王立新于力; 关键词：供者淋巴细胞输注移植后血液系统恶性疾病过继性细胞免疫治疗移植物抗白血病

动员外周血造血干细胞移植物中同时高效去除T／B细胞的体外研究被引量：2: 2008年; 单倍体相合造血干细胞移植时,去除移植物中的T细胞和B细胞可减少移植物抗宿主病和EBV相关的淋巴细胞增殖性疾病的发生。本研究在国内首次应用CliniMACS系统,通过CD3/CD19磁珠抗体同时有效地去除动员外周血造血干细胞中的T细胞和B细胞。用流式细胞术检测移植物中T细胞和B细胞的去除效率,以集落形成实验评价去除后的干细胞功能。结果表明:T细胞和B细胞去除之前单个核细胞总数为4.88×1010,去除之后移植物中T细胞比例为0.02%,去除4.4Log;B细胞比例不到0.01%,至少去除3.3Log。移植物中除CD34+细胞外,还包括NK细胞,单核细胞和粒细胞。CD34+细胞纯度为0.98%,计数1.84×108,回收率为69.7%;NK细胞计数2.54×109,回收率为71.7%。集落形成实验显示CD3/CD19去除对造血干细胞功能无影响。结论:应用CliniMACS系统可有效地同时去除动员外周血干细胞中的T细胞和B细胞,且不影响造血干细胞的生物学功能,此项研究为去除T/B细胞的单倍体相合造血干细胞移植提供了技术平台。; 肖娟李红华金香淑靳海杰富丽烨高春记韩晓蘋于力; 关键词：造血干细胞移植

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首都医学发展科研基金(2007-2040)

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