国家自然科学基金(81060140)
- 作品数：8 被引量：23H指数：4
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- 海南154例恙虫病病例特点分析
- 目的了解海南地区近年恙虫病的发病情况及临床特点,为恙虫病的防治及临床恙虫病的确诊提供参考依据。方法收集海南省海口市三家三甲医院近三年(2011年—2013年)恙虫病病例,对所得资料进行统计分析。结果共收集恙虫病确诊病例1...
- 邓胜群高丽娟黄宪希易国辉周利民郭虹
- 关键词：恙虫病立克次体
- 文献传递
- 伯氏疟原虫哌喹抗性系感染小鼠的组织病理特征
- 在前期研究所建立的伯氏疟原虫(Plasmodium berghei,P.b.)哌喹(Pireraquine phospate,PQ)抗性系(PQR)鼠疟模型的基础上,通过对实验小鼠脾脏、肝脏、肾脏及脑组织切片的动态观察,...
- 黄宪希沈笑周利民易国辉薛伟玲郭虹
- 关键词：伯氏疟原虫组织病理
- 文献传递
- 伯氏疟原虫哌喹抗性系小鼠病理学特征与抗性相关性研究
- 2016年
- 目的观察伯氏疟原虫(Pb)ANKA株哌喹抗性系(PQR)感染小鼠组织病理学变化特征,比较与哌喹敏感系(PQS)的差异,探讨其抗性机制。方法实验小鼠随机分为A(PQS)、B(PQR)及C(正常对照,NC)三组,取肝、脾、脑及肾组织,10%福尔马林固定后石蜡包埋,4μm切片,苏木精一伊红(Haematoxylin-eosin,HE)及吉姆萨(Giemsa)染色,镜下观察其组织病理学改变。结果与PQS组比较,PQR组疟原虫感染红细胞(p RBC)及疟色素(HZ)在各器官组织中出现晚,增殖缓慢,数量明显偏少,在17d增至峰值时仍明显少于PQS组6d时,22d时开始下降。各组织的炎性病变随感染天数的延长而变化:早期较轻,呈渐进性发展,17d时达到高峰,22d时炎症减轻,组织损伤呈恢复趋势,其两组肝、脾组织中炎性细胞的浸润程度在6d时未见明显不同。脑组织的炎性反应、疟原虫浸润及组织损伤程度均显著轻于PQS组。结论 PQR系的毒力下降、致病力降低表象的组织病理学特征为:肝、脾、脑和肾组织中p RBC及HZ浸润量明显偏低,炎性反应、原虫数量的变化呈逐渐增加、降低、趋向恢复的动态过程,未见明显的脑型疟的组织学变化。
- 黄宪希周利民沈笑易国辉薛伟玲郭虹
- 关键词：伯氏疟原虫组织病理学
- 伯氏疟原虫哌喹抗性系的建立及其抗性表型特征观察被引量：5
- 2011年
- 目的:建立伯氏疟原虫(P.b.)抗哌喹(PQR)系鼠疟模型;比较其抗性表型基本特征。方法:采用鼠-鼠间血传、药物剂量递增法对P.b.ANKA哌喹敏感株(PQS)进行抗性培育,通过测定PQS ED50和PQR ED50计算抗性指数及抗性稳定性;显微镜观察虫体形态变化、计数原虫率,记录分析小鼠接种后存活时间及肝、脾及体重变化等特征。结果:磷酸哌喹(PQ)起始剂量7 mg/kg,传14代,历时8个月,PQ浓度达35 mg/kg时,抗性指数大于敏感株>186倍;P.b.PQR光镜下形态变化显著,原虫率上升缓慢、致病力下降,感染鼠存活时间延长、贫血程度较轻,肝脾肿大显著等。去除药物压力传代6次后,RI仍>100,抗性表型无明显改变。结论:建立了P.b.ANKA株PQR系,该系抗性相对稳定,抗性表型特征明显。该模型的建立,为深入研究PQ抗性分子机制及抗性相关免疫调节机制奠定了实验基础。
- 郭虹周利民潘在用黄宪希薛伟玲吴金燕易国辉
- 关键词：伯氏疟原虫哌喹
- 海南产新鲜马缨丹花和嫩枝叶挥发油的GC/MS分析被引量：4
- 2014年
- 目的:研究海南产新鲜马缨丹Lantana camara L.花和嫩枝叶的挥发油成分。方法:采用挥发油测定器提取了海南产新鲜马缨丹花和嫩枝叶中的挥发油,并采用气相色谱/质谱联用技术(GC/MS)对其成分进行了分析,利用计算机谱图检索和峰面积归一化法对马缨丹的挥发性成分进行定性鉴定和定量分析。结果:海南产新鲜马缨丹花和嫩枝叶的挥发油得率分别为0.16%和0.27%,分别鉴定出69种和85种化合物。结论:马缨丹花和嫩枝叶挥发油的主要成分为倍半萜类,其中大根香叶烯D、α-石竹烯、β-石竹烯、大根香叶烯B在马缨丹花挥发油中的相对含量分别为23.889%、18.763%、8.568%、7.154%,在马缨丹嫩枝叶挥发油中的相对含量分别为23.011%、22.052%、8.704%、6.253%。
- 何小稳易国辉马寅正薛伟玲郭虹
- 关键词：马缨丹挥发油
- 海南169例恙虫病病例特点分析被引量：8
- 2015年
- 目的了解海南地区近年恙虫病的发病情况及临床特点,为减少恙虫病的临床误诊提供参考依据。方法收集海南省海口市三家三甲医院2011~2013年恙虫病病例,对所得资料进行统计分析。结果共收集恙虫病确诊病例169份,其中男性79例,女性90例,男女性别比例0.88;年龄最大的82岁,最小的仅122d,平均年龄（36.70±26.98）岁;10岁以下儿童组占35.50%（60/169）,显著高于其他年龄组（P〈0.01）。除了幼儿及学生外,患者的职业分布以农民为主,占38.46%（65/169）,其他由离退休人员、工人、居民及无业人员等组成,占24.26%（41/169）;全年均有病例,患者来自海南15个市县;均以发热为主要症状收治,其中140例有特征性焦痂或溃疡,占82.84%;发病前有野外接触史或虫媒叮咬史记录的38例,占总病例数的22.49%;外斐氏实验检测145例中阳性仅6例。结论 169例恙虫病以儿童、农民为主;海南岛分布广泛;全年发病,误诊率高;外斐氏反应实验室诊断此病敏感性及特异性低。
- 黄宪希高丽娟邓胜群郭虹
- 关键词：恙虫病立克次体误诊
- 疟原虫纯化新方法的研究
- 2014年
- 目的:拟应用去白细胞输血器,建立一种快速简便纯化疟原虫的新方法,以去除宿主白细胞DNA干扰。方法:建立Pb ANKA株鼠疟模型;39只小鼠分为A组(新鲜虫血组,n=18)、B组(冻存虫血组,-80℃保存,n=16)及C组(正常对照组,n=5);应用去白细胞输血器对血样进行过滤纯化,观察比较过滤速度及血样处理(新鲜、冻存)对去除白细胞效果的影响;血细胞计数板和血涂片吉姆萨染色法计数各样本过滤前后白细胞、红细胞、原虫率并观察疟原虫形态和疟原虫密度。滤过后的血液提取DNA,PCR验证白细胞滤过效果。结果:经血细胞计数板计数,3组白细胞平均去除率比较,差异无统计学意义(P>0.05);C组红细胞的回收率高于A组,差异具有统计学意义(P<0.05);B组则仅见原虫。白细胞过滤后疟原虫形态及密度无明显改变。PCR鉴定PbGAPDH结果 A、B组均为阳性,而小鼠GAPDH均为阴性。结论:建立了白细胞输血器一步法纯化疟原虫的新方法。该方法简便、快速、廉价,是进行疟原虫分子生物学、免疫学等方面的研究不可或缺的实用技术。
- 黄宪希易国辉周利民薛伟玲郭虹
- 关键词：伯氏疟原虫纯化
- 伯氏疟原虫ANKA株抗哌喹系小鼠模型免疫学分析被引量：3
- 2012年
- 目的观察伯氏疟原虫（Plasmodium berghei，Pb）ANKA抗哌喹（PQR）系小鼠模型的免疫学特征。方法64只昆明小鼠随机分为3组，A组和C组各16只，B组32只（其中16只用于观察存活天数）。A组和B组小鼠分别经腹腔感染伯氏疟原虫ANKA株哌喹敏感系（PbPQS）和抗性系（PbPQR）红内期原虫1×10^7个（200μl血），C组（健康对照组）注射等量生理盐水。每组于感染后4、8、12和16d各取4只小鼠，取尾血制薄血膜镜检，计算红细胞原虫感染率（简称原虫率）。脱颈处死小鼠，无菌取脾制备脾淋巴细胞悬液，用CCK-8法测定各组小鼠脾淋巴细胞经刀豆球蛋白A（ConA）刺激后的增殖反应，用Griess法和ELISA分别测定脾淋巴细胞培养上清中NO含量和γ干扰素（IFN-γ）水平。另取10只昆明小鼠，每鼠腹腔接种PbPQR系原虫约1×10^7个，待原虫率上升后下降，典型的原虫转变为蓝染细胞时，腹腔感染PbPQS系原虫（1×10^6个）进行攻击感染，观察小鼠原虫率和小鼠存活情况。结果A组小鼠平均存活（9．0＋3．0）d，感染后6～12d原虫率均〉50％，出现严重贫血。感染后16d，B组小鼠全部存活，原虫率为（26．66±2．54）％。A、B两组小鼠的脾淋巴细胞经ConA刺激后增殖显著，感染后12d，分别为0．65±0．08和0．86±0．20（P〈0．01）。脾淋巴细胞培养上清中，NO含量随感染时间延长而上升，感染后12d，A、B和C组分别为（48．80±3．49）、（54．80±2．17）和（7．80±0．71）μmol／L，三者比较差异有统计学意义（P〈0．01）。A组脾淋巴细胞培养上清中IFN-γ水平随感染时间延长而上升，感染后12d达到最高，为（752．20±39．49）pg／ml，B组于感染后8d升至峰值[（855．80±33．65）pg／ml]，感染后12d降至（620．20±27．11）pg／ml；感染后8d和12d，A组和B组IFN．吖水平的差异有统计学意义（P〈0．01）。用PbPQS系攻击感染PbPQR�
- 黄宪希周利民易国辉吴金燕潘在用薛伟玲郭虹
- 关键词：伯氏疟原虫免疫
- 伯氏疟原虫抗哌喹系小鼠IFN-γ、TNF-α及IL-4分泌细胞的抗性免疫调控作用被引量：3
- 2015年
- 目的:通过检测及比较伯氏疟原虫(Pb)ANKA株抗哌喹(PQR)系及敏感(PQS)系感染小鼠脾细胞中γ-干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素-4(IL-4)细胞因子分泌细胞水平的动态变化,探讨哌喹抗性相关免疫调节机制。方法:80只昆明小鼠随机分为A(PbPQS)、B(PbPQR)和C(对照组,NC)3组,应用ELISPOT技术测定各组小鼠脾细胞分泌IFN-γ、TNF-α和IL-4的斑点形成细胞数(SFCs)。结果:在PbPQS或PbPQR感染小鼠后3、6d时IFN-γSFCs A、B两组均显著增高,3d时A组高于B组(P=0.05),而6d时B组明显高于A组(P=0.002),TNF-αSFCs的增加B组明显高于A组(3d:P<0.001,6d:P=0.037),IL-4SFCs A、B两组增高无显著性差别。B组3种细胞因子SFCs 22d间的动态变化结果显示:6d时IFN-γSFCs及TNF-αSFCs增至峰值,9d时IL-4SFCs增至峰值,22d时3种细胞因子SFCs再度增加。结论:感染早期Th1免疫反应的有效活化、其后向Th2免疫反应的偏移以及感染后期3种细胞因子的协同抗原虫作用是影响PbPQR感染小鼠早期原虫增殖低下、其后原虫率上升以及最终疾病转归恢复的重要因素,抗性的产生与宿主免疫密切相关。
- 黄宪希周利民易国辉薛伟玲郭虹
- 关键词：伯氏疟原虫细胞因子酶联免疫斑点法
- 疟原虫感染组织切片吉姆萨染色法的建立及优化被引量：4
- 2015年
- 目的探讨使用吉姆萨(Giemsa)染色法对伯氏疟原虫(Plasmodium berghei,P.b.)ANKA株感染小鼠肝、脾组织标本进行染色的可行性及效果。方法小鼠肝、脾组织用10%福尔马林固定后石蜡包埋,4μm厚切片,60℃烤箱30min烘烤,二甲苯脱蜡,常规乙醇水化至水,用2、3、4倍稀释的吉姆萨工作液分别染色3min、5min、10min;同时做常规苏木精-伊红(Haematoxylin-eosin,HE)染色。结果 3倍稀释Giemsa工作液染色5min的染色效果最佳。镜下观察,疟原虫染色鲜明、虫体胞浆蓝色,胞核粉红、疟色素染为棕褐色,清晰易辨,明显优于HE染色法。结论使用Giemsa染色法对P.b.感染小鼠肝、脾组织标本的染色简单易行,需时短,效果良好,在临床及科研领域中具有应用价值。
- 黄宪希周利民易国辉薛伟玲郭虹
- 关键词：伯氏疟原虫HE染色法
