国家自然科学基金(81060111)
- 作品数：12 被引量：41H指数：4
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- 相关机构：江西省人民医院南昌大学更多>>
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- 采用海马原代神经元和离体脑片建立乙醇性痴呆体外模型的比较被引量：1
- 2014年
- 目的建立和比较不同的乙醇性痴呆（AAD）体外研究模型，为进一步探讨其发病机制提供方法学参考。方法取胎鼠海马进行原代神经元培养及鉴定，给予不同浓度的乙醇作用24h．采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞存活率以及Hoechst33342染色观察细胞凋亡状况。另外，取新生大鼠海马切取脑片进行离体培养，采用HE染色观察不同时间点乙醇对海马脑片的损伤作用。结果原代培养的海马神经元高表达神经元特异性烯醇化酶（NSE），低表达神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）。乙醇（50～100mol／L）作用24h可明显抑制海马神经元存活并呈浓度依赖关系；乙醇（50mol／L，24h）可诱导海马神经元显著凋亡。海马脑片HE染色证实短时乙醇作用（50mol／L,30min）即可导致细胞明显损伤，而长时乙醇作用（50mol／L，24h）可导致海马形态结构严重破坏。结论在AAD发病机制研究中，原代海马神经元适用于建立慢性乙醇诱导损伤模型，而离体海马脑片适用于急性乙醇毒性研究。
- 刘勇曾玉娥杨海玉
- 关键词：体外研究海马神经元原代培养
- 慢性酒精中毒性脑病的临床与病理机制研究进展被引量：16
- 2013年
- 慢性酒精中毒对于人类健康的危害日趋严重,在酒精中毒性疾病中以慢性酒精中毒性脑病最为常见。在我国,随着人们生活水平的不断提高,慢性酒精中毒性脑病的发病人群也在不断增加。然而由于其治疗手段有限,治疗效果也不大理想,大多数患者不能完全恢复至正常。近年来,国内外学者对慢性酒精中毒性脑病的病理机制进行了深入研究,
- 曾玉娥吴晓牧杨海玉
- 关键词：慢性酒精中毒性脑病病理机制中毒性疾病发病人群生活水
- 乙醇性痴呆大鼠海马区脑源性神经营养因子的表达变化被引量：2
- 2013年
- 目的探讨乙醇性痴呆大鼠海马区脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的表达变化及其与学习记忆功能损害的关系。方法 SD大鼠随机分为2组,每组6只,其中一组按体质量8mL/(kg·d)给予20%(体积分数)乙醇灌胃持续28d,建立乙醇性痴呆大鼠模型;另一组予等量生理盐水灌胃作为对照。观察两组大鼠Morris水迷宫行为(逃避潜伏期),采用HE染色方法观察海马组织形态改变,采用免疫组化检测大鼠海马区BDNF表达。结果乙醇组大鼠灌胃后逃避潜伏期时间(EL)〔(16.39±3.11)s〕较灌胃前〔(7.12±1.18)s〕明显延长(P<0.05);与生理盐水组灌胃后EL〔(5.76±0.86)s〕比较,乙醇组大鼠灌胃后EL明显延长(P<0.01),且海马形态结构明显破坏。免疫组化结果显示,与生理盐水组相比,乙醇组大鼠海马齿状回(DG)区(积分光密度值为111.65±14.44 vs.61.55±17.44)和CA1区(积分光密度值为88.98±9.15 vs.55.21±8.93)BDNF相对表达明显降低(均P<0.05)。结论乙醇可导致大鼠学习记忆功能及海马组织损伤,其机制可能与抑制海马BDNF表达有关。
- 杨海玉吴晓牧曾玉娥刘勇
- 关键词：学习记忆脑源性神经营养因子SD大鼠
- 酒精性痴呆大鼠模型的建立方法及评价被引量：3
- 2013年
- 目的通过比较不同酒精作用途径、剂量和时间对学习记忆功能的影响,寻求酒精性痴呆(alcoholassociated dementia,AAD)动物模型的最佳建立方法。方法以SD大鼠为实验对象,选择不同剂量酒精(20%,4～12mL/kg)连续腹腔注射和灌胃,持续周期为14d和28d,并以Morris水迷宫行为学检测、大鼠海马组织形态学变化和神经细胞凋亡检测作为AAD动物模型的评价标准。结果与生理盐水灌胃组〔(5.68±1.30)s〕相比,大鼠在给予低剂量酒精(4mL/kg)灌胃14d后,其逃避潜伏期时间显著延长〔(24.70±5.43)s,P<0.05〕,提示其学习记忆功能受损害;而高剂量(12mL/kg)酒精灌胃组其逃避潜伏期虽有延长趋势〔(9.55±2.30)s〕,但无统计学差异。与生理盐水腹腔注射组〔(5.31±0.85)s〕相比,酒精腹腔注射组大鼠的逃避潜伏期时间亦延长〔(12.49±2.82)s,P<0.05〕。低剂量酒精灌胃可诱导大鼠海马形态结构改变以及促使神经细胞显著凋亡,但高剂量酒精灌胃和酒精腹腔注射组改变不明显。结论酒精灌胃可诱导大鼠学习记忆功能明显损害,是ADD建模的适宜方法,但酒精剂量不宜过高。
- 吴晓牧曾玉娥杨海玉
- 关键词：学习记忆海马凋亡SD大鼠
- 酒精性痴呆大鼠海马神经细胞凋亡与氧化应激的研究被引量：5
- 2013年
- 目的探讨酒精诱导学习记忆功能损害与海马神经细胞凋亡及氧化应激的关系。方法以SD大鼠为实验对象,给予持续28d酒精灌胃(20%,8ml/kg)建立酒精性痴呆大鼠模型,观察大鼠Morris水迷宫行为和海马神经细胞凋亡状况,同时采用比色法检测大鼠血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的变化。结果与生理盐水组(4.52±1.14s)相比,酒精组大鼠的逃避潜伏期时间明显延长(9.08±1.12s)(P<0.05),且其海马区凋亡神经细胞数量明显增加(P<0.01)。氧化应激检测证实与生理盐水组相比,酒精组大鼠血清GSH-Px活性显著抑制(P<0.01),但T-SOD活性改变不明显。结论慢性酒精中毒可导致大鼠学习记忆功能损害,其机制与酒精诱导海马神经细胞凋亡及抑制抗氧化酶活性有关。
- 杨海玉吴晓牧刘勇曾玉娥
- 关键词：学习记忆海马凋亡氧化应激
- 采用诱导分化的SH-SY5Y细胞建立酒精性痴呆体外研究模型的探讨
- 2013年
- 目的建立酒精诱导神经元凋亡的体外模型,探讨酒精性痴呆的发病机制。方法以SH-SY5Y细胞为实验对象,通过维甲酸(RA)诱导细胞分化,之后以不同浓度的酒精作用于细胞,连续培养24h。四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖;碘化丙啶(PI)染色观察细胞凋亡。结果 RA诱导分化后SH-SY5Y细胞表现神经元形态特征,酒精抑制SH-SY5Y细胞增殖并呈浓度依赖关系(P<0.001)。酒精(100mol/L)作用24h后明显诱导细胞凋亡。结论分化后SH-SY5Y细胞对酒精诱导损伤敏感,可用于建立酒精性痴呆体外研究模型。
- 杨海玉刘勇
- 关键词：分化凋亡体外研究
- 乙醇诱导海马损伤与学习记忆功能障碍分子机制关系的研究进展被引量：4
- 2013年
- 长期大量饮酒可引起脑器质性损害,并逐渐发展至痴呆状态,临床以学习记忆功能受损为主要特征。海马具有特殊的神经结构基础,是调控学习记忆功能的关键脑区,且乙醇诱导海马损伤的机制较为复杂,可通过促进海马神经元凋亡、抑制海马神经元成熟分化、破坏突触结构形成、干扰神经递质释放及其受体功能和影响学习记忆相关分子表达等多方面对学习记忆功能造成损害。深入探讨乙醇诱导海马损伤的分子机制,可为寻求乙醇性痴呆治疗方法提供新的研究方向。
- 曾玉娥吴晓牧杨海玉
- 关键词：乙醇学习记忆
- 尾静脉移植骨髓间充质干细胞对酒精性痴呆大鼠的作用被引量：1
- 2013年
- 目的探讨静脉移植骨髓问充质干细胞（BMMSC）治疗酒精性痴呆模型鼠（AAD）的疗效及其机制。方法采用全骨髓贴壁法分离培养大鼠BMMSC并进行流式细胞鉴定。通过持续28d酒精灌胃（20％，8ml／kg）建立AAD大鼠模型，经尾静脉途径将DAPI标记的BMMSC移植至大鼠体内，观察其在海马中的定位，并以Morris水迷宫行为学、海马组织形态和神经细胞凋亡检测作为疗效评价标准。采用免疫组化检测大鼠海马区脑源性神经营养因子（BDNF）阳性细胞的表达以及比色法检测大鼠血清总超氧化物歧化酶（T—SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH．Px）的变化。结果BMMSC高表达CD29、CD90，低表达CD34、CD45，移植后可迁移至大鼠海马区。与PBS组相比，BMMSC移植后大鼠的逃避潜伏期时问明显缩短[（10．17±0．71）S，（4．71±0．34）s，P〈0．01]，且其海马形态结构破坏及神经细胞凋亡明显改善[（72．67±2．73），（55．5±5．14），P〈0．05]。免疫组化结果显示，与PBS组相比，BMMSC组大鼠海马区BDNF的表达显著增高[（71．54±13．71），（135．25±22．20），P〈0．05]。氧化应激检测证实，与PBS组相比，BMMSC组大鼠血清GSH．Px酶活力显著增高[（526．89±62．73）VS．（2592．75±243．73），P〈0．01]，但T—SOD酶活力无明显改变。结论BMMSC移植可改善AAD大鼠学习记忆功能及修复海马组织损伤，其机制可能与促进海马组织BDNF表达及抗氧化应激有关。
- 吴晓牧曾玉娥刘勇何丹杨海玉
- 关键词：骨髓间充质干细胞静脉移植脑源性神经营养因子氧化应激
- 慢性酒精中毒性疾病与泛素-蛋白酶体途径异常调节的研究被引量：3
- 2014年
- 泛素-蛋白酶体途径是细胞内蛋白质降解的主要途径,在多种细胞生命过程中发挥重要作用。目前研究证实慢性酒精中毒可导致泛素-蛋白酶体途径异常调节,主要涉及蛋白酶体活性、泛素分子合成以及相关蛋白分子表达改变等,并且与一些慢性酒精中毒性疾病的发生有关,包括酒精中毒性肝病、酒精中毒性脑病和酒精中毒性肌病。这些发现为进一步揭示酒精诱导损伤的分子机制以及研发治疗慢性酒精中毒性疾病的新型药物提供了重要的研究方向。
- 杨海玉刘勇
- 关键词：慢性酒精中毒泛素-蛋白酶体途径
- 酒精干扰成年海马神经发生与诱导痴呆发病的研究被引量：4
- 2014年
- 酒精中毒是诱导痴呆发病的重要因素。近年来研究证实酒精干扰成年海马神经发生与诱导痴呆发病密切相关。酒精可通过抑制成年海马新生神经元的发生过程而影响学习记忆功能调控,其具体作用机制包括诱导促进神经炎性反应、抑制神经营养因子表达及干扰神经干细胞增殖分化相关信号通路等。目前针对酒精性痴呆患者的治疗手段有限且治疗效果不佳,因此深入阐明酒精导致学习记忆功能障碍的分子机制对于寻求更为有效的治疗方法具有十分重要的意义。
- 杨海玉刘勇
- 关键词：痴呆酒精滥用海马神经发生
