南京市科技发展计划项目(201201064)
- 作品数：7 被引量：16H指数：2
- 相关作者：马定远张菁菁许争峰林颖成建更多>>
- 相关机构：南京医科大学附属南京妇幼保健院南京医科大学更多>>
- 发文基金：南京市科技发展计划项目南京医科大学科技发展基金江苏省临床医学科技专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 多重连接探针扩增技术应用于22q11.2微缺失产前诊断的价值被引量：1
- 2013年
- 目的 探讨多重连接探针扩增（MLPA）技术应用于产前诊断22q11.2微缺失的临床应用价值.方法 选择2011年5月至2012年12月在南京医科大学附属南京妇幼保健院经胎儿超声心动图检查诊断为先天性心脏畸形、常规G显带染色体核型分析正常的胎儿62例,采用MLPA技术检测胎儿是否存在22q11.2微缺失,对阳性样本进行父母溯源;并采用微阵列比较基因组杂交（arrayCGH）技术进行全基因组扫描分析,验证MLPA检测结果.结果 MLPA检测结果显示,在62例心脏畸形胎儿中共检出5例22q11.2微缺失,阳性检出率为8％ （5/62）,其中4例是3M大小的典型微缺失,父母溯源为新发突变;1例是1.5M大小的微缺失,遗传于胎儿父亲.arrayCGH分析验证了22q11.2微缺失的存在及缺失的位置和大小.结论 MLPA用于产前诊断先天性心脏畸形胎儿的22q11.2微缺失具有临床指导价值,可为遗传咨询、生育指导和出生后干预提供依据.
- 罗春玉马定远张菁菁胡平曹荔季修庆周静刘安吴云成建林颖许争峰
- 关键词：染色体缺失产前诊断
- 江苏地区人群21-羟化酶基因拷贝数变异分析被引量：1
- 2013年
- 目的分析江苏地区人群21-羟化酶基因(CYP21A2)拷贝数变异情况,统计CYP21A2基因大片段缺失/转换突变的携带者频率。方法收集400例体检健康者外周血标本,用多重连接依赖探针扩增技术(MLPA)进行CYP21A2基因拷贝数检测,对检测发现的大片段缺失/转换突变样本进行位点特异性PCR-酶切多态分析和基因全长测序分析。结果 400例健康人中389例携带2拷贝CYP21A2基因;11例存在拷贝数变异,其中携带3拷贝CYP21A2基因的个体共10例(2.5%),CYP21A2基因大片段缺失/转换突变携带者1例(0.25%)。对10例携带3拷贝CYP21A2基因的样本测序分析,发现5例携带p.Gln318X致病突变。结论江苏地区人群3拷贝CYP21A2基因的携带者频率较高加索人群低,携带者筛查具有一定检出率。
- 秦岭张菁菁林颖罗春玉季修庆成建马定远许争峰
- 关键词：21-羟化酶缺乏症拷贝数变异
- X连锁腓骨肌萎缩症家系GJB1基因突变分析
- 2013年
- 目的探讨一个腓骨肌萎缩症(Charcot-Marie-Tooth,CMT)家系的分子遗传学病因。方法对先证者及家系成员进行临床分析、电生理检查和系谱分析后,用直接测序法对先证者及家系成员进行GJB1(gap junction proteinβ1)基因突变分析。结果该家系9例患者临床表现及系谱分析符合X连锁显性遗传型CMT(CMTXD)特征;肌电图提示先证者及其父上、下肢多发对称性感觉/运动神经纤维脱髓鞘损害,合并轴索损害;基因分析显示该家系5例患者发生了GJB1 c.44G>A突变,女性为杂合子突变,男性为半合子突变。结论该家系为X连锁显性遗传型CMT家系,GJB1 c.44G>A突变是家系患者的分子遗传学病因。
- 成建林颖季修庆周静张菁菁刘安李璃马定远许争峰
- 关键词：腓骨肌萎缩症X连锁遗传
- 21-羟化酶缺乏症基因型和临床表型分析被引量：8
- 2013年
- 目的了解21-羟化酶缺乏症(21-OHD)患儿CYP21A2基因突变热点,并分析其基因型和表型的关系。方法对在新生儿17α羟孕酮(17-αOHP)筛查中发现并诊断的18例21-OHD患儿及其父母,采用等位基因特异性PCR-直接测序联合多重连接依赖探针扩增技术测定其基因型。结果共检出6种CYP21A2基因突变类型,最常见的为I2G(44.4%)和de(l33.3%),这两种也是失盐型常见的突变;单纯男性化型患儿I172N突变检出率达75%。根据对21-羟化酶活性影响程度将患儿分为重度、中度和轻度组,三组间反映病情严重性的指标17-αOHP、促肾上腺皮质激素、睾酮的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 21-OHD基因诊断技术的建立揭示了基因型和临床表型的一致性。
- 孙云马定远蒋涛陈玉林孙亦骏杨冰张瑾黄美莲许争锋
- 关键词：突变基因型
- 磁珠法DNA提取技术在多重连接依赖探针扩增检测中的应用被引量：1
- 2014年
- 目的探讨磁珠法DNA提取技术在多重连接依赖探针扩增(MLPA)检测样品制备中的应用价值。方法分别用半自动磁珠法和手工离心柱法提取1例21-羟化酶缺乏症患者和16例健康男性外周血、16例羊水细胞标本的基因组DNA,用MLPA法检测CYP21A2基因拷贝数,比较两种方法制备DNA的质量及MLPA结果。用磁珠法提取200例羊水细胞DNA,MLPA法检测染色体非整倍体异常表达情况。结果磁珠法提取外周血DNA的浓度和总量均高于离心柱法(P<0.05)。两种方法提取羊水DNA浓度相当,磁珠法所得总量较高(P<0.05)。21-羟化酶缺乏症患者CYP21A2基因拷贝数比值接近0.5。200例羊水标本中检出正常二倍体188例,21三体9例,18三体2例,特纳(Turner)综合征(45,X)1例,与核型分析结果一致。结论磁珠法制备的外周血和羊水细胞DNA适用于MLPA检测,具有较高的应用价值。
- 秦岭张菁菁林颖罗春玉季修庆成建马定远许争峰
- 关键词：磁珠法DNA提取
- 21-羟化酶缺陷症基因诊断方法的建立及应用被引量：8
- 2013年
- 目的建立21-羟化酶缺陷症的基因诊断方法并评价其临床应用价值。方法收集9例肾上腺皮质增生症患儿血样，采用全长基因直接测序法分析21-羟化酶编码基因CYP21A2的点突变，同时采用多重连接依赖探针扩增技术和位点特异性PCR-酶切多态分析大片段的CyP2IA2基因缺失或（和）转换突变。同时对患儿的双亲也进行了基因检测。结果9例患儿共发现点突变5种，分别为IVS2-13A／C〉G（9个等位基因）、P．Arg356Trp（1个等位基因）、ClusterE6（1个等位基因）、P．Gln318X（1个等位基因）和Promcony（1个等位基因）。除Promcony不能明确其功能外，其它4种均为致病突变。检测到的基因缺失或（和）转换突变有两种，一种为大片段缺失，导致CYP21A2基因单拷贝缺失，共发现3例患者（3个等位基因），另一种为CYP21A2基因重排后形成的CYP21AIP／CYP21A2嵌合基因，共发现3例患者（3个等位基因），并应用建立的基因诊断方案确定了全部患者的基因型。所有的突变均遗传自亲代。结论建立了21-羟化酶缺陷症的基因诊断方法。该方法不仅能特异性地检测点突变，而且能够检测大片段的缺失或（和）转换突变，因此具有较高的临床应用价值。
- 马定远孙云陈玉林杨冰成建黄美莲张瑾张菁菁胡平林颖蒋涛许争峰
- 关键词：先天性肾上腺皮质增生症21-羟化酶突变
- 用多重连接依赖探针扩增技术进行Y染色体微缺失的产前诊断
- 2012年
- 目的探讨多重连接依赖探针扩增(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)技术在Y染色体微缺失产前诊断中的应用价值。方法收集4例染色体为46,XYqh-和1例染色体46,X,+mar的羊水样本,用MLPA P095染色体非整倍体检测试剂盒和Y染色体微缺失检测试剂盒分别对5例羊水样本进行检测。结果 4例Yqh-染色体的羊水样本的Y染色体信号值均在正常范围内,即Y染色体不存在微缺失,1例小Mar染色体为Y染色体;进一步用Y染色体探针检测结果示,Y染色体上AZFb和c区存在大片段缺失。结论用MLPA技术对疑似Y染色体微缺失的病例进行检测,可判断是否存在Y染色体生精功能区域的缺失,为产前诊断提供分子遗传学依据。
- 张菁菁刘安周静李璃季修庆林颖胡平马定远许争峰
- 关键词：Y染色体微缺失产前诊断
