黑龙江省农垦总局科技攻关项目(HNKXIV-08-03-01)
- 作品数：4 被引量：13H指数：3
- 相关作者：倪宏波闻晓波冉旭华朴范泽周恩民更多>>
- 相关机构：黑龙江八一农垦大学讷河市畜牧水产技术推广中心更多>>
- 发文基金：黑龙江省农垦总局科技攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪一般型生殖道放线菌的分离鉴定与系统进化分析被引量：1
- 2009年
- 2007年4月,从患有化脓性肺炎、化脓性关节炎和心内膜炎的8周龄病死仔猪内脏器官中分离到一株细菌,对其进行了种属关系鉴定、致病性及药物敏感性等研究。首先从表型特征和生化特性方面进行鉴定,然后应用分子技术对其16SrDNA进行测序分析,最后进行了动物实验和药物敏感性实验。该细菌表型特征和生化特性表明其与生殖道放线杆菌(A.hyovaginalis)非常相似;对16S rDNA测序结果分析发现其与A.hyovaginalisIII群菌株同源性高达99.2%,系统进化分析也表明分离株与A.hyovaginalisIII群菌株亲缘关系最近;对小白鼠具有较强的致病性;对红霉素、庆大霉素和阿米卡星等药物高度敏感。因此,证实分离菌株为有致病性的A.hyovaginalisIII型。
- 周玉龙董华兴侯喜林邵红夏成倪宏波朴范泽
- 关键词：系统发育分析
- 猪生殖与呼吸综合征病毒△Gp5/M/N串联基因的克隆及原核表达被引量：3
- 2009年
- 采用RT-PCR方法从猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株VR2332中扩增△Gp5、M和N基因片段,通过重组PCR方法得到串联基因△Gp5/M/N,将其克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,并转化大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)pLysS,筛选表达PRRSV pET-△Gp5/M/N蛋白的菌株。经IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE分析和Western-blotting。结果表明,PRRSV pET-△Gp5/M/N蛋白在大肠杆菌中以包涵体的形式表达,纯化后的蛋白可与PRRSV阳性血清发生特异性反应。证明原核表达系统表达的PRRSV pET-△Gp5/M/N蛋白具有良好的反应原性。
- 邵磊冉旭华闻晓波倪宏波王密朴范泽
- 关键词：猪生殖与呼吸综合征病毒M基因N基因原核表达
- 检测PRRSV抗体的间接阻断ELISA方法的建立被引量：6
- 2008年
- 用大肠杆菌BL21(DE3)pLysS表达PRRSV重组N蛋白作为包被抗原,建立检测猪群PRRSV抗体的间接阻断ELISA方法,并对临床上采集的256份猪血清样本进行检测,结果66份呈阳性,用IDEXXPRRSV抗体检测试剂盒检测,检出的阳性血清为63份,两者的符合率为98.8%。Western blot检测结果58份阳性,两者的符合率为96.9%。试验结果表明,本试验所建立的间接阻断ELISA方法具有良好敏感性和特异性,可用于PRRS流行病学调查和疾病的诊断。
- 冉旭华赵喜红闻晓波倪宏波李树东周恩民
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒重组N蛋白流行病学调查
- 猪肺炎支原体、多杀性巴氏杆菌和猪胸膜肺炎放线杆菌三重PCR检测方法的建立被引量：3
- 2010年
- 为建立简便、快速及灵敏度高的同时对猪肺炎支原体(Mh)、多杀性巴氏杆菌(PM)和猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(App)三重PCR的检测方法,本研究针对这3种病原的基因分别设计3对特异性引物,通过PCR方法分别扩增出116bp(Mh)、253bp(PM)和473bp(App)的目的片段,其最低检出量为4个拷贝;而对肺炎双球菌、支气管败血波氏杆菌、副猪嗜血杆菌和链球菌的PCR扩增则结果均呈阴性。表明该方法具有很好的敏感性和特异性。利用该检测方法对某屠宰场472头猪肺组织病料进行检测,其结果显示:Mh、PM和App的阳性检出率分别为19.27%、5.5%和2.75%;而ELISA检测的阳性检出率分别为18%、5.08%和1.9%。这两种方法对阳性的样品检测的平均符合率为90%;此外,多重PCR与病原分离培养方法的符合率为100%。
- 李鹏马艳娇夏伟郜冬雪倪宏波
- 关键词：猪支原体肺炎猪传染性胸膜肺炎
