国家教育部博士点基金(20070001713)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：陈应泰杨帆姜冠潮刘军陈克终更多>>
- 相关机构：北京市海淀医院北京大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肺癌相关基因SLC35F2RNA干扰重组慢病毒载体的构建和鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的 针对肺癌相关基因SLC35F2构建RNA干扰（RNAi）重组慢病毒质粒并进行慢病毒包装,建立SLC35F2表达稳定抑制的H1299肺癌细胞株,并探讨SLC35F2基因的功能.方法 应用pGCSIL-PUR慢病毒载体构建针对SLC35F2的ShRNA载体,转染包装293T细胞,收集病毒上清转染肺癌细胞株H1299,经嘌呤霉素（puromycin）筛选并扩大培养得到稳定克隆;实时荧光定量聚合酶链反应（Real-time PCR）和Western blot检测癌细胞内SLC35F2的表达;CCK-8比色法检测细胞增殖;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡.结果 成功构建SLC35F2-ShRNA慢病毒载体（SLC-siRNA）及SLC35F2表达稳定抑制的肺癌细胞株,经过检测证实SLC-siRNA慢病毒载体对SLC35F2的抑制效率达81.8%;CCK-8检测显示SLC-siRNA稳定转染的H1299细胞株生长抑制率达16.3%,稳定转染株凋亡细胞百分比较阴性对照组明显升高（14.88%比3.16%,P＜0.05）.结论 慢病毒载体介导的靶向SLC35F2的RNAi可有效抑制SLC35F2表达,降低肺癌细胞的增殖能力,增加其凋亡比例.
- 黄宇清李晓陈克终陈应泰杨帆姜冠潮刘军王俊
- 关键词：肺癌RNAI慢病毒载体细胞增殖
