广西科技创新能力与条件建设项目(08D5-01D)
- 作品数：1 被引量：9H指数：1
- 相关作者：熊毅曾宪垠龙剑明刘棋徐贤坤更多>>
- 相关机构：广西动物疫病预防控制中心广西大学四川农业大学更多>>
- 发文基金：广西科技创新能力与条件建设项目公益性行业(农业)科研专项广西壮族自治区科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 牛结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白的原核表达及其在牛结核病检测中的应用被引量：9
- 2009年
- 采用重组PCR技术从牛结核分枝杆菌AN5基因组DNA中扩增CFP10-ESAT6融合基因,并将其定向克隆至原核表达载体pET-32a,构建了原核表达质粒pET-CFP10/ESAT6。重组子经酶切及测序鉴定后转化至大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导后经SDS-PAGE电泳鉴定,获得约42 ku带有6×His蛋白标签的rHIS-CFP10/ESAT6融合蛋白,表达量约占菌体总蛋白的40%。用HIS蛋白纯化柱纯化该蛋白,Western-blot分析显示,该融合蛋白能与抗牛结核分枝杆菌阳性血清发生特异性反应。将重组的该融合蛋白用于刺激单次皮内变态反应阳性牛全血,可以产生高水平的IFN-γ,其特异性优于结核菌素。结果表明,获得的重组融合蛋白rHIS-CFP10/ESAT6为牛结核病的诊断奠定了基础。
- 徐贤坤熊毅龙剑明刘棋曾宪垠
- 关键词：牛结核病融合蛋白CFP-10ESAT-6
