宁夏回族自治区自然科学基金(NZ11107)
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 相关作者：冉林武刘洋洋范学文陈健茂杨文博更多>>
- 相关机构：宁夏医科大学银川市第一人民医院更多>>
- 发文基金：宁夏回族自治区自然科学基金国家自然科学基金更多>>
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- 老瓜头生物总碱对LPS诱导RAW264.7细胞中COX-2酶活性、mRNA及蛋白表达的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:研究老瓜头生物总碱(TACKI)对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7在COX-2酶活性、基因表达及蛋白表达的影响。方法:采用LPS诱导RAW264.7细胞作为炎症模型,以非甾体抗炎药选择性COX-2酶抑制剂塞来昔布作为阳性对照。MTT比色法分析TACKI对RAW264.7生长活性的影响,LPS长时间刺激RAW264.7,ELISA检测细胞上清液中前列腺素-E2(PGE2)活性,以PGE2的活性反映COX-2的酶活性,半定量RT-PCR检测RAW264.7细胞中COX-2 mRNA的表达,免疫荧光观察RAW264.7细胞中COX-2的表达,Western blotting法检测COX-2蛋白表达。结果:与LPS组比较,TACKI 0.1,1μg·L-1能减弱COX-2酶活性(P<0.05),TACKI 0.01,0.1,1μg·L-1可下调COX-2 mRNA的表达(P<0.05),TACKI 0.1,1μg·L-1能减少COX-2蛋白表达(P<0.05)。结论:TACKI减弱LPS诱导RAW264.7细胞COX-2酶活性,对LPS诱导RAW264.7细胞中COX-2基因表达及蛋白表达抑制作用明显。
- 杨琤琤陈亚寒杨文博冉林武杨卫东
- 关键词：环氧合酶-2脂多糖
- 不同硒源对人脐静脉内皮细胞活性的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨不同浓度硒蛋氨酸(Se-Met)与亚硒酸钠(Na_2SeO_3)对人脐静脉内皮细胞活性的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),观察不同浓度(0、0.3、0.6、1.2、1.8、2.4μmol·L^(-1))Se-Met与Na_2SeO_3对HUVECs细胞增殖、培养液中乳酸脱氢酶(LDH)和胞内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的影响。结果与对照组相比,0.6~2.4μmol·L^(-1)的Se-Met和0.6~1.2μmol·L^(-1)的Na_2SeO_3能显著提高HUVECs的活性,提高胞内GSH-Px的活力(P<0.05);而1.8~2.4μmol·L^(-1)的Na_2SeO_3显著降低HUVECs的活性,降低胞内GSH-Px的活力,增加培养液内LDH的漏出(P<0.05),且细胞形态出现损伤样改变;在1.8~2.4μmol·L^(-1)范围内,同浓度Se-Met组比Na_2SeO_3组能显著提高HUVECs活性,提高胞内GSH-Px活力,减少LDH漏出(P<0.05)。结论一定浓度的硒可以提高内皮细胞的活性,提高细胞内GSH-Px的活力和减少LDH的漏出,Se-Met较Na_2SeO_3毒性小,作用温和。
- 刘洋洋范学文陈健茂冉林武
- 关键词：人脐静脉内皮细胞乳酸脱氢酶谷胱甘肽过氧化物酶
- 人原代脐静脉内皮细胞体外模型的建立及鉴定被引量：2
- 2016年
- 目的探寻一种简单、有效的人脐静脉内皮细胞体外培养方法,为心脑血管疾病研究提供细胞模型。方法 0.1%II型胶原酶和0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA(1∶1)灌注分离人脐静脉内皮细胞,细胞置于DMEM培养基中,37℃、5%CO_2培养箱内培养,倒置相差显微镜观察细胞生长情况,激光共聚焦显微镜鉴定Ⅷ因子相关抗原和透射电镜观察细胞超微结构。结果细胞分离0h时,混杂较多红细胞,24h后细胞呈球形、小多角形、椭圆形,呈簇状分布,3d后变成梭形单层铺路石状;共聚焦扫描见胞浆中Ⅷ因子相关抗原呈阳性;透射电镜可见胞浆内有Weibel-Palade小体。结论 0.1%胶原酶II和0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA混合消化液灌注是获得人脐静脉内皮细胞的一种可靠方法,细胞纯度高、活性好。
- 刘洋洋冉林武范学文陈健茂
- 关键词：人脐静脉内皮细胞原代培养
