国家自然科学基金(30672430)
- 作品数：2 被引量：10H指数：1
- 相关作者：张宏方张勇张怡敏董邦权环诚更多>>
- 相关机构：第四军医大学第四军医大学西京医院陕西中医药大学更多>>
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- 真核表达载体PcDNA3.0-AIF△1-480构建及其促凋亡活性的研究被引量：1
- 2013年
- 目的:构建AIF截短后只保留羧基端促凋亡结构域的真核表达载体,了解其是否有促凋亡活性作用及其机制。方法:通过PCR方法构建出AIF截短体AIF△1-480的真核表达载体。采用脂质体将该载体瞬时转染人乳腺癌细胞系MCF-7细胞,采用流式细胞技术检测其对肿瘤细胞凋亡的诱导作用,同时采用JC-1流式细胞技术检测其对线粒体膜电位的影响。选取5～7周龄BALB/c雌性裸鼠35只,构建荷瘤裸鼠模型,并在体内实验中检测该载体的促凋亡活性作用。结果:成功构建真核表达载体PcDNA3.0-AIF△1-480,并经酶切鉴定和DNA测序证明。在体外实验中,与对照组相比该载体能够诱导MCF7细胞发生凋亡,对照组、PcDMA3.0组和PcDNA3.0-AIF△1-480组凋亡率分别为0.01%、16.01%和28.55%。同时MCF7细胞转染该载体后能够使线粒体膜电位发生去极化,导致凋亡的发生,对照组、PcD-MA3.0组和PcDNA3.0-AIF△1-480组凋亡率分别为2.26%、60.37%和95.78%。在荷瘤裸鼠模型中,转染该载体后能够抑制肿瘤的生长,至观察终点中位肿瘤体积分别为1 187.2、1 000.0和609.4mm3。结论:截短后只保留羧基端的AIF仍然有促凋亡活性作用,其机制是通过改变线粒体膜电位来发挥促凋亡作用。
- 赵悦肖华卫王乐王丽娟李萌金桂花周侠朱青
- 关键词：真核表达载体AIF凋亡
- 姜黄素对耐药细胞株K562/ADM的耐药逆转作用研究被引量：9
- 2009年
- 目的:研究姜黄素对慢性粒细胞白血病多药耐药细胞株K562/ADM中多药耐药基因mdrl表达的下调作用。方法:采用RT-PCR和Western blot方法检测各处理组K562/ADM细胞株中mdr1基因表达;利用MTT试验检测姜黄素处理后K562/ADM细胞株对阿霉素敏感性的改变。结果:姜黄素抑制了K562/ADM细胞株中多药耐药基因mdr1的表达,姜黄素明显增加K562/ADM细胞株对阿霉素的敏感性。结论:姜黄素通过抑制P-gp的药物外排作用有效逆转K562/ADM细胞株的多药耐药性。
- 张怡敏董邦权海文利张宏方叶峥嵘环诚张勇
- 关键词：姜黄素慢性粒细胞白血病多药耐药
