湖北省自然科学基金(2008CDA073)
- 作品数：6 被引量：40H指数：2
- 相关作者：郭爱珍陈焕春刘颖杨利国于清龙更多>>
- 相关机构：华中农业大学更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家重点基础研究发展计划艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 国内外牛结核病的防控历史与现状
- 牛结核病是主要由牛分枝杆菌引起的、慢性消耗性人兽共患传染病,对养牛业发展、食品安全与人类健康具有重大威胁。由于牛分枝杆菌宿主范围广,牛结核病无特异性疫苗,和快速诊断方法等原因,控制或根除牛结核病非常困难。目前已有许多发达...
- 陈焕春郭爱珍
- 文献传递
- 奶牛α-干扰素克隆表达和生物学活性分析被引量：2
- 2010年
- 提取经植物血凝素诱导培养的我国健康奶牛外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增出奶牛α-干扰素(BoIFN-α)成熟蛋白基因并将其克隆到pMD18-T载体上,测序结果表明,扩增片段为牛α-干扰素成熟蛋白序列,与GenBank上发表的干扰素序列同源性为100%。将其重组到原核表达载体pET32a(+)上,并在大肠杆菌BL21中实现了高效表达,表达产物以His-Tag融合蛋白的形式存在。用镍亲和层析法对蛋白进行纯化,并利用VSV-MDBK/IBRV细胞系统分析其生物活性。重组奶牛α-干扰素对VSV的抗病毒活性为4.26×105U/mL,对IBRV的抗病毒活性为8.91×104U/mL。结果表明,重组奶牛α-干扰素特异性好,而且抗病毒活性比较稳定。
- 刘颖刘华兰杨利国陈焕春郭爱珍
- 关键词：奶牛Α-干扰素融合蛋白抗病毒活性
- 梅花鹿γ-干扰素在不同真核细胞系中稳定表达的研究被引量：2
- 2010年
- 提取经植物血凝素诱导培养的梅花鹿外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增出梅花鹿γ-干扰素成熟蛋白基因,经克隆测序表明与GenBank上发表的干扰素序列同源性为100%。将其重组到含有CMV增强子的真核表达载体质粒pCI-neo上。利用磷酸钙介导转染法将重组载体质粒pCI-neo-CerIFN-γ转染入中国仓鼠肾细胞(BHK-21)和牛肾细胞(MDBK)中,在G418抗性压力下进行筛选培养获得了稳定分泌表达的转染细胞系。通过Western blotting检测确定表达产物的相对分子质量分别为23、20、16ku,与预测大小一致。本研究成果为进一步开发梅花鹿生物制品类治疗制剂奠定了基础。
- 刘颖王冰于清龙熊家军杨利国陈焕春郭爱珍
- 关键词：梅花鹿Γ-干扰素细胞系真核表达
- 牛结核病流行特点及防控措施被引量：29
- 2010年
- 牛结核病是一种慢性消耗性人兽共患病,是OIE规定必须通报的疫病,在我国属二类动物传染病,并列为检疫扑杀对象,对养牛业发展、食品安全与人类健康构成重大威胁。目前普遍采用检疫和扑杀政策控制牛结核,但各个国家执行该政策的方式差异很大。由于牛分枝杆菌存在野生动物贮主,潜伏感染普遍、无快速高通量诊断方法等原因,控制或根除牛结核病非常困难。少数发达国家成功控制或净化了牛结核,但多耗时在二十年以上,耗资巨大。新型诊断方法如IFN-γ在当代牛结核检疫中发挥日益重要的作用,野生动物与家养牛结核的免疫预防已受关注。制约我国牛结核控制和净化的原因很多,如政策法规、国家财力、技术措施和公众认知水平等,目前尚未设定全国性的牛结核控制与净化目标。
- 郭爱珍陈焕春
- 关键词：牛结核病
- 梅花鹿γ-干扰素在牛型结核病中的应用研究进展
- 2009年
- 梅花鹿γ-干扰素是细胞因子超家族中干扰素家族的特殊重要成员之一,具有广泛的生物学功能。其功能的多样性是通过诱导细胞表达多种蛋白质实现的。对梅花鹿γ-干扰素的诱导与产生、结核病特异性基因、梅花鹿γ-干扰素用于牛型结核病的检测原理及γ-干扰素优劣的研究进展进行综述。
- 刘颖王冰陈伟郭爱珍
- 关键词：梅花鹿Γ-干扰素结核杆菌
- 奶牛β-干扰素在大肠杆菌中高效表达和生物活性分析被引量：2
- 2010年
- 提取经植物血凝素诱导培养的中国健康奶牛外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增出奶牛β-干扰素成熟蛋白基因并将其克隆到pMD18-T载体上。测序结果表明,扩增片段为奶牛β-干扰素成熟蛋白序列,与GenBank上发表的干扰素序列同源性为100%。将其重组到原核表达载体pET32a(+)上,并在大肠杆菌BL21中实现了高效表达。表达产物以His-Tag融合蛋白的形式存在,表达量约占细菌总蛋白的40%。用镍亲和层析法对蛋白进行纯化,并利用VSV-MDBK/IBRV细胞系统分析其生物活性。重组奶牛β-干扰素抗病毒活性分别约3.16×105U/mL,7.5×104U/mL。结果表明,重组奶牛β-干扰素特异性好,而且抗病毒活性比较稳定。本研究为研制和开发重组奶牛β-干扰素类生物制品研发奠定了基础。
- 刘颖刘华兰杨利国陈焕春郭爱珍
- 关键词：奶牛Β-干扰素融合蛋白抗病毒活性
- 奶牛β-干扰素在大肠杆菌中高效表达和生物活性分析
- 提取经植物血凝素诱导培养的我国健康奶牛外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增出奶牛β-干扰素成熟蛋白基因并将其克隆到pMD18-T载体上,测序结果表明,扩增片段为奶牛β-干扰素成熟蛋白序列,与GenBank上发...
- 刘颖刘华兰杨利国陈焕春郭爱珍
- 关键词：奶牛Β-干扰素融合蛋白抗病毒活性
- 文献传递
- 奶牛α-干扰素克隆表达和生物学活性分析
- 提取经植物血凝素诱导培养的我国健康奶牛外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增出奶牛α-干扰素(BoIFN-α)成熟蛋白基因并将其克隆到pMD18-T载体上,测序结果表明,扩增片段为牛α-干扰素成熟蛋白序列,与G...
- 刘颖刘华兰杨利国陈焕春郭爱珍
- 关键词：奶牛Α-干扰素融合蛋白抗病毒活性
- 文献传递
- 梅花鹿γ干扰素克隆表达及抗病毒活性测定被引量：7
- 2009年
- 提取经植物血凝素诱导培养的梅花鹿外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增出梅花鹿γ干扰素成熟蛋白基因并将其克隆到pMD18-T载体上,测序结果表明,扩增片段为梅花鹿γ干扰素成熟蛋白序列,与GenBank上发表的干扰素序列同源性为100%。将其重组到原核表达载体pET32a(+)上,并在大肠埃希菌BL21中实现了高效表达。表达产物以His-Tag融合蛋白的形式存在,表达量约占细菌总蛋白的32.6%。用镍亲和层析法对蛋白进行纯化,并利用VSV-MDBK/IBRV细胞系统分析其生物活性,重组梅花鹿γ干扰素抗病毒活性分别约为7.25×104U/mL和4.61×104U/mL。结果表明,重组梅花鹿γ干扰素特异性好,而且抗病毒活性比较稳定。
- 刘颖刘冬光廖娟红于清龙熊家军杨利国陈焕春郭爱珍
- 关键词：梅花鹿Γ干扰素抗病毒活性
- 牛结核病的防制
- ＜正＞牛结核病是主要由牛分枝杆菌引起的、慢性消耗性人兽共患传染病。据不完全统计,世界范围内有5000万头牛感染了结核,造成的经济损失每年达30多亿美元。同时,牛分枝杆菌宿主范围广泛,可感染约50多种哺乳动物及25种禽类。...
- 郭爱珍
- 文献传递
