国家自然科学基金(81371730)
- 作品数：12 被引量：25H指数：3
- 相关作者：朱启星张家祥臧丹丹杨鹏王峰更多>>
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- 三氯乙烯致敏小鼠Tc1/Tc2细胞失衡研究被引量：1
- 2014年
- 目的检测小鼠经三氯乙烯(TCE)致敏后Tc1、Tc2细胞的变化,探讨Tc1/Tc2细胞失衡在三氯乙烯药疹样皮炎(DMLT)中的可能作用。方法 BALB/c雌性小鼠随机分为空白对照、溶剂对照和TCE处理组,在末次激发后24、48、72h和7 d根据皮肤肿胀程度和病理表现分为致敏组和未致敏组。无菌取出脾脏,用流式细胞术检测Tc1、Tc2细胞数量,实时荧光定量PCR检测T-bet、GATA-3 mRNA转录水平。结果与未致敏组相比,致敏组Tc1细胞数量在24、48、72 h和7 d显著上升(P<0.01),72 h水平最高;致敏组Tc2细胞数量在24、48、72 h显著上升(P<0.01),72 h水平达到峰值,7d较未致敏组差异无统计学意义(P>0.05);致敏组Tc1/Tc2比例于48、72 h和7 d较未致敏组显著上升(P<0.01)。致敏组T-bet、GATA-3 mRNA转录水平在48、72 h和7 d较相应时点未致敏组显著上升(P<0.05,P<0.01),72 h达到峰值。结论 Tc1/Tc2细胞失衡可能参与了TCE致敏小鼠的免疫损伤过程并发挥重要的作用。
- 张澄王峰冷静査晚生张家祥李树龙王慧沈彤朱启星
- 关键词：三氯乙烯细胞毒性T细胞BALB/C小鼠
- 补体调节蛋白CD55在三氯乙烯致敏小鼠免疫性肝损伤中的作用被引量：1
- 2017年
- 目的 检测三氯乙烯（TCE）致敏小鼠肝脏中补体调节蛋白CD55的表达水平,探讨其在补体介导的TCE所致小鼠免疫性肝脏损伤中的作用.方法 选取6～8周无特定病原体（SPF）级雌性BALB/c小鼠随机分成空白对照组（5只）、溶剂对照组（5只）和TCE处理组（15只）,建立BALB/c小鼠致敏模型,末次激发后24 h根据小鼠皮肤致敏反应评分将TCE处理组小鼠分为致敏组和未致敏组,并于末次激发后的48 h采血,无菌取小鼠肝脏组织.运用全自动生化分析仪检测小鼠肝功能指标谷丙转氨酶（ALT）,并对肝脏进行病理组织学观察,免疫组织化学（IHC）法检测肝脏中C5b-9沉积水平,IHC法及蛋白免疫印迹（Western blotting）法检测肝脏组织CD55蛋白表达变化情况,定量反转录聚合酶连锁反应（qRT-PCR）检测小鼠肝脏中CD55 mRNA表达水平.结果 TCE致敏组血清ALT水平明显高于溶剂对照组和TCE未致敏组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.病理组织学结果显示,TCE致敏组肝细胞发生气球样变性、坏死.TCE致敏组肝脏组织C5b-9沉积水平明显高于溶剂对照组和TCE未致敏组,各组组化评分差异均有统计学意义（P＜0.05）;TCE致敏组CD55蛋白表达评分明显低于溶剂对照组和TCE未致敏组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.Western blotting法结果显示,TCE致敏组CD55表达较溶剂对照组和TCE未致敏组降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）.TCE致敏组肝脏组织CD55 mRNA表达水平明显低于溶剂对照组和TCE未致敏组,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 补体激活可能参与TCE致敏小鼠免疫性肝损伤过程,且补体调节蛋白CD55表达的改变可能在其中发挥重要作用.
- 王贤张澄杨小东李博栋臧丹丹杨鹏张家祥朱启星
- 关键词：三氯乙烯小鼠CD55CD55
- 激肽释放酶激肽系统活化在三氯乙烯致敏小鼠肾脏损伤中的作用被引量：1
- 2016年
- 目的观察使用血浆激肽释放酶激肽系统（kallikrein—kinin system，KKS）抑制剂前后，小鼠血浆中补体C3片段C3b，iC3b，C5b-9蛋白沉积与血浆KKS系统指标的相关性，探讨KKS在三氯乙烯（triehloroethylene，TCE）致敏小鼠肾脏损伤中的作用。方法将雌性BALB／c小鼠（6-8周）随机分为空白对照组（5只）、溶剂对照组（5只）、TCE处理组（15只）、PKSI-527＋TCE处理组（15只），在实验第1、3、7、10天进行致敏处理，第17、19天进行首次和末次激发，每次激发前24h对TCE＋PKSI-527处理组的小鼠腹腔注射KKS抑制剂PKSI-527（50mg／kg）。末次激发72h后，检测小鼠肾脏功能；实时定量PCR检测各组小鼠肾脏中B1R，B2R mRNA表达；免疫组化检测各组小鼠肾脏补体C3片段C3b，iC3b，C5b-9蛋白沉积。结果与溶剂对照组比较，TCE致敏组及TCE＋PKSI-527致敏组血清中BUN、Cr水平及B1R、B2R mRNA表达均明显升高，差异均有统计学意义（P〈0．05）；TCE致敏组及TCE＋PKSI-527致敏组补体C3片段C3b，iC3b，C5b-9蛋白沉积明显升高；与TCE致敏组比较，TCE＋PKSI-527致敏组血清中BUN、Cr水平及B1R、B2R mRNA表达明显降低，差异均有统计学意义（P〈0.05）；TCE＋PKSI-527致敏组补体C3片段C3b、iC3b、C5b-9蛋白沉积降低。结论KKS系统激活可能是通过上调补体系统参与了TCE致敏小鼠肾脏损伤过程。
- 刘敏张澄杨鹏黄建臧丹丹张家祥朱启星
- 关键词：三氯乙烯补体血尿素氮
- 细胞毒性T淋巴细胞在药疹发病机制中的作用被引量：2
- 2015年
- 药疹是一种常见的迟发型超敏反应，通常有3种理论解释其发生机制，即药物半抗原、前半抗原和p-i理论，而药物特异性的细胞毒性T淋巴细胞在其病理过程中至关重要。经典理论认为，细胞毒性T淋巴细胞主要为CD8＋T细胞，但是有证据表明，CD4＋T细胞等其他表型的免疫细胞也具有细胞毒性，在药疹发病过程中发生特异性激活，接触靶细胞并释放毒性分子。靶细胞能够为药物代谢、炎症发生和自身凋亡提供有利环境，协助细胞毒性T淋巴细胞发挥作用。另外，“危险信号假说”认为危险信号在免疫激活中具有重要的作用，进一步补充完善药疹的发病机制。
- 张澄刘敏朱启星
- 关键词：药疹T淋巴细胞细胞毒性CD8阳性T淋巴细胞CD4阳性T淋巴细胞
- 经水摄入三氯乙烯对BALB/c小鼠干扰素-γ和白细胞介素-4的影响被引量：2
- 2014年
- 探讨经水摄入三氯乙烯(TCE)对BALB/c小鼠的干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)的影响。将60只BALB/c雌性小鼠随机分为3组:空白对照组、溶剂对照组和TCE染毒组,每组20只,TCE染毒组经饮水摄入2.5g/L TCE,染毒2、4、8、12周,每组各处死5只小鼠,取其外周血和脾脏。利用免疫组化法检测脾脏组织中IFN-γ和IL-4的表达,ELISA法检测外周血血清中IFN-γ和IL-4的含量。与空白对照组和溶剂对照组相比,TCE染毒组小鼠脾脏与血液中IFN-γ和IL-4的表达明显上升,IFN-γ/IL-4比例明显下降,且差异有统计学意义。经水摄入TCE能够同时上调小鼠体内IFN-γ和IL-4的表达,进而可能上调Th1和Th2细胞免疫应答,而Th2细胞上调更占优势,故Th1/Th2比例下降。
- 李树龙俞韵王慧周承藩朱启星
- 关键词：三氯乙烯TH1TH2干扰素-Γ白细胞介素-4
- 补体调节蛋白CD46在聚肌胞苷酸加重三氯乙烯致敏小鼠肝损伤中的表达规律被引量：4
- 2017年
- [目的]研究补体调节蛋白CD46在聚肌胞苷酸(poly I∶C)加重三氯乙烯(TCE)致敏小鼠免疫性肝损伤中的表达和转录水平。[方法]6~8周的雌性BALB/c小鼠36只,随机分为空白对照组(4只),溶剂对照组(4只),TCE组(15只),TCE+poly I∶C组(13只),适应性喂养1周,于第1、4、7、10天作致敏处理,第17、19天作激发处理,TCE+poly I∶C组于末次激发前3 h腹腔注射100μL含50μg poly I∶C的液体。末次激发24 h后进行皮肤评分,48 h后取小鼠血清及肝脏,试剂盒检测丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST),HE染色法观察小鼠肝脏病理,免疫组化法检测小鼠肝脏CD46和C3片段的表达,RT-PCR法检测肝脏CD46 m RNA表达水平。[结果]空白对照组与溶剂对照组小鼠背部皮肤无水肿与红斑,TCE处理组致敏率33.3%(5/15),TCE+poly I∶C处理组致敏率38.5%(5/13),差异无统计学意义。与溶剂对照组比较,TCE致敏组和TCE+poly I∶C致敏组肝脏系数升高,差异有统计学意义(P<0.01)。血清ALT和AST值在空白对照组、溶剂对照组以及未致敏组之间的差异均无统计学意义;与溶剂对照组相比,TCE致敏组和TCE+poly I∶C致敏组ALT和AST值升高,TCE+poly I∶C致敏组ALT和AST值相对TCE致敏组升高,差异有统计学意义(P<0.01)。肝脏病理检测发现TCE致敏组小鼠细胞形态异常,部分区域出现细胞水肿,而TCE+poly I∶C致敏小鼠肝脏出现大面积的细胞空泡样变性,肝细胞浆疏松且伊红染色变浅。小鼠肝脏免疫组化显示TCE致敏组C3片段少量沉积,TCE+poly I∶C组C3片段大量沉积,空白对照组、溶剂对照组与未致敏组则未发现。小鼠肝脏免疫组化显示CD46在肝脏细胞膜部位表达,空白对照组、溶剂对照组以及未致敏组高表达,TCE致敏组表达减少,而TCE+poly I∶C致敏组CD46表达极少。肝脏CD46转录水平在空白对照组、溶剂对照组以及未致敏组之间差异均无统计学意义;与溶剂对照组相比,TCE致敏组和TCE+po
- 李博栋王贤杨小东张澄杨鹏臧丹丹张家祥朱启星
- 关键词：三氯乙烯CD46聚肌胞苷酸补体
- 补体C3a受体拮抗剂对三氯乙烯致敏小鼠肾脏免疫性损伤的影响被引量：3
- 2017年
- 目的 通过使用C3a受体特异性拮抗剂（C3aRA）研究补体C3a-C3aR在三氯乙烯（TCE）致敏小鼠肾脏免疫性损伤中的作用,探讨职业性三氯乙烯药疹样皮炎（ODMLT）肾脏损伤机制.方法 将42只无特定病原体（SPF）级雌性BALB/c小鼠（6～8周）随机分为空白对照组（5只）、溶剂对照组（5只）、TCE处理组（16只）和TCE＋C3aRA处理组（16只）,其中TCE处理组与TCE＋C3aRA处理组根据皮肤致敏试验评分进一步区分为致敏组和非致敏组.取小鼠血清样品采用生化试剂盒检测小鼠肾功能变化;采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应（qPCR）法检测小鼠肾脏组织中C3aR基因表达水平变化;采用免疫组化法检测小鼠肾脏组织中白细胞介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）蛋白表达水平变化.结果 与溶剂对照组和相应非致敏组比较,TCE致敏组和TCE＋C3aRA致敏组小鼠肌酐（CRE）和尿素氮（BUN）水平明显升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）;与TCE致敏组比较,TCE＋C3aRA致敏组CRE和BUN水平明显降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）.与溶剂对照组和TCE非致敏组比较,TCE致敏组小鼠肾脏组织中C3aR基因表达水平均明显升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）.TCE致敏组和TCE＋C3aRA致敏组小鼠肾脏组织中IL-1β和TNF-α蛋白有大量表达,与TCE致敏组比较,TCE＋C3aRA致敏组肾脏组织中IL-1β和TNF-α蛋白表达水平明显降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 补体C3a-C3aR可能参与TCE致敏小鼠肾脏免疫性损伤,C3aRA对TCE致敏小鼠肾脏免疫性损伤有一定的保护作用.
- 杨鹏臧丹丹杨小东李博栋王贤张家祥朱启星
- 关键词：三氯乙烯白细胞介素类肿瘤坏死因子
- 48例重症药疹临床转归影响因素分析及临床预防被引量：1
- 2022年
- 目的探讨重症药疹临床转归及影响因素。方法收集2013年1月至2018年12月安徽医科大学第一附属医院48例住院重症药疹患者为病例组,以1∶1匹配的方式选取同时期本院健康体检者设置对照组,分析临床资料及实验室检查结果。采用logistic回归法探讨重症药疹治疗转归的影响因素。结果与对照组相比,病例组白细胞、嗜酸性粒细胞及中性粒细胞计数、谷丙转氨酶及谷草转氨酶、血沉、尿素氮、血糖值均升高,红细胞计数、血红蛋白、总蛋白、清蛋白、电解质Na^(+)及HCO_(3)^(-)值降低,差异有统计学意义(P<0.05)。病例组潜伏期2~61 d,平均住院(14.20±9.82)d,治疗有效率为85.42%,各型药疹之间的潜伏期、住院天数及治疗有效率差异无统计学意义(P>0.05)。logistic回归显示谷丙转氨酶值(OR=2.781,P<0.001)、糖皮质激素用量(OR=0.785,P<0.001)及血糖值(OR=1.619,P=0.011)影响重症药疹的临床转归。结论重症药疹可引起多器官损伤,谷丙转氨酶值、糖皮质激素用量、血糖值对重症药疹治疗结局有影响,动态监测肝肾功能、电解质及血糖值对开展临床预防及降低病死率有积极作用。
- 叶良平朱启星
- 关键词：重症药疹临床转归
- 药疹患者血清Th22细胞相关细胞因子和补体蛋白水平变化研究被引量：3
- 2016年
- 目的：了解药疹患者治疗前后血清中Th22细胞相关因子及补体相关指标表达水平的变化，探索其在药疹发生发展中的可能作用。方法35例药疹患者，以1∶1的比例匹配性别、年龄一致的健康对照者，分别采集药疹患者治疗前后及对照组外周血5 ml。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和流式液相多重蛋白定量技术（CBA）检测血清中白细胞介素22（IL-22）、IL-13、肿瘤坏死因子α（TNF-α）及补体蛋白C3a、C4a、C5a。结果治疗前，药疹患者血清中IL-22[（40.85±14.56）ng/L]、IL-13[（869.94±463.39）ng/L]、TNF-α[（1.03±0.64）ng/L]及补体C3a[（55.21±32.98）ng/L]、C4a[（285.11±123.91）ng/L]、C5a表达水平[（279.68±127.72）ng/L]明显高于对照组（分别为29.09±8.66、372.92±151.75、0.44±0.31、42.44±14.26、237.00±63.57和215.98±65.38 ng/L），差异均有统计学意义（t值分别为5.549、6.071、4.321、2.832、2.257、2.495，均P〈0.05）。治疗后，药疹患者血清IL-22[（32.72±11.77）ng/L]、IL-13[（456.21±123.22）ng/L]、TNF-α[（0.64±0.39）ng/L]、C3a[（45.47±21.11）ng/L]、C4a[（241.86±84.12）ng/L]、C5a表达水平[（239.61±103.51）ng/L]均低于治疗前，差异均有统计学意义（t值分别为4.443、5.197、3.572、3.213、2.728、4.772，均P≤0.01），且除IL-22、IL-13水平仍高于对照组外（P〈0.05）， TNF-α及补体C3a、C4a、C5a水平与对照组差异无统计学意义（均P〉0.05）。相关性分析显示，药疹患者治疗前血清补体C3a与C4a（r=0.660）、C5a（r=0.404），C4a与C5a（r=0.501）表达水平呈正相关，均P〈0.05，IL-22表达水平与补体C3a水平呈负相关（r=-0.490，P=0.005），与TNF-α表达水平呈正相关（r=0.573，P=0.005）。结论Th22细胞相关细胞因子及补体活化在药疹发生发展过程中可能起重要作用，且IL-22可能参与补体蛋白的调控。
- 臧丹丹张家祥叶良平杨鹏黄健朱启星
- 关键词：药疹白细胞介素13补体C5ATH22细胞白细胞介素22
- 三氯乙烯致敏小鼠皮肤及血清中白细胞介素-6表达水平研究被引量：7
- 2014年
- 摘要：目的研究三氯乙烯（TCE）致敏小鼠皮肤和血清中细胞因子白细胞介素（IL）-6的表达水平，探讨TCE药疹样皮炎的可能发病机制。方法无特定病原体级6—8周龄雌性BALB／c小鼠85只，随机分成空白对照组（5只）、溶剂对照组（5只）和TCE处理组（75只），TCE处理组于末次激发24h后依据小鼠皮肤致敏情况，分为致敏1、2、3、7、14d亚组和未致敏1、2、3、7、14d亚组，建立小鼠致敏模型；分别在末次激发后1、2、3、7、14d采血，并取皮肤组织。采用酶联免疫吸附测定法和免疫组化法分别测定血清和皮肤中IL-6表达结果。数据分析采用2×5析因设计方差分析，2个因素分别为TCE致敏效应（包括TCE致敏和未致敏2种效应）和致敏时间（包括1、2、3、7和14d5个时点）。结果小鼠致敏率为36．0％。致敏1、2、3、7d亚组血清中IL-6水平均高于空白对照组和溶剂对照组（P〈0．01）。TCE致敏效应和致敏时间存在交互效应（P〈0．01）；致敏3d亚组血清中IL-6表达水平分别高于致敏1、2、7和14d亚组[（86．55±2．73）vs（55．34±3．48）、（86．55±2．73）vs（68．63±3．69）、（86．55±2．73）1）vs（58．13±3．56）、（86．55±2．73）vs（49．73±3．52），P〈0．01]；未致敏3d亚组血清中IL-6表达水平分别高于未致敏1、2、7及14d亚组[（67．58±1．78）vs（49．04±3．24）、（67．58±1．78）vs（58．78±3．39）、（67．58±1．78）vs（49．46±4．33）、（67．58±1．78）vs（45．73±3．44），P〈0．01]。致敏3d亚组皮肤中IL-6表达评分高于溶剂对照组[（2．60±0．55）vs（0．95±0．67），P〈0．01]；皮肤中IL-6表达评分在TCE致敏效应与TCE处理时间的交互效应有统计学意义（P〈0．05）。致敏3d亚组皮肤中IL-6表达评分分别高于致敏1及14d亚组[（2．60±0．55）vs（1．70±0．55）、（2．60±0．55）vs（1．17±0．75），P〈0．05
- 王峰张家祥许述海江涛于均峰沈彤朱启星
- 关键词：三氯乙烯白细胞介素-6血清皮肤变态反应免疫组化技术小鼠
