深圳市科技计划项目(200902158)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：黄小佳李晓铭文博许祥张勇辉更多>>
- 相关机构：深圳市宝安人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 含Survivin启动子条件复制型腺病毒的构建及其对前列腺癌抑瘤效应的体外研究
- 2011年
- 目的:构建携带有Survivin启动子和报告基因的条件复制型腺病毒并观察该病毒对前列腺癌细胞的特异性溶瘤作用。方法:以前列腺癌细胞系LNCaP细胞全基因组DAN为模板.PCR扩增Survivin启动了,构建pGL3BSurvivin质粒表达载体,荧光素酶检测系统观察查列腺癌细胞中Survivin启动子活性。将pGL3BSurvivin亚克隆至穿梭质粒pShuule中,构建含有Survivin启动子的重组腺病毒reADGL3BSurvivin。转染HEK293细胞进行重组病毒的扩增、纯化和滴度检测。利用CCK- 8法检测重组腺病毒对前列腺癌细胞的生长抑制作用,以正常前列腺细胞为对照。结果:经多种限制性内切酶酶切、PCR及测序鉴定,证实成功构建了含Survivin启动子报告基因质粒表达载体。荧光素酶报告基因检测结果表明前列腺癌细胞内Survivin启动子活性明显高于正常细胞组。同时也证实成功构建了含Survivin启动子和报告基因的腺病毒载体;CCK-8结果显示reADGL3BSurvivin可有效抑制前列腺癌细胞增殖而对正常细胞无增殖抑制作用。结论:成功构建含Survivin启动子的条件复制型腺病毒具有选择性杀伤前列腺癌细胞的能力,实验结果为前列腺癌靶向治疗提供了良好的条件复制型病毒载体及新的治疗策略。
- 文博李晓铭黄丽兴黄小佳李春冯海航余贵亮
- 关键词：前列腺肿瘤SURVIVIN启动子
- PTEN增强溶瘤腺病毒对前列腺癌细胞的特异性杀伤作用被引量：2
- 2011年
- 目的研究由survivin启动子调控、携带抑癌基因PTEN的条件复制型重组腺病毒对前列腺癌细胞的杀伤作用。方法构建含有survivin启动子和PTEN基因的重组腺病毒reADGL3BSurvPTEN,感染前列腺癌细胞系和正常前列腺上皮细胞系。利用Western blot检测病毒感染前后前列腺癌细胞中PTEN的表达变化,CCK-8法及流式细胞学检测重组腺病毒对前列腺癌细胞生长及凋亡的影响。结果 PCR结果证实成功构建了含有survivin启动子和PTEN基因的腺病毒载体reADGL3BSurvPTEN,Western blot结果显示感染ADGL3BSurvPTEN后在高表达survivin的前列腺癌细胞中PTEN表达明显增高,而在不表达survivin的正常前列腺细胞中,仅检测到内源性PTEN的表达。CCK-8法及流式细胞术结果表明reADGL3BSurvPTEN病毒对前列腺癌细胞的杀伤作用较不含PTEN基因的腺病毒re-ADGL3Bsurvivin更加明显,对正常前列腺上皮细胞没有显著的杀伤作用。结论成功构建了含有survivin启动子和PTEN基因的条件复制型腺病毒,该病毒对前列腺癌细胞有显著的杀伤作用,实验结果为前列腺癌细胞靶向治疗提供了更为良好的条件复制型病毒载体及新的治疗策略。
- 文博李晓铭徐丽娟黄小佳邱建忠张勇辉许祥
- 关键词：SURVIVIN启动子PTEN前列腺癌
