海南省自然科学基金(809038)
- 作品数:5 被引量:19H指数:2
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- 发文基金:“十二五”国家科技计划农村领域海南省自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 香蕉凝集素基因启动子5′远端的分离分析及鉴定
- 2012年
- 在已知香蕉果实特异表达凝集素(BanLec)启动子670 bp序列的基础上,利用染色体步移方法,克隆获得该段序列5′端上游远端序列330 bp,从而得到该启动子1 000 bp序列。通过Promoter predictions、Plant CARE软件分析表明,新获得的BanLec启动子5′端330 bp序列中具有更多组织特异性表达调控元件。构建总长度为1 000 bp的BanLec启动子表达载体,以35 S启动子和原有670 bp长度BanLec启动子表达载体为对照,利用基因枪转化香蕉根、叶和果实,测量GUS基因和GFP基因瞬时表达,结果证明长度为1 000 bp BanLec启动子为果实特异表达启动子,启动活性高于原有的670 bp BanLec启动子和35S启动子。
- 张建斌金志强王纪刘菊华贾彩红徐碧玉
- 关键词:启动子
- 香蕉苹果酸脱氢酶基因克隆及其逆境胁迫表达被引量:14
- 2012年
- 从香蕉果实抑制差减文库中获得一条香蕉苹果酸脱氢酶基因片段,采用RACE技术获得全长,命名为MaMDH;MaMDH基因全长1 249bp,编码332个氨基酸。生物信息学分析预测其编码蛋白分子量约35 448Da,等电点为6.53。与已知植物苹果酸脱氢酶基因相比,氨基酸同源性均达92%。保守结构域分析发现,MaMDH基因具有NAD结合位点、苹果酸结合位点和二聚体结合位点。系统进化树比对分析表明,MaMDH与玉米和小麦的亲缘关系较近。MaMDH基因在乙烯利处理香蕉苗中上调表达;在盐、Al 3+胁迫和香蕉尖孢镰刀菌4号生理小种处理幼苗中先上调表达,后下调表达;在冷害胁迫幼苗中先下调表达,后上调表达;而在干旱胁迫、伤害胁迫幼苗中表达没有明显变化。研究表明,香蕉中的苹果酸脱氢酶基因具有响应生物胁迫和非生物胁迫能力,可能在香蕉适应衰老、盐、铝、低温胁迫和枯萎病菌侵染等逆境中发挥重要作用。
- 张建斌贾彩红邓秋菊金志强刘菊华张建平徐碧玉
- 关键词:香蕉苹果酸脱氢酶逆境胁迫荧光定量PCR
- 香蕉未成熟雄花组织培养与快速繁殖研究被引量:5
- 2012年
- 以香蕉未成熟雄花为外植体,进行组织培养和快速繁殖研究。结果表明,香蕉未成熟雄花外植体不消毒处理,在离体24 h内切片厚度1.2 mm为最佳外植体处理方式。最佳愈伤组织诱导培养基为MS+TDZ 0.2 mg/L+Zeatin 0.2 mg/L+生物素1.0 mg/L+谷氨酰胺100 mg/L+糖40 g/L(pH值5.3);最佳胚性分化培养基为MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L+糖30 g/L(pH值5.8);最佳生根培养基为MS+IBA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L(pH值5.8)。炼苗后移栽至椰糠基质中,移栽成活率100%。
- 张建斌贾彩红刘菊华金志强徐碧玉
- 关键词:香蕉快速繁殖
- 利用转基因技术初步鉴定香蕉RNA解旋酶基因功能
- 2012年
- 本研究利用前期抑制差减杂交技术筛选获得的香蕉果实上调表达的基因片段,经NCBI比对,表明该基因片段属于香蕉ATP依赖的RNA解旋酶(Helicase)基因家族成员,含有完整的RNA解旋酶超家族C-末端结构域HELICc结构。经Southern杂交证实,此RNA解旋酶基因在香蕉基因组中只有一个拷贝。构建RNA解旋酶基因的反义基因植物表达载体PBIPC86,转化番茄获得6株转基因番茄植株。转基因番茄植株的叶、花和生长形态均有变异,部分转基因番茄生长势弱。该研究结果对鉴定香蕉RNA解旋酶基因功能奠定了初步基础。
- 张建斌刘菊华贾彩红金志强徐碧玉
- 关键词:香蕉RNA解旋酶反义基因番茄
- 香蕉ACS启动子酵母单杂交报告载体的构建
- 2012年
- 对香蕉ACS基因启动子进行分析,选取关键元件通过人工合成和套叠PCR技术得到一段191 bp长度含有3个重复元件的DNA序列,把该序列构建报告载体pMmakeHIS2,经过酵母单杂交实验,结果表明:载体构建成功,单杂交筛选转录因子效果良好。pMmakeHIS2转化效率达到1.6×106个克隆/3μg,酵母单杂交获得156个阳性克隆,实验为研究香蕉ACS基因调控因子打下基础。
- 张建斌张建平贾彩红刘菊华金志强徐碧玉
- 关键词:香蕉酵母单杂交
- 香蕉未成熟雄花再生体系的建立
- 材料为香蕉(Musa spp.AAA Group)品种‘巴西蕉’断蕾期雄花,采自海南省海口市香蕉标准化种植示范园区。逐步剥除香蕉雄花苞片,至雄花长度为9~10 cm时转入超净工作台继续剥除苞片,至雄花长度为2.0~2.5...
- 张建斌贾彩红刘菊华金志强徐碧玉
- 关键词:香蕉雄花
- 文献传递