国家科技重大专项(2011zx10004-001)
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
- 相关作者：林方康晓平杨银辉钱爱东李裕昌更多>>
- 相关机构：吉林农业大学军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 森林脑炎病毒E基因DomainⅢ段的克隆表达及鉴定被引量：4
- 2012年
- 从森林脑炎病毒森张株的细胞培养液中提取总RNA,通过RT-PCR扩增E蛋白基因DomainⅢ段,克隆入原核表达载体GSTpET-30a(+)中,构建重组原核表达质粒,用IPTG诱导表达。表达产物经Ni2+亲和层析柱纯化后,进行Western blot鉴定,并用针对不同病毒的兔免疫血清验证其检测特异性。重组原核表达质粒GSTpET-30a-ED3经酶切证明构建正确。表达的重组蛋白相对分子质量约为41 kD,主要以包涵体的形式表达,并可与TBE阳性兔免疫血清特异性反应。结果表明:成功克隆了森林脑炎病毒森张株E蛋白基因DomainⅢ段,并在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,获得的ED3蛋白质具有良好的特异性。
- 朱晓磊林方康晓平李裕昌杨银辉钱爱东
- 关键词：森林脑炎病毒E基因克隆表达
