公共文化服务平台

共 8 条记录，以下是 1-8

全选清除导出

排序方式：

抗克伦特罗单链抗体可溶性表达及特性鉴定被引量：4: 2007年; 目的:表达抗克伦特罗(CBL)可溶性单链抗体(scFv)并进行抗原结合活性鉴定。方法:利用呈现scFv的重组噬菌体感染大肠杆菌HB2151,IPTG诱导可溶性scFv表达。渗透休克法提取菌体细胞周质腔中scFv。经SDS-PAGE、Western-Blotting以及间接ELISA法分析检测可溶性scFv的表达,并采用间接竞争ELISA法鉴定scFv的抗原结合活性。结果:细菌培养上清及周质腔中均有抗CBL可溶性scFv表达,其分子量约为29kD;上清液及周质腔中scFv效价分别为1:80,1:1600,能够被CBL竞争性抑制,IC50分别为0.78、0.95ng/ml。结论:可溶性抗CBLscFv在大肠杆菌HB2151中获得成功表达,表达的scFv与CBL具有很好的结合活性,可用于进一步建立CBL相应的免疫学检测方法。; 王弘潘科杨金易张宏斌王捷武婕雷红涛孙远明; 关键词：克伦特罗单链抗体可溶性表达

以UPS构建的重组酿酒酵母表达载体及其稳定性研究被引量：2: 2005年; 采用通用载体质粒融合系统UPS构建了一种以绿色荧光蛋白GFP为报告基因的酿酒酵母表达载体pYES-GFP,并研究了其在重组酿酒酵母中的稳定性。实验表明,所构建的附加型质粒pYES-GFP在经近100代传代后,仍未发生丢失,具有良好的稳定性。同时,通过实验验证了,UPS在进行表达载体构建时快速、简便、高效。; 王弘郑文岭杨太成冼江; 关键词：酿酒酵母 GFP基因 UPS 重组酿酒酵母表达载体构建酵母表达载体绿色荧光蛋白

农产品安全检测中生物传感器的应用被引量：3: 2005年; 围绕农药和化肥残留、重金属污染、激素和兽药残留以及生物污染物等农产品安全性的主要指标,该文对生物传感器在农产品安全检测领域中最新的发展动态进行了综述,并对其发展前景和存在问题进行了评述。; 王弘陈山刘仲明; 关键词：农产品生物传感器安全检测痕量分析

小分子化合物高特异性识别体制备新技术被引量：4: 2007年; 无论在医学领域还是在食品安全领域小分子化合物的识别与检测已成为目前研究的热点和难点,抗体在识别小分子化合物上还存在许多不足,SELEX技术与Anticalin制备技术的出现为小分子化合物识别带来了希望,本文主要介绍了SELEX技术与Anticalin制备技术的原理特点及其研究进展与应用。; 杨金易王弘潘科孙远明; 关键词：SELEX技术小分子化合物

以GFP为报告基因的酿酒酵母mRNA在哺乳动物细胞中的表达被引量：1: 2005年; 目的　研究酵母mRNA在哺乳动物细胞中的翻译表达。方法　半乳糖诱导GFP基因在酿酒酵母细胞中表达,提取其mRNA ,RT -PCR鉴定,并以脂质体为介导,对血管内皮细胞HUVEC以及绿猴肾细胞COS - 7进行体外转染。结果　被转染HUVEC和COS - 7细胞分别出现绿色荧光,报告基因GFPmRNA在动物细胞中被识别、翻译。结论　提示酵母mRNA可能作为基因治疗物质应用于口服基因治疗的研究。; 王弘郑文岭杨太成冼江马文丽; 关键词：GFP 报告基因酿酒酵母 MRNA 哺乳动物细胞

抗克伦特罗单链抗体在毕赤酵母GS115中的表达被引量：1: 2011年; 构建表达抗克伦特罗单链抗体(CBL scFv)的毕赤酵母菌株,筛选高拷贝转化子并诱导CBL scFv在毕赤酵母中的分泌表达。将构建的含有CBL scFv基因的重组真核表达载体pPICZαA-CBL经BstX I酶切线性化后,利用电转化方法转化毕赤酵母菌GS115感受态细胞,通过Zeocin抗性平板筛选高拷贝转化子,以甲醇诱导蛋白表达,对表达产物进行SDS-PAGE、Western blotting鉴定及ELISA活性分析。结果显示,通过筛选出的重组毕赤酵母菌株分泌表达了1个分子量约为41kDa的蛋白,该蛋白可与鼠抗His标签单克隆抗体发生特异性结合,且可被游离的CBL竞争性抑制,IC50值为5.1ng/mL。经检测,重组抗体表达量为0.095g/L。这说明分泌表达CBL scFv的毕赤酵母菌株构建成功,为后期CBL scFv发酵与制备奠定了基础。; 陈舒迟何永盛徐小艳陆田珍王弘; 关键词：克伦特罗单链抗体毕赤酵母蛋白表达

抗克伦特罗噬菌体单链抗体库的构建、筛选及鉴定被引量：10: 2005年; 利用噬菌体展示技术构建克伦特罗(CBL)单链抗体(scFv)库,从中筛选CBL特异性噬菌体scFv,从而成功扩增出抗CBL的VL,VH基因片段并采用重叠延伸PCR拼接为全长的scFv基因片段,抗体库库容约为1.6×104,经4轮吸附—洗脱—扩增的富集,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法筛选到6个具有CBL结合活性的噬菌体scFv,为进一步大量表达CBL单链抗体奠定了基础.; 潘科王弘张宏斌王捷雷红涛杨金易孙远明; 关键词：克伦特罗单链抗体噬菌体展示

以GFP为报告基因的重组酿酒酵母消化道转基因研究被引量：1: 2005年; 目的以GFP为报告基因,研究重组酿酒酵母消化道途径转基因的可能.方法以6～8周龄Balb/c小鼠为实验对象,根据管饲材料不同对动物进行分组:第1组为空白对照组;第2组管饲酿酒酵母INVScl;第3组管饲携带酿酒酵母-哺乳动物细胞穿梭载体pYES-CMV-GFP的重组酿酒酵母;每次每只Balb/c小鼠灌胃0.3lml(108个)重组酿酒酵母悬浮液,2 d 1次,持续4周后采用免疫组织化学染色法检测小鼠小肠、肝脏、脾脏组织中GFP基因的表达.结果在第3组小鼠小肠、肝和脾组织中,有免疫组化呈阳性的检测结果,其中6只小鼠中的4只小肠组织免疫组化结果呈阳性,肝脏、脾脏分别有1只免疫组化结果呈阳性,而阴性对照组中小鼠的各组织结果均呈阴性.结论以酿酒酵母作为基因载体实现消化道途径转基因存在可能,为进一步研究酿酒酵母在基因治疗药物载体上的应用提供了实验基础.; 王弘郑文岭詹纯利肖育华马文丽; 关键词：转基因研究 GFP基因报告基因免疫组织化学染色法小肠组织脾脏组织

全选清除导出

共1页<1>

广东省自然科学基金(04300502)