山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(02BS082)
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 相关作者：李伟马春燕董泗芹沙丹张伟更多>>
- 相关机构：山东大学山东省立医院更多>>
- 发文基金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胸苷激酶和胞嘧啶脱氨酶融合基因抑骨肉瘤生长的研究被引量：4
- 2007年
- 目的观察单纯疱疹病毒-胸苷激酶／胞嘧啶脱氨酶融合自杀基因（HSV-TK／CD）对裸鼠骨肉瘤生长的影响。方法人骨肉瘤细胞系MG-63细胞于裸鼠成瘤后将其分为6组：（1）PBS对照组；（2）重组腺病毒（adenovirus，Ad）-Lac-Z／GCV＋5-FC组；（3）Ad-TK／GCV组；（4）Ad-CD／5-Fc组；（5）Ad-TK／GCV＋Ad-CD／5-FC组；（6）Ad-TK-CD／GCV＋5-Fc组。各组经治疗后观察肿瘤的生长状况及组织病理学改变。结果（2）组与（1）组比较，肿瘤体积与肿瘤坏死程度差异无统计学意义（P〉0．05）；与（1）、（2）组比较，（3）-（6）组肿瘤的生长均受到明显抑制（P〈0．05），且（5）、（6）组与（3）、（4）比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论融合自杀基因HSV-TK／CD对裸鼠骨肉瘤生长有明显的抑制作用。
- 李伟董泗芹马春燕
- 关键词：骨肉瘤单纯疱疹病毒胞嘧啶脱氨酶基因治疗
- 融合自杀基因抑骨肉瘤生长的实验研究被引量：3
- 2009年
- 目的观察单纯疱疹病毒-胸苷激酶/胞嘧啶脱氨酶融合自杀基因(HSV-TK/CD)对骨肉瘤细胞增殖的影响和对裸鼠骨肉瘤生长的影响。方法将含TK/CD的重组腺病毒载体感染人骨肉瘤细胞系MG-63细胞,测定感染效率后分别给予不同浓度的前体药物和不同感染复数的自杀基因重组腺病毒作用于瘤细胞,测定细胞A值计算瘤细胞增殖抑制率,MTT法测定细胞存活率,并用流式细胞术和Hochest33342染色法分析其杀伤机制;人骨肉瘤细胞系MG-63细胞于裸鼠成瘤后将其分为6组(每组8只):PBS对照组(A组);重组腺病毒(Ad)-Lac-Z/GCV+5-FC组(B组);Ad-TK/GCV组(C组);Ad-CD/5-FC组(D组);Ad-TK/GCV+Ad-CD/5-FC组(E组);Ad-TK-CD/GCV+5-FC组(F组)。各组经治疗后观察肿瘤的生长状况及组织病理学改变。结果含自杀基因的重组腺病毒成功感染MG-63细胞;不同感染复数和不同前体药物浓度下,融合自杀基因系统对瘤细胞的杀伤作用明显强于单基因作用和双基因相加的作用,且有显著性差异(P<0.05);杀伤机制为致细胞坏死和细胞凋亡。裸鼠实验中,B组与A组比较,肿瘤体积与肿瘤坏死程度无明显差异(P>0.05);与A、B组相比较,C～F组肿瘤的生长均受到明显抑制(P<0.05),且E、F组与C、D比较有显著性差异(P<0.05)。结论融合自杀基因HSV-TK/CD对骨肉瘤细胞系MG-63细胞和裸鼠骨肉瘤的生长均有明显的抑制作用。
- 李伟沙丹马春燕
- 关键词：骨肉瘤胞嘧啶脱氨酶基因MG-63细胞裸鼠
- 融合自杀基因对骨肉瘤细胞作用的实验研究
- 2009年
- 目的观察单纯疱疹病毒-胸苷激酶/胞嘧啶脱氨酶融合自杀基因(HSV-TK/CD)对骨肉瘤细胞增殖的影响。方法将含TK/CD的重组腺病毒载体感染人骨肉瘤细胞系MG-63细胞,测定感染效率后,分别给予不同浓度的前体药物和不同感染复数的自杀基因重组腺病毒,计算瘤细胞增殖抑制率,MTT法测定细胞存活率,并用流式细胞术和Hochest33342染色法分析杀伤机制。结果含自杀基因的重组腺病毒成功感染MG-63细胞;不同感染复数和不同前体药物浓度下,融合自杀基因系统对瘤细胞的杀伤作用明显强于单基因和双基因相加的作用(P<0.05);其杀伤机制为致细胞坏死和细胞凋亡。结论融合自杀基因HSV-TK/CD对骨肉瘤细胞系MG-63细胞的生长有明显的抑制作用。
- 李伟焦宗乾孙成良刘立成
- 关键词：骨肉瘤胸苷激酶基因胞嘧啶脱氨酶基因融合自杀基因
- 重组共表达载体pSNAV2.0-HSV1-tk-IRES-hIL-1Ra的构建及其在滑膜细胞中的表达被引量：2
- 2009年
- 目的引入内部核糖体进入位点(IRES),构建HSV1-tk与hIL-1Ra双基因共表达AAV重组载体并检测其在滑膜细胞中的表达。方法PCR扩增HSV1-tkI、RES及hIL-1Ra基因片段,分别与pMD18-T simple载体连接,测序后,hIL-1Ra与HSV1-tk先后插入pMD-IRES,构建重组质粒pMD-HSV1-tk-IRES-hIL-1Ra,酶切出HSV1-tk-IRES-hIL-1Ra片段,克隆至AAV载体质粒pSNAV2.0上,构建成重组共表达质粒pSNAV2.0-HSV1-tk-IRES-hIL-1Ra,酶切鉴定后,用脂质体转染上述质粒至原代骨关节炎(OA)滑膜细胞,RT-PCR法鉴定共表达质粒在滑膜细胞中的表达。结果酶切鉴定证实重组共表达质粒构建正确;RT-PCR检测到转染后的OA滑膜细胞中表达HSV1-tk与hIL-1Ra。结论成功构建了重组共表达质粒pSNAV2.0-HSV1-tk-IRES-hIL-1Ra;重组质粒转染OA滑膜细胞后,能表达HSV1-tk与hIL-1Ra。这为OA的基因治疗研究提供了理论依据。
- 刘青春李伟张伟王来城张捷杨东吴帅
- 关键词：胸苷激酶白细胞介素滑膜骨关节炎
