目的研究c-myc对乙型肝炎病毒X蛋白(Hepatitis B virus X,HBx)诱导肝卵圆细胞恶性转化的影响。方法通过HEK293细胞扩增腺病毒获得高滴度的Ad-EGFP和Ad-HBx,分别感染肝卵圆细胞株WB-F344细胞,通过RTPCR和Western blot验证HBx蛋白对c-myc表达的影响。应用特异性对应c-myc基因的siRNA转染各组细胞。运用体外成瘤法、流式细胞术、细胞迁移实验,观察c-myc特异性siRNA对HBx诱导卵圆细胞恶性转化的影响。结果与空白对照组Ad-EGFP相比,实验组转染Ad-HBx后,细胞中的c-myc表达水平增高;WB-F344-HBx细胞G0/G1期细胞比例显著降低、S期细胞比例显著升高;第1天3组细胞都以单细胞形式悬浮生长,随着时间延长,WB-F344-HBx细胞逐渐形成致密的细胞球体并且数量逐渐增多、体积逐渐增大;WB-F344-HBx细胞的迁移能力显著高于对照组。WB-F344-Mock和WB-F344-EGFP组之间各项指标均无明显差异。c-myc基因沉默后,3组细胞间各项指标均无明显差异。结论乙型肝炎病毒X蛋白通过激活c-myc基因从而诱导肝卵圆细胞恶性转化。
